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具有抗南方水稻黑条矮缩病活性的药物小分子与水稻体内防御基因及PR-1a蛋白的相互作用研究

摘要第5-6页
Abstract第6-7页
前言第10-12页
第一章 文献综述第12-21页
    1.1 病程相关蛋白第12-16页
        1.1.1 病程相关蛋白的产生、定义和诱导因素第12页
        1.1.2 病程相关蛋白的物理特性、分类和功能第12-13页
        1.1.3 PR-1 蛋白第13-15页
        1.1.4 病程相关蛋白与抗病性之间的关系第15-16页
    1.2 南方水稻黑条矮缩病第16-17页
    1.3 小分子与蛋白相互作用研究进展第17-19页
        1.3.1 荧光光谱法第17-18页
        1.3.2 ITC第18-19页
    1.4 结语第19-21页
第二章 论文设计及研究路线第21-24页
    2.1 研究目的和意义第21页
    2.2 拟解决的主要问题第21-22页
    2.3 研究内容第22-23页
        2.3.1 感染SRBSDV水稻毒株的获得第22页
        2.3.2 PR-1a基因的表达调控第22页
        2.3.3 重组质粒的构建第22页
        2.3.4 PR-1a蛋白的表达与纯化第22页
        2.3.5 药物小分子与PR-1a蛋白的相互作用第22-23页
    2.4 技术路线第23-24页
第三章 材料与方法第24-43页
    3.1 实验材料第24-28页
        3.1.1 供试毒源和虫源第24页
        3.1.2 引物第24页
        3.1.3 载体和菌株第24页
        3.1.4 供试化合物第24-25页
        3.1.5 实验试剂第25-26页
        3.1.6 实验仪器设备第26-27页
        3.1.7 主要溶液的配制方法第27-28页
    3.2 实验方法与步骤第28-43页
        3.2.1 感染SRBSDV水稻毒源的扩增第28页
        3.2.2 活体实验第28页
        3.2.3 水稻样本RNA的提取第28-29页
        3.2.4 反转录第29-30页
        3.2.5 水稻带毒情况的检测第30页
        3.2.6 荧光定量PCR第30-31页
        3.2.7 PR-1a目的基因片段的扩增与回收第31-32页
        3.2.8 pGEX-6P-1 质粒DNA和目的DNA片段的酶切第32-35页
        3.2.9 重组质粒的构建及鉴定第35-36页
        3.2.10 PR-1a蛋白的小试表达第36-38页
        3.2.11 PR-1a蛋白的大量表达第38-39页
        3.2.12 PR-1a蛋白的纯化第39-41页
        3.2.13 PR-1a蛋白与药物小分子的相互作用第41-43页
第四章 结果与讨论第43-59页
    4.1 水稻总RNA的纯度检测第43页
    4.2 水稻带毒情况的检测第43-44页
    4.3 毒氟磷和宁南霉素诱导水稻体内PR-1a基因的表达研究第44-46页
    4.4 PR-1a基因片段的扩增第46-47页
    4.5 质粒pGEX-6P-1 的提取及检测第47-48页
    4.6 重组质粒pGEX-6P1PR-1a的构建及验证第48-50页
        4.6.1 重组质粒的构建第48页
        4.6.2 重组质粒的验证第48-50页
    4.7 重组质粒pGEX-6P1PR-1a的小试表达第50-51页
    4.8 重组质粒pGEX-6P1PR-1a的大量表达第51-52页
    4.9 PR-1a蛋白的纯化第52-55页
        4.9.1 PR-1a蛋白的变性第52-53页
        4.9.2 PR-1a蛋白的MS鉴定第53页
        4.9.3 PR-1a蛋白的复性第53-54页
        4.9.4 PR-1a蛋白的定量第54-55页
    4.10 PR-1a蛋白与抗病毒剂的相互作用研究第55-59页
        4.10.1 荧光滴定第55-56页
        4.10.2 ITC第56-59页
第五章 结论第59-61页
    5.1 主要结论第59-60页
    5.2 本文创新之处第60页
    5.3 本文的不足之处第60-61页
致谢第61-62页
参考文献第62-67页
附录第67-68页
    课题来源第67页
    论文发表情况第67-68页

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