摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
1 前言 | 第12-18页 |
1.1 研究背景 | 第12-13页 |
1.2 松萝植物简介 | 第13-14页 |
1.2.1 松萝酸的抗菌作用 | 第13页 |
1.2.2 松萝酸的抗氧化作用 | 第13-14页 |
1.2.3 松萝酸的抗辐射作用 | 第14页 |
1.2.4 松萝酸的其他作用 | 第14页 |
1.3 神经干细胞的概述 | 第14-15页 |
1.4 视网膜干细胞概述 | 第15页 |
1.5 p53 基因 | 第15-16页 |
1.6 bcl 2 基因家族 | 第16页 |
1.7 Fas 基因家族 | 第16页 |
1.8 本研究的目的、意义和选题依据 | 第16-18页 |
2 材料与方法 | 第18-30页 |
2.1 试验材料与仪器 | 第18-19页 |
2.1.1 试验材料 | 第18页 |
2.1.2 主要仪器设备 | 第18页 |
2.1.3 主要试剂 | 第18-19页 |
2.1.4 主要试剂的配制 | 第19页 |
(一)细胞培养试剂配制 | 第19-21页 |
(二)生长曲线试剂配制 | 第20页 |
(三)免疫组化检测试剂配制 | 第20-21页 |
(四)细胞系核型分析试剂配制 | 第21页 |
2.2 方法 | 第21-30页 |
2.2.1 视网膜干细胞的分离培养 | 第21页 |
2.2.2 视网膜干细胞的传代与冻存 | 第21-22页 |
2.2.3 视网膜干细胞生长曲线绘制 | 第22页 |
2.2.4. 核型分析 | 第22页 |
2.2.5 视网膜干细胞的鉴定 | 第22-25页 |
(一)免疫荧光检测表面标记 | 第22-23页 |
(二) RT PCR 检测表面标记 | 第23-25页 |
1.细胞 total RNA 提取 | 第23页 |
2.甲醛变性电泳判断 RNA 完整性 | 第23-24页 |
3.cDNA 的合成 | 第24页 |
4.PCR 反应 | 第24-25页 |
2.2.6 视网膜干细胞的诱导分化及鉴定 | 第25-27页 |
(一)视网膜干细胞向星形胶质细胞诱导分化 | 第25-26页 |
(二)视网膜干细胞向神经元诱导分化 | 第26页 |
(三)视网膜干细胞向少突胶质细胞诱导分化 | 第26-27页 |
2.2.7 药物处理 | 第27页 |
2.2.8 药物处理后形态学观察 | 第27页 |
2.2.9 透射电镜观察细胞形态结构的变化 | 第27-28页 |
2.2.10 RT PCR 检测细胞凋亡相关基因的变化 | 第28-30页 |
3 结果 | 第30-42页 |
3.1 视网膜干细胞形态学观察及冻存复苏结果 | 第30-31页 |
3.2 视网膜干细胞生长曲线的绘制 | 第31-32页 |
3.3 视网膜干细胞核型分析 | 第32-33页 |
3.4 视网膜干细胞的鉴定 | 第33-36页 |
3.4.1 免疫荧光检测表面标记 | 第33-35页 |
3.4.2 RT PCR 检测表面标记 | 第35-36页 |
3.5 视网膜干细胞的诱导分化及鉴定 | 第36-38页 |
3.6 药物处理后形态学观察 | 第38-39页 |
3.7 透射电镜观察细胞形态结构的变化 | 第39-40页 |
3.8 RT PCR 检测细胞凋亡相关基因的变化 | 第40-42页 |
4 讨论 | 第42-45页 |
4.1 视网膜干细胞的分离与培养及生长曲线测定 | 第42页 |
4.2 视网膜干细胞的核型检测 | 第42-43页 |
4.3 视网膜干细胞的鉴定 | 第43页 |
4.4 视网膜干细胞的定向诱导分化及鉴定 | 第43页 |
4.5 松萝酸处理后形态学观察 | 第43-44页 |
4.6 透射电镜观察细胞形态结构的变化 | 第44页 |
4.7 RT PCR 检测凋亡基因的表达 | 第44-45页 |
结论 | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-51页 |
攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第51-52页 |
致谢 | 第52-53页 |