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胎牛视网膜干细胞分离培养、生物学鉴定及松萝酸对其生长影响的研究

摘要第6-8页
Abstract第8-9页
1 前言第12-18页
    1.1 研究背景第12-13页
    1.2 松萝植物简介第13-14页
        1.2.1 松萝酸的抗菌作用第13页
        1.2.2 松萝酸的抗氧化作用第13-14页
        1.2.3 松萝酸的抗辐射作用第14页
        1.2.4 松萝酸的其他作用第14页
    1.3 神经干细胞的概述第14-15页
    1.4 视网膜干细胞概述第15页
    1.5 p53 基因第15-16页
    1.6 bcl 2 基因家族第16页
    1.7 Fas 基因家族第16页
    1.8 本研究的目的、意义和选题依据第16-18页
2 材料与方法第18-30页
    2.1 试验材料与仪器第18-19页
        2.1.1 试验材料第18页
        2.1.2 主要仪器设备第18页
        2.1.3 主要试剂第18-19页
        2.1.4 主要试剂的配制第19页
    (一)细胞培养试剂配制第19-21页
        (二)生长曲线试剂配制第20页
        (三)免疫组化检测试剂配制第20-21页
        (四)细胞系核型分析试剂配制第21页
    2.2 方法第21-30页
        2.2.1 视网膜干细胞的分离培养第21页
        2.2.2 视网膜干细胞的传代与冻存第21-22页
        2.2.3 视网膜干细胞生长曲线绘制第22页
        2.2.4. 核型分析第22页
        2.2.5 视网膜干细胞的鉴定第22-25页
            (一)免疫荧光检测表面标记第22-23页
            (二) RT PCR 检测表面标记第23-25页
                1.细胞 total RNA 提取第23页
                2.甲醛变性电泳判断 RNA 完整性第23-24页
                3.cDNA 的合成第24页
                4.PCR 反应第24-25页
        2.2.6 视网膜干细胞的诱导分化及鉴定第25-27页
            (一)视网膜干细胞向星形胶质细胞诱导分化第25-26页
            (二)视网膜干细胞向神经元诱导分化第26页
            (三)视网膜干细胞向少突胶质细胞诱导分化第26-27页
        2.2.7 药物处理第27页
        2.2.8 药物处理后形态学观察第27页
        2.2.9 透射电镜观察细胞形态结构的变化第27-28页
        2.2.10 RT PCR 检测细胞凋亡相关基因的变化第28-30页
3 结果第30-42页
    3.1 视网膜干细胞形态学观察及冻存复苏结果第30-31页
    3.2 视网膜干细胞生长曲线的绘制第31-32页
    3.3 视网膜干细胞核型分析第32-33页
    3.4 视网膜干细胞的鉴定第33-36页
        3.4.1 免疫荧光检测表面标记第33-35页
        3.4.2 RT PCR 检测表面标记第35-36页
    3.5 视网膜干细胞的诱导分化及鉴定第36-38页
    3.6 药物处理后形态学观察第38-39页
    3.7 透射电镜观察细胞形态结构的变化第39-40页
    3.8 RT PCR 检测细胞凋亡相关基因的变化第40-42页
4 讨论第42-45页
    4.1 视网膜干细胞的分离与培养及生长曲线测定第42页
    4.2 视网膜干细胞的核型检测第42-43页
    4.3 视网膜干细胞的鉴定第43页
    4.4 视网膜干细胞的定向诱导分化及鉴定第43页
    4.5 松萝酸处理后形态学观察第43-44页
    4.6 透射电镜观察细胞形态结构的变化第44页
    4.7 RT PCR 检测凋亡基因的表达第44-45页
结论第45-46页
参考文献第46-51页
攻读硕士学位期间发表学术论文情况第51-52页
致谢第52-53页

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