摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
第1章 前言 | 第10-20页 |
1.1 拟黑多刺蚁概述 | 第10-12页 |
1.1.1 拟黑多刺蚁生物学特性研究 | 第10-11页 |
1.1.2 拟黑多刺蚁脑部构造 | 第11页 |
1.1.3 拟黑多刺蚁胸部 | 第11页 |
1.1.4 拟黑多刺蚁腹部 | 第11-12页 |
1.1.5 拟黑多刺蚁经济价值 | 第12页 |
1.2 核受体概述 | 第12-13页 |
1.3 昆虫蜕皮激素受体概述 | 第13-14页 |
1.4 昆虫酪氨酸羟化酶概述 | 第14-15页 |
1.5 昆虫多巴脱羧酶概述 | 第15-16页 |
1.6 RNA干扰 | 第16-17页 |
1.7 本研究的目的和意义 | 第17-18页 |
1.8 研究内容和技术路线 | 第18-20页 |
1.8.1 研究内容 | 第18页 |
1.8.2 技术路线 | 第18-20页 |
第2章 材料和方法 | 第20-42页 |
2.1 实验材料 | 第20-22页 |
2.1.1 实验动物 | 第20页 |
2.1.2 实验主要仪器设备 | 第20-22页 |
2.2 实验方法 | 第22-42页 |
2.2.1 总RNA提取 | 第22-24页 |
2.2.2 第一链cDNA合成 | 第24页 |
2.2.3 引物设计及检定 | 第24-27页 |
2.2.4 PCR扩增产物回收与测序 | 第27页 |
2.2.5 RNAi实验 | 第27-30页 |
2.2.6 荧光实时定量(qRT-PCR)检测基因表达 | 第30页 |
2.2.7 荧光原位杂交技术 | 第30-34页 |
2.2.8 Western blot检测蛋白表达 | 第34-38页 |
2.2.9 免疫组织化学技术 | 第38-42页 |
第3章 实验结果 | 第42-76页 |
3.1 拟黑多刺蚁总RNA提取 | 第42页 |
3.2 模板质量及引物特异性检测 | 第42-43页 |
3.3 T7启动子添加检测 | 第43-44页 |
3.4 dsRNA稳定性检测 | 第44页 |
3.5 干扰效率检测 | 第44-47页 |
3.6 PvEcR-RNAi后拟黑多刺蚁虫体表型及行为变化 | 第47-51页 |
3.6.1 虫体表型变化 | 第47-49页 |
3.6.2 畸形及死亡率统计 | 第49-50页 |
3.6.3 虫体头宽体长及体重的变化统计 | 第50-51页 |
3.7 PvEcR-RNAi后PvTH、 PvDDC mRNA水平表达检测 | 第51-61页 |
3.7.1 qRT-PCR检测PvEcR-RNAi后工蚁整体PvTH、PvDDC mRNA的表达 | 第52-53页 |
3.7.2 qRT-PCR检测PvEcR-RNAi后雌蚁整体PvTH、 PvDDC的表达 | 第53-54页 |
3.7.3 qRT-PCR检测PvEcR-RNAi后雄蚁整体PvTH、 PvDDC的表达 | 第54-56页 |
3.7.4 qRT-PCR检测PvEcR-RNAi后2-4龄幼虫和蛹PvTH、PvDDC的表达 | 第56-57页 |
3.7.5 qRT-PCR检测PvEcR-RNAi后工蚁头部PvTH、PvDDC的表达 | 第57-58页 |
3.7.6 qRT-PCR检测PvEcR-RNAi后工蚁胸部PvTH、 PvDDC的表达 | 第58-60页 |
3.7.7 qRT-PCR检测PvEcR-RNAi后工蚁腹部PvEcR、PvTH、 PvDDC的表达 | 第60-61页 |
3.8 PvEcR-RNAi后PvEcR、PvTH、PvDDC mRNA水平定位检测 | 第61-62页 |
3.8.1 原位杂交检测PvEcR-RNAi后PvEcR、PvTH、PvDDC在不同品级成虫脑部表达 | 第61页 |
3.8.2 原位杂交检测PvEcR-RNAi后PvEcR、PvTH、PvDDC在不同品级成虫腹部表达 | 第61-62页 |
3.9 PvEcR-RNAi后PvEcR、PvTH、PvDDC蛋白水平的表达 | 第62-74页 |
3.10 PvEcR-RNAi后PvEcR、PvTH、PvDDC蛋白水平定位检测 | 第74-76页 |
3.10.1 免疫组化检测PvEcR-RNAi后PvEcR、PvTH、PvDDC在不同品级成虫脑部表达 | 第74页 |
3.10.2 免疫组化检测PvEcR-RNAi后PvEcR、PvTH、PvDDC在不同品级成虫腹部表达 | 第74-76页 |
第4章 讨论 | 第76-80页 |
4.1 PvEcR与PvTH、PvDDC相关性研究 | 第76-80页 |
总结 | 第80-82页 |
参考文献 | 第82-92页 |
附录 | 第92-134页 |
附录一 实时荧光定量数据 | 第92-101页 |
附录二 图版 | 第101-132页 |
附录三 缩略词 | 第132-134页 |
致谢 | 第134-136页 |
攻读硕士学位期间研究成果 | 第136页 |