摘要 | 第6-7页 |
ABSTRACT | 第7-8页 |
综述 | 第12-24页 |
第一章 山羊乳腺炎的研究概况 | 第12-18页 |
1.1 乳腺炎的分类 | 第12页 |
1.2 乳腺炎的症状及诊断 | 第12-13页 |
1.3 乳腺炎的危害 | 第13页 |
1.4 山羊乳腺炎的主要病因 | 第13-14页 |
1.4.1 致病性微生物的感染 | 第13-14页 |
1.4.2 环境污染 | 第14页 |
1.5 山羊乳腺炎的预防与治疗 | 第14-17页 |
1.5.1 提高挤奶过程环境卫生 | 第14-15页 |
1.5.2 提高挤奶技术 | 第15页 |
1.5.3 提高乳腺的自然抗病能力 | 第15页 |
1.5.4 乳腺炎疫苗的使用 | 第15-16页 |
1.5.5 中西药的使用 | 第16页 |
1.5.6 抗乳腺炎新品种的遗传育种 | 第16-17页 |
1.6 小结 | 第17-18页 |
第二章 抗乳腺炎基因的研究进展 | 第18-24页 |
2.1 乳腺炎的致病机理 | 第18页 |
2.2 抗乳腺炎的基因 | 第18-20页 |
2.2.1 乳铁蛋白 | 第18-19页 |
2.2.2 白细胞介素 | 第19页 |
2.2.3 肿瘤坏死因子 | 第19页 |
2.2.4 Toll 样受体 | 第19-20页 |
2.2.5 防御素 | 第20页 |
2.3 β-防御素基因的研究进展 | 第20-23页 |
2.4 抗乳腺炎基因的研究进展 | 第23页 |
2.5 小结 | 第23-24页 |
实验 | 第24-49页 |
第三章 山羊乳腺上皮细胞细菌诱导型基因的筛选 | 第24-33页 |
3.1 材料 | 第24-25页 |
3.1.1 组织 | 第24页 |
3.1.2 菌株和质粒 | 第24页 |
3.1.3 主要试剂 | 第24-25页 |
3.1.4 主要仪器设备 | 第25页 |
3.2 方法 | 第25-28页 |
3.2.1 萨能奶山羊乳腺上皮细胞的培养 | 第25-26页 |
3.2.2 乳腺上皮细胞攻菌前后 8 组因子的 mRNA 差异表达检测 | 第26-28页 |
3.3 结果 | 第28-31页 |
3.3.1 乳腺上皮细胞攻菌前后 8 组基因的 mRNA 定量表达检测结果 | 第28-30页 |
3.3.2 乳腺上皮细胞攻菌前后 3 组基因的 western blot 结果 | 第30-31页 |
3.4 讨论 | 第31-32页 |
3.5 小结 | 第32-33页 |
第四章 IL-1α、IL-1β和 TLR2 基因的启动子分析 | 第33-43页 |
4.1 材料 | 第33-34页 |
4.1.1 血液和细胞 | 第33页 |
4.1.2 菌株和质粒 | 第33页 |
4.1.3 主要试剂 | 第33-34页 |
4.1.4 主要仪器设备 | 第34页 |
4.2 方法 | 第34-36页 |
4.2.1 山羊基因组 DNA 提取 | 第34页 |
4.2.2 三个基因启动子区的扩增及启动子-EGFP-慢病毒载体构建 | 第34-36页 |
4.2.3 293T 细胞的准备与转染 | 第36页 |
4.2.4 慢病毒载体在乳腺上皮细胞中的转染及效率鉴定 | 第36页 |
4.3 结果 | 第36-41页 |
4.3.1 启动子-EGFP-慢病毒载体构建 | 第36-37页 |
4.3.2 293T 细胞中 EGFP 蛋白的诱导表达 | 第37-39页 |
4.3.3 乳腺上皮细胞中 EGFP 蛋白的诱导表达 | 第39-41页 |
4.4 讨论 | 第41-42页 |
4.5 小结 | 第42-43页 |
第五章 萨能奶山羊β-防御素-3 基因的克隆和序列分析 | 第43-49页 |
5.1 材料 | 第43页 |
5.1.1 菌株和质粒 | 第43页 |
5.1.2 主要试剂 | 第43页 |
5.1.3 主要仪器设备 | 第43页 |
5.2 方法 | 第43-44页 |
5.2.1 引物的设计与合成 | 第43-44页 |
5.2.2 细胞总 RNA 的提取和 cDNA 的反转录合成 | 第44页 |
5.2.3 目的基因的克隆与测序 | 第44页 |
5.3 结果 | 第44-47页 |
5.3.1 萨能奶山羊 BD-3 基因 RT-PCR 扩增结果 | 第44-45页 |
5.3.2 萨能奶山羊 BD-3 基因序列的测定与分析 | 第45-46页 |
5.3.3 蛋白结构和功能预测 | 第46-47页 |
5.4 讨论 | 第47-48页 |
5.5 小结 | 第48-49页 |
全文结论 | 第49-50页 |
创新之处和进一步的研究课题 | 第50-51页 |
创新之处 | 第50页 |
进一步的研究课题 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-59页 |
致谢 | 第59-60页 |
个人简介 | 第60页 |