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粘虫幼虫密度依赖的抗病免疫转录组分析及酪胺β羟化酶基因干扰研究

摘要第3-5页
Abstract第5-6页
第一章 综述第9-16页
    1 昆虫密度依赖的抗病性第9-10页
    2 昆虫密度依赖的免疫反应第10-13页
        2.1 体液免疫第10-12页
        2.2 细胞免疫第12页
        2.3 生物胺对昆虫密度依赖的免疫反应的调控作用第12-13页
    3 研究昆虫密度依赖抗病性的分子技术第13-15页
        3.1 转录组第13-14页
        3.2 RNA干扰第14-15页
    4 研究目的和意义第15-16页
第二章 粘虫不同密度幼虫血淋巴抗菌活力的研究第16-23页
    1 材料和方法第16-17页
        1.1 虫源与幼虫密度设置第16页
        1.2 粘虫血淋巴提取第16-17页
            1.2.1 待试昆虫的准备第16-17页
            1.2.2 昆虫血淋巴的收集第17页
            1.2.3 血淋巴的预处理第17页
    2 粘虫血淋巴提取物抗菌活力的测定第17-18页
        2.1 准备菌液第17页
        2.2 抗菌活性的测定第17-18页
        2.3 数据分析第18页
    3 结果与分析第18-20页
        3.1 不同密度粘虫幼虫血淋巴对3种革兰氏阳性菌的抑菌活性第18-19页
        3.2 不同密度粘虫幼虫血淋巴对3种革兰氏阴性菌的抑菌活性第19-20页
    4 讨论第20-23页
第三章 粘虫幼虫密度依赖的抗病免疫基因的转录组分析第23-38页
    1 材料和方法第23-25页
        1.1 供试材料第23页
        1.2 幼虫的收集第23-24页
        1.3 转录组学分析第24-25页
            1.3.1 测序方法第24-25页
            1.3.2 分析流程第25页
    2 结果与分析第25-35页
        2.1 测序结果质量评估第25-26页
        2.2 转录本拼接第26-27页
        2.3 基因功能注释第27-30页
            2.3.0 Nr注释结果分析第27页
            2.3.1 KOG分类第27-28页
            2.3.2 GO分类第28-30页
        2.4 粘虫幼虫密度依赖的免疫基因的筛选第30-34页
        2.5 差异表达基因的RT-PCR验证第34-35页
    3 讨论第35-38页
第四章 干扰酪胺β羟化酶基因对粘虫幼虫免疫能力的影响第38-51页
    1 材料和方法第38-44页
        1.1 供试材料第38-39页
        1.2 主要仪器和试剂第39页
            1.2.1 仪器第39页
            1.2.2. 试剂盒第39页
        1.3 含T7启动子的模板DNA制备第39页
        1.4 总RNA提取及cDNA第一链合成第39-41页
            1.4.1 总RNA提取第39-40页
            1.4.2 cDNA第一链合成第40-41页
        1.5 T7引物pcr扩增第41页
        1.6 PCR产物纯化第41-42页
        1.7 dsRNA的制备第42-43页
            1.7.1 体外转录反应第42-43页
            1.7.2 dsRNA的纯化第43页
        1.8 注射dsTβH第43-44页
    2 酪胺β羟化酶基因RNAi效应检测分析第44-46页
        2.1 酪胺β羟化酶基因相对表达量测定第44页
        2.2 血淋巴指标的测定和幼虫接菌存活率统计第44-45页
            2.2.1 不同密度粘虫幼虫免疫指标的测定第44-45页
            2.2.2 血淋巴酚氧化酶活力的测定第45页
            2.2.3 血细胞总数的计数第45页
        2.3 数据分析第45-46页
    3 结果和分析第46-48页
        3.1 干扰酪胺β羟化酶(TβH)基因后的实时荧光定量分析第46页
        3.2 干扰酪胺β羟化酶(TβH)基因后对粘虫幼虫免疫指标的影响第46-48页
        3.3 干扰酪胺β羟化酶(TβH)基因后对粘虫幼虫抵抗苏云金芽孢杆菌侵染能力的影响第48页
    4 讨论第48-51页
参考文献第51-57页
致谢第57-58页
攻读硕士学位期间发表的论文第58-59页

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