| 中文摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 第一章 前言 | 第11-27页 |
| 1.1 铅 | 第11-17页 |
| 1.1.1 铅的理化性质与用途 | 第11页 |
| 1.1.2 铅进入人体的途径及代谢过程 | 第11-12页 |
| 1.1.3 铅对机体产生的毒性作用 | 第12-14页 |
| 1.1.4 铅的毒性作用机制 | 第14-16页 |
| 1.1.5 铅对线粒体的损伤 | 第16页 |
| 1.1.6 铅对自噬的诱导 | 第16-17页 |
| 1.2 线粒体自噬 | 第17-24页 |
| 1.2.1 线粒体自噬概述 | 第17-19页 |
| 1.2.2 哺乳动物细胞线粒体自噬的途径 | 第19-23页 |
| 1.2.3 调控PINK1/Parkin途径的主要因素 | 第23-24页 |
| 1.3 ATM蛋白 | 第24-26页 |
| 1.3.1 ATM蛋白概述 | 第24-25页 |
| 1.3.2 ATM蛋白对线粒体自噬的调控 | 第25-26页 |
| 1.4 研究目的与意义 | 第26-27页 |
| 第二章 材料与方法 | 第27-52页 |
| 2.1 细胞系 | 第27页 |
| 2.2 实验动物 | 第27页 |
| 2.3 抗体 | 第27-28页 |
| 2.4 主要试剂 | 第28-30页 |
| 2.5 主要仪器和设备 | 第30-31页 |
| 2.6 主要溶液配制 | 第31-35页 |
| 2.6.1 细胞培养相关溶液的配制 | 第31-32页 |
| 2.6.2 细胞处理相关药品的配制 | 第32页 |
| 2.6.3 胞浆及线粒体蛋白提取相关溶液的配制 | 第32页 |
| 2.6.4 菌种保存及质粒鉴定相关溶液的配制 | 第32-33页 |
| 2.6.5 siRNA溶液的制备 | 第33页 |
| 2.6.6 荧光染色及免疫荧光实验相关溶液的配制 | 第33页 |
| 2.6.7 免疫印迹及免疫沉淀相关溶液的配制 | 第33-35页 |
| 2.7 实验方法 | 第35-52页 |
| 2.7.1 细胞培养及药物处理 | 第35-36页 |
| 2.7.2 雄性昆明小鼠的分组与药物处理 | 第36-38页 |
| 2.7.3 菌种保存与鉴定 | 第38-39页 |
| 2.7.4 MTT法检测细胞活力 | 第39页 |
| 2.7.5 AnnexinV-FITC/PI双染检测细胞凋亡 | 第39-40页 |
| 2.7.6 DCFH-DA法检测细胞内活性氧水平 | 第40页 |
| 2.7.7 罗丹明123染色测定线粒体膜电位 | 第40页 |
| 2.7.8 MTG与LTR染色示踪线粒体自噬溶酶体 | 第40-41页 |
| 2.7.9 胞浆与线粒体蛋白的提取 | 第41-42页 |
| 2.7.10 YFP-PINK1质粒的构建 | 第42-46页 |
| 2.7.11 无内毒素质粒的提取 | 第46页 |
| 2.7.12 siRNA与质粒的瞬时转染 | 第46-47页 |
| 2.7.13 RNA提取 | 第47页 |
| 2.7.14 实时定量PCR | 第47-48页 |
| 2.7.15 免疫荧光实验 | 第48-49页 |
| 2.7.16 免疫印迹实验 | 第49-51页 |
| 2.7.17 免疫共沉淀实验 | 第51页 |
| 2.7.18 统计学分析与制图 | 第51-52页 |
| 第三部分 实验结果 | 第52-71页 |
| 3.1 Pb(Ac)_2诱导HEK293和GM00637细胞发生自噬及线粒体损伤 | 第52-55页 |
| 3.2 Pb(Ac)_2诱导HEK293和GM00637细胞发生PINK1/Parkin介导的线粒体自噬 | 第55-58页 |
| 3.3 Pb(Ac)_2激活HEK293和GM00637细胞中的ATM蛋白 | 第58-59页 |
| 3.4 Pb(Ac)_2诱导小鼠肾皮质和肝脏细胞发生PINK1/Parkin介导的线粒体自噬并激活ATM蛋白 | 第59-62页 |
| 3.5 Pb(Ac)_2激活的ATM参与调控PINK1/Parkin介导的线粒体自噬 | 第62-65页 |
| 3.6 Pb(Ac)_2暴露下ATM与PINK1发生相互作用 | 第65-68页 |
| 3.7 ATM影响PINK1和Parkin的磷酸化水平 | 第68-71页 |
| 第四章 讨论 | 第71-77页 |
| 4.1 Pb(Ac)_2对细胞自噬和线粒体的影响 | 第71-72页 |
| 4.2 Pb(Ac)_2对PINK1/Parkin介导的线粒体自噬的影响 | 第72-73页 |
| 4.3 Pb(Ac)_2诱导ATM的激活 | 第73-74页 |
| 4.4 ATM对PINK1/Parkin介导的线粒体自噬的调控作用 | 第74-77页 |
| 第五章 结论与展望 | 第77-78页 |
| 5.1 主要结论 | 第77页 |
| 5.2 研究展望 | 第77-78页 |
| 参考文献 | 第78-90页 |
| 在学期间的研究成果 | 第90-91页 |
| 致谢 | 第91-92页 |
| 附录 | 第92-93页 |
