| 致谢 | 第12-13页 |
| 摘要 | 第13-14页 |
| Abstract | 第14-15页 |
| 缩略语表 | 第16-17页 |
| 缩略语表(续) | 第17-18页 |
| 第一章 文献综述与研究目的及意义 | 第18-38页 |
| 1.1 RCA的研究进展 | 第18-31页 |
| 1.1.1 RCA的发现、分子基础和蛋白结构 | 第18-22页 |
| 1.1.1.1 RCA的发现 | 第18页 |
| 1.1.1.2 RCA的分子基础 | 第18-19页 |
| 1.1.1.3 RCA蛋白的二级及三级结构 | 第19-22页 |
| 1.1.2 RCA对Rubisco的催化功能研究 | 第22-25页 |
| 1.1.2.1 RCA活化Rubisco的基础 | 第22-24页 |
| 1.1.2.2 RCA活化Rubisco的作用机制 | 第24-25页 |
| 1.1.3 RCA活化Rubisco的活性调节 | 第25-28页 |
| 1.1.3.1 RCA的ADP/ATP调节 | 第25-26页 |
| 1.1.3.2 硫氧还蛋白-f介导的氧化还原调节 | 第26-27页 |
| 1.1.3.3 RCA的磷酸化调节 | 第27-28页 |
| 1.1.4 RCA与高温 | 第28-31页 |
| 1.1.4.1 高温对RCA基因表达的影响 | 第29页 |
| 1.1.4.2 高温对RCA转录的影响 | 第29-30页 |
| 1.1.4.3 高温对RCA结构的影响 | 第30页 |
| 1.1.4.4 高温对RCA分布的影响 | 第30页 |
| 1.1.4.5 高温对RCA聚合度的影响 | 第30-31页 |
| 1.1.4.6 高温对RCA结合热激蛋白的影响 | 第31页 |
| 1.2 CPN60的研究进展 | 第31-36页 |
| 1.2.1 CPN60的发现与分类 | 第31-32页 |
| 1.2.2 CPN60的结构与保守的蛋白折叠功能 | 第32-34页 |
| 1.2.3 CPN60的其他多样性功能研究 | 第34-35页 |
| 1.2.4 植物中的CPN60 | 第35-36页 |
| 1.3 本研究意义 | 第36-37页 |
| 1.4 研究内容与目标 | 第37-38页 |
| 第二章 不同RCA表达水平转基因材料的光合荧光研究 | 第38-54页 |
| 2.1 引言 | 第38页 |
| 2.2 材料和方法 | 第38-45页 |
| 2.2.1 水稻材料和培养方法 | 第38-39页 |
| 2.2.2 DNA和RNA的提取 | 第39页 |
| 2.2.3 RCA的定量及半定量分析 | 第39-41页 |
| 2.2.4 RCA蛋白提取及Western印迹 | 第41页 |
| 2.2.5 RCA蛋白的ELISA及双夹心ELISA分析 | 第41页 |
| 2.2.6 RCA干涉表达载体的构建以及转基因阳性苗的获得 | 第41-42页 |
| 2.2.7 CO_2气体交换参数的测定 | 第42页 |
| 2.2.8 叶绿素荧光参数的测定 | 第42-43页 |
| 2.2.9 OJIP曲线测定 | 第43-44页 |
| 2.2.10 P700参数测定 | 第44-45页 |
| 2.2.11 统计方法 | 第45页 |
| 2.3 结果与分析 | 第45-52页 |
| 2.3.1 RCA转基因株系间CO_2同化参数的差异分析 | 第45-48页 |
| 2.3.2 RCA不同转基因株系之间光系统Ⅰ和Ⅱ之间的能量分配 | 第48-51页 |
| 2.3.3 RCA不同转基因株系之间OJIP曲线的差异分析 | 第51页 |
| 2.3.4 RCA不同转基因株系之间P700光-暗-光诱导曲线的差异分析 | 第51-52页 |
| 2.4 讨论 | 第52-53页 |
| 2.4.1 RCA不同超表达转基因材料表现出不同的光合荧光特性 | 第52-53页 |
| 2.4.2 RCAL的可能影响机制 | 第53页 |
| 2.5 小结 | 第53-54页 |
| 第三章 RCA的生物信息学与逆境诱导表达研究 | 第54-75页 |
| 3.1 引言 | 第54页 |
| 3.2 材料和方法 | 第54-57页 |
| 3.2.1 水稻材料和培养方法 | 第54-55页 |
| 3.2.2 DNA和RNA的提取 | 第55页 |
| 3.2.3 RCA启动子分析 | 第55页 |
| 3.2.4 RCA基因及氨基酸序列分析 | 第55页 |
| 3.2.5 RCA蛋白质二级结构分析 | 第55页 |
| 3.2.6 RCA蛋白质三级结构分析 | 第55页 |
| 3.2.7 RCA蛋白结合位点的预测 | 第55页 |
| 3.2.8 RCA的定量及半定量分析 | 第55-56页 |
| 3.2.9 RCA蛋白提取及Western印迹 | 第56页 |
| 3.2.10 RCA蛋白的ELISA及双夹心ELISA分析 | 第56页 |
| 3.2.11 免疫共沉淀 | 第56-57页 |
| 3.2.12 统计方法 | 第57页 |
| 3.3 结果与分析 | 第57-71页 |
| 3.3.1 RCA_L和RCAs启动子的在线分析 | 第57-58页 |
| 3.3.2 RCA_L和RCAs基因和蛋白结构的差异分析 | 第58-61页 |
| 3.3.3 RCA_L和RCAs结合位点的确定 | 第61页 |
| 3.3.4 RCA_L和RCAs的系统进化树 | 第61-65页 |
| 3.3.5 RCA_L和RCAs的基因功能预测 | 第65-67页 |
| 3.3.6 非生物胁迫条件下RCA同工型的表达 | 第67-70页 |
| 3.3.7 非生物胁迫对Rubisco和RCA的相互作用的影响 | 第70-71页 |
| 3.4 讨论 | 第71-74页 |
| 3.4.1 RCA是一个逆境胁迫的响应子 | 第71-72页 |
| 3.4.2 RCA_L更易受逆境和植物激素诱导 | 第72-74页 |
| 3.5 小结 | 第74-75页 |
| 第四章 RCA_L的蛋白结合研究 | 第75-97页 |
| 4.1 引言 | 第75页 |
| 4.2 材料和方法 | 第75-83页 |
| 4.2.1 水稻材料和培养方法 | 第75-76页 |
| 4.2.2 DNA和RNA的提取 | 第76页 |
| 4.2.3 突变体的鉴定 | 第76-77页 |
| 4.2.4 分离可溶性蛋白中RCA结合蛋白的免疫共沉淀方法 | 第77-78页 |
| 4.2.5 串联质谱 | 第78-79页 |
| 4.2.6 抗体制备 | 第79-80页 |
| 4.2.7 基于水稻原生质体的双分子荧光互补(BiFC)分析 | 第80页 |
| 4.2.8 基于烟草瞬时表达的双分子荧光互补(BiFC) | 第80-81页 |
| 4.2.9 烟草生长条件和转化方法 | 第81页 |
| 4.2.10 超表达载体的构建以及转基因阳性苗的获得 | 第81-83页 |
| 4.2.10.1 35S：OsCPN60β1超表达载体的构建 | 第81-82页 |
| 4.2.10.2 转化野生型愈伤 | 第82页 |
| 4.2.10.3 转基因阳性植株的鉴定 | 第82-83页 |
| 4.2.11 叶绿素荧光成像 | 第83页 |
| 4.2.12 统计方法 | 第83页 |
| 4.3 结果与分析 | 第83-94页 |
| 4.3.1 RCA蛋白在高温下能够特异的与CPN60β1结合 | 第83-88页 |
| 4.3.2 CPN60超表达能够提高RCA蛋白与其的结合能力 | 第88-89页 |
| 4.3.3 CPN60β1的超表达能够有效提高水稻的抗高温能力 | 第89-91页 |
| 4.3.4 CPN60β1的超表达对Rubisco活力热敏感性的影响 | 第91页 |
| 4.3.5 RCA在基质和类囊体上的分布 | 第91-92页 |
| 4.3.6 RCA跨膜结构分析 | 第92页 |
| 4.3.7 RCA在类囊体上结合蛋白的分析 | 第92-93页 |
| 4.3.8 高温和RCA超表达对RCA结合的叶绿素a/b结合蛋白的影响 | 第93-94页 |
| 4.4 讨论 | 第94-96页 |
| 4.4.1 水稻中叶绿体CPN60β1能够特异地在高温下与RCA结合 | 第94页 |
| 4.4.2 CPN60β1有助于维持高温下水稻的光合速率 | 第94-95页 |
| 4.4.3 CPN60β1有助于提高Rubisco初始活力 | 第95页 |
| 4.4.4 RCAL在叶绿体类囊体膜上的结合比例远高于基质中 | 第95页 |
| 4.4.5 RCA在类囊体膜上可与叶绿素a/b结合蛋白结合 | 第95-96页 |
| 4.5 小结 | 第96-97页 |
| 第五章 全文讨论与展望 | 第97-100页 |
| 5.1 全文讨论 | 第97-99页 |
| 5.1.1 高温影响RCA的机理研究并不透彻 | 第97页 |
| 5.1.2 RCA的蛋白结合能力是RCA功能以及逆境响应的基础 | 第97-98页 |
| 5.1.3 通过调整RCA_L与其他蛋白的结合能力提高水稻热适应性 | 第98页 |
| 5.1.4 植物CPN60蛋白可能具有多种功能 | 第98-99页 |
| 5.2 创新点 | 第99页 |
| 5.3 展望 | 第99-100页 |
| 参考文献 | 第100-114页 |
| 攻博期间发表的论文 | 第114页 |
