摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
第一章 综述 | 第9-16页 |
1 昆虫密度依赖的抗病性 | 第9-10页 |
2 昆虫密度依赖的免疫反应 | 第10-13页 |
2.1 体液免疫 | 第10-12页 |
2.2 细胞免疫 | 第12页 |
2.3 生物胺对昆虫密度依赖的免疫反应的调控作用 | 第12-13页 |
3 研究昆虫密度依赖抗病性的分子技术 | 第13-15页 |
3.1 转录组 | 第13-14页 |
3.2 RNA干扰 | 第14-15页 |
4 研究目的和意义 | 第15-16页 |
第二章 粘虫不同密度幼虫血淋巴抗菌活力的研究 | 第16-23页 |
1 材料和方法 | 第16-17页 |
1.1 虫源与幼虫密度设置 | 第16页 |
1.2 粘虫血淋巴提取 | 第16-17页 |
1.2.1 待试昆虫的准备 | 第16-17页 |
1.2.2 昆虫血淋巴的收集 | 第17页 |
1.2.3 血淋巴的预处理 | 第17页 |
2 粘虫血淋巴提取物抗菌活力的测定 | 第17-18页 |
2.1 准备菌液 | 第17页 |
2.2 抗菌活性的测定 | 第17-18页 |
2.3 数据分析 | 第18页 |
3 结果与分析 | 第18-20页 |
3.1 不同密度粘虫幼虫血淋巴对3种革兰氏阳性菌的抑菌活性 | 第18-19页 |
3.2 不同密度粘虫幼虫血淋巴对3种革兰氏阴性菌的抑菌活性 | 第19-20页 |
4 讨论 | 第20-23页 |
第三章 粘虫幼虫密度依赖的抗病免疫基因的转录组分析 | 第23-38页 |
1 材料和方法 | 第23-25页 |
1.1 供试材料 | 第23页 |
1.2 幼虫的收集 | 第23-24页 |
1.3 转录组学分析 | 第24-25页 |
1.3.1 测序方法 | 第24-25页 |
1.3.2 分析流程 | 第25页 |
2 结果与分析 | 第25-35页 |
2.1 测序结果质量评估 | 第25-26页 |
2.2 转录本拼接 | 第26-27页 |
2.3 基因功能注释 | 第27-30页 |
2.3.0 Nr注释结果分析 | 第27页 |
2.3.1 KOG分类 | 第27-28页 |
2.3.2 GO分类 | 第28-30页 |
2.4 粘虫幼虫密度依赖的免疫基因的筛选 | 第30-34页 |
2.5 差异表达基因的RT-PCR验证 | 第34-35页 |
3 讨论 | 第35-38页 |
第四章 干扰酪胺β羟化酶基因对粘虫幼虫免疫能力的影响 | 第38-51页 |
1 材料和方法 | 第38-44页 |
1.1 供试材料 | 第38-39页 |
1.2 主要仪器和试剂 | 第39页 |
1.2.1 仪器 | 第39页 |
1.2.2. 试剂盒 | 第39页 |
1.3 含T7启动子的模板DNA制备 | 第39页 |
1.4 总RNA提取及cDNA第一链合成 | 第39-41页 |
1.4.1 总RNA提取 | 第39-40页 |
1.4.2 cDNA第一链合成 | 第40-41页 |
1.5 T7引物pcr扩增 | 第41页 |
1.6 PCR产物纯化 | 第41-42页 |
1.7 dsRNA的制备 | 第42-43页 |
1.7.1 体外转录反应 | 第42-43页 |
1.7.2 dsRNA的纯化 | 第43页 |
1.8 注射dsTβH | 第43-44页 |
2 酪胺β羟化酶基因RNAi效应检测分析 | 第44-46页 |
2.1 酪胺β羟化酶基因相对表达量测定 | 第44页 |
2.2 血淋巴指标的测定和幼虫接菌存活率统计 | 第44-45页 |
2.2.1 不同密度粘虫幼虫免疫指标的测定 | 第44-45页 |
2.2.2 血淋巴酚氧化酶活力的测定 | 第45页 |
2.2.3 血细胞总数的计数 | 第45页 |
2.3 数据分析 | 第45-46页 |
3 结果和分析 | 第46-48页 |
3.1 干扰酪胺β羟化酶(TβH)基因后的实时荧光定量分析 | 第46页 |
3.2 干扰酪胺β羟化酶(TβH)基因后对粘虫幼虫免疫指标的影响 | 第46-48页 |
3.3 干扰酪胺β羟化酶(TβH)基因后对粘虫幼虫抵抗苏云金芽孢杆菌侵染能力的影响 | 第48页 |
4 讨论 | 第48-51页 |
参考文献 | 第51-57页 |
致谢 | 第57-58页 |
攻读硕士学位期间发表的论文 | 第58-59页 |