| 摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-24页 |
| 1.1 前言 | 第14-15页 |
| 1.2 Kisspeptin的发现 | 第15页 |
| 1.3 Kisspeptin的结构特性 | 第15-16页 |
| 1.4 Kisspeptin的分布定位 | 第16页 |
| 1.5 GPR54的发现 | 第16-17页 |
| 1.6 GPR54的分布定位 | 第17页 |
| 1.7 Kisspeptin激活GPR54时引发的信号通路 | 第17-19页 |
| 1.7.1 磷脂酶C(PLC)的激活和钙离子内流 | 第17-18页 |
| 1.7.2 Kisspeptin/GPR54信号转导过程与趋化因子信号通路的功能相互作用. | 第18页 |
| 1.7.3 丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)相关通路的激活 | 第18-19页 |
| 1.7.4 核因子NFkB和MMP- | 第19页 |
| 1.8 Kisspeptin/GPR54系统的生理功能 | 第19-22页 |
| 1.8.1 Kisspeptin/GPR54系统对肿瘤的影响 | 第19-20页 |
| 1.8.2 Kisspeptin/GPR54系统对生殖的调节作用 | 第20-21页 |
| 1.8.3 Kisspeptin/GPR54系统对内分泌的影响 | 第21页 |
| 1.8.4 Kisspeptin/GPR54系统的其他作用 | 第21-22页 |
| 1.9 本课题的研究目的及意义 | 第22-24页 |
| 第二章 转录组数据库构建及GPR54-Like基因筛选 | 第24-30页 |
| 2.1 材料与方法 | 第24-25页 |
| 2.1.1 数据采集 | 第24-25页 |
| 2.1.2 组装及结果分析 | 第25页 |
| 2.2 结果与分析 | 第25-29页 |
| 2.2.1 转录组测序结果分析 | 第25-28页 |
| 2.2.2 GPR54基因的数据筛选及解析 | 第28-29页 |
| 2.3 讨论 | 第29-30页 |
| 第三章 刺参GPR54L基因克隆和特征分析 | 第30-48页 |
| 3.1 材料与方法 | 第30-38页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第30-32页 |
| 3.1.2 总RNA提取 | 第32页 |
| 3.1.3 刺参GPR54全长cDNA扩增 | 第32-37页 |
| 3.1.4 AjGPR54L生物信息学分析 | 第37-38页 |
| 3.2 结果与分析 | 第38-45页 |
| 3.2.1 RNA提取结果 | 第38-39页 |
| 3.2.2 AjGPR54LcDNA基因扩增结果 | 第39页 |
| 3.2.3 AjGPR54LcDNA基因全长序列分析 | 第39-43页 |
| 3.2.4 AjGPR54L序列系统进化树 | 第43-45页 |
| 3.3 讨论 | 第45-48页 |
| 第四章 刺参GPR54L的亚细胞定位及组织表达分析 | 第48-58页 |
| 4.1 材料与方法 | 第49-54页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第49页 |
| 4.1.2 不同组织总RNA提取 | 第49页 |
| 4.1.3 AjGPR54-EGFP载体的构建 | 第49-51页 |
| 4.1.4 HEK293细胞复苏、培养、和冻存 | 第51-52页 |
| 4.1.5 细胞转染 | 第52页 |
| 4.1.6 荧光染料染细胞核和细胞膜 | 第52页 |
| 4.1.7 cDNA模板合成 | 第52-53页 |
| 4.1.8 实时荧光定量PCR | 第53-54页 |
| 4.2 结果与分析 | 第54-56页 |
| 4.2.1 AjGPR54-EGFP表达载体的构建 | 第54-55页 |
| 4.2.2 AjGPR54L-EGFP在HEK293细胞中的亚细胞定位 | 第55-56页 |
| 4.2.3 AjGPR54L基因在刺参不同组织器官中的分布 | 第56页 |
| 4.3 讨论 | 第56-58页 |
| 第五章 总结与展望 | 第58-60页 |
| 5.1 全文总结 | 第58页 |
| 5.2 后续研究展望 | 第58-60页 |
| 参考文献 | 第60-68页 |
| 致谢 | 第68-70页 |
| 在校期间发表的学术论文及研究成果 | 第70页 |
