| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 引言 | 第10-11页 |
| 1 文献综述 | 第11-27页 |
| 1.1 真核生物的复制 | 第11-18页 |
| 1.1.1 真核生物 DNA 复制的过程 | 第11页 |
| 1.1.2 真核生物复制子 | 第11-13页 |
| 1.1.3 真核生物的复制起始蛋白 | 第13-15页 |
| 1.1.4 真核生物的复制起始调控 | 第15-18页 |
| 1.2 鉴定复制起始位点的方法 | 第18-25页 |
| 1.2.1 质粒测定法分析法 | 第18页 |
| 1.2.2 PCR 法 | 第18-19页 |
| 1.2.3 双向凝胶电泳法 | 第19-20页 |
| 1.2.4 复制起始点作图法 | 第20-21页 |
| 1.2.5 BrdU 标记新合成的 DNA 法 | 第21-22页 |
| 1.2.6 单分子 DNA 技术（DNA combing） | 第22页 |
| 1.2.7 基因芯片法 | 第22-23页 |
| 1.2.8 实时荧光定量 PCR(Real-time PCR)技术 | 第23页 |
| 1.2.9 ChIP 技术 | 第23-24页 |
| 1.2.10 ChIP on chip 或 ChIP-seq 技术 | 第24-25页 |
| 1.3 酿酒酵母细胞的同步化 | 第25-26页 |
| 1.4 本论文的研究内容与意义 | 第26-27页 |
| 2 α因子调控酿酒酵母细胞同步化 | 第27-34页 |
| 2.1 实验材料 | 第27页 |
| 2.2 实验方法 | 第27-28页 |
| 2.2.1 酵母细胞 YKN-10 的活化及生长曲线的测定 | 第27-28页 |
| 2.2.2 酿酒酵母细胞的同步化 | 第28页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第28-33页 |
| 2.3.1 YKN-10 酵母细胞生长曲线的测定 | 第28-29页 |
| 2.3.2 酵母细胞停滞于 G1期时的形态 | 第29-30页 |
| 2.3.3 α因子浓度和作用时间对酵母细胞平均出芽率的影响 | 第30-32页 |
| 2.3.4 双因素分析 | 第32-33页 |
| 2.4 小结 | 第33-34页 |
| 3 酿酒酵母 YPH499Ⅲ号染色体 ARS301 和 ARS305 复制起始活性的验证 | 第34-47页 |
| 3.1 实验材料 | 第34-35页 |
| 3.2 实验方法 | 第35-40页 |
| 3.2.1 酵母转化菌 YPH499(P405)的获得 | 第35-36页 |
| 3.2.2 酵母细胞的同步化 | 第36-37页 |
| 3.2.3 BrdU 标记新合成的 DNA | 第37页 |
| 3.2.4 提取酵母菌 YPH499（p405）基因组 | 第37页 |
| 3.2.5 BrdU 标记 DNA 的检测 | 第37页 |
| 3.2.6 抗体免疫沉淀 BrdU 标记的 DNA | 第37-38页 |
| 3.2.7 蛋白抽提及 DNA 纯化 | 第38页 |
| 3.2.8 引物设计 | 第38-39页 |
| 3.2.9 PCR 扩增 | 第39-40页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第40-45页 |
| 3.3.1 质粒 p405 转化酵母菌 YPH49931 | 第41页 |
| 3.3.2 酵母 YPH499（p405）基因组的提取 | 第41-42页 |
| 3.3.3 含有 BrdU 标记新合成 DNA 的荧光检测 | 第42页 |
| 3.3.4 利用 PCR 技术验证 ARS301 和 ARS305 的复制起始活性 | 第42-44页 |
| 3.3.5 初步确定 ARS305 的复制起始位点范围 | 第44-45页 |
| 3.4 小结 | 第45-47页 |
| 4 酿酒酵母 YPH499 Ⅲ号染色体上 ARS 形成核小体能力的比较 | 第47-60页 |
| 4.1 实验材料 | 第47-48页 |
| 4.2 实验方法 | 第48-53页 |
| 4.2.1 ARS 序列的获得 | 第48-50页 |
| 4.2.2 ARS302 序列体外组装体系的摸索 | 第50-51页 |
| 4.2.3 ARS302 核小体组装检测 | 第51-52页 |
| 4.2.4 10 条 ARS 序列的体外组装 | 第52-53页 |
| 4.2.5 检测 10 条 ARS 序列的核小体组装 | 第53页 |
| 4.2.6 利用 Image J 软件分析每条 ARS 序列组装能力的强弱 | 第53页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第53-59页 |
| 4.3.1 ARS 序列信息的整理与分析 | 第53-54页 |
| 4.3.2 ARS 序列的 PCR 扩增 | 第54-55页 |
| 4.3.3 胶回收纯化 ARS 序列 | 第55页 |
| 4.3.4 ARS 序列的质量、浓度检测 | 第55-57页 |
| 4.3.5 ARS302 的核小体体外组装结果 | 第57-58页 |
| 4.3.6 10 条 ARS 序列的体外组装检测 | 第58页 |
| 4.3.7 10 条 ARS 序列组装形成核小体能力的比较 | 第58-59页 |
| 4.4 小结 | 第59-60页 |
| 结论 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-73页 |
| 在学研究成果 | 第73-74页 |
| 致谢 | 第74页 |
