摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
1 引言 | 第9-15页 |
1.1 HBP1 基因的结构及特征 | 第9-10页 |
1.2 HBP1 对细胞周期 G1 期调控作用 | 第10页 |
1.3 HBP1 对 c-Myc 调控作用 | 第10-11页 |
1.4 HBP1 与 p38 MAPK 信号转导通路 | 第11-13页 |
1.5 HBP1 与 Wnt-β连环蛋白信号通路 | 第13-14页 |
1.6 总结与展望 | 第14-15页 |
2 七鳃鳗 HBP1 基因的分子克隆及在各组织中的相对表达 | 第15-31页 |
2.1 七鳃鳗 HBP1 基因的分子克隆 | 第15-24页 |
2.1.1 实验动物及材料 | 第15-16页 |
2.1.2 实验方法 | 第16-24页 |
2.2 HBP1 在七鳃鳗各组织中的相对表达量 | 第24-26页 |
2.2.1 实验材料 | 第24页 |
2.2.2 实验方法 | 第24-26页 |
2.3 结果 | 第26-29页 |
2.3.1 总 RNA 的提取 | 第26-27页 |
2.3.2 七鳃鳗 HBP1 基因的扩增 | 第27-29页 |
2.3.3 HBP1 在七鳃鳗各组织中的相对表达量 | 第29页 |
2.4 讨论 | 第29-30页 |
2.5 小结 | 第30-31页 |
3 七鳃鳗 HBP1 生物信息学分析 | 第31-39页 |
3.1 生物信息学分析所用的在线网站及软件 | 第31页 |
3.2 结果 | 第31-37页 |
3.2.1 一级结构分析 | 第31-34页 |
3.2.2 功能结构域预测 | 第34页 |
3.2.3 二级结构域预测 | 第34-35页 |
3.2.4 三级结构域模拟 | 第35-36页 |
3.2.5 同源序列比对 | 第36页 |
3.2.6 系统发育学分析 | 第36-37页 |
3.3 讨论 | 第37-38页 |
3.4 小结 | 第38-39页 |
4 七鳃鳗 HBP1 原核载体的构建及表达 | 第39-47页 |
4.1 材料 | 第39页 |
4.2 方法 | 第39-43页 |
4.2.1 引物设计 | 第39-40页 |
4.2.2 PCR 扩增 | 第40页 |
4.2.3 目的片段的回收 | 第40页 |
4.2.4 目的片段与载体相连与转化 | 第40-41页 |
4.2.5 重组表达菌的鉴定 | 第41-42页 |
4.2.6 蛋白的诱导表达 | 第42页 |
4.2.7 SDS-PAGE 鉴定 | 第42-43页 |
4.2.8 重组蛋白可溶性鉴定 | 第43页 |
4.3 结果 | 第43-45页 |
4.4 讨论 | 第45-46页 |
4.5 小结 | 第46-47页 |
5 腺病毒载体 Adeno-X-HBP1 的制备及感染效率的测定 | 第47-59页 |
5.1 材料 | 第47页 |
5.2 方法 | 第47-54页 |
5.2.1 细胞的培养 | 第47-48页 |
5.2.2 穿梭质粒载体 pShuttle 2-HBP1 的构建及鉴定 | 第48-50页 |
5.2.3 重组腺病毒载体构建 | 第50-51页 |
5.2.4 制备单克隆重组腺病毒体 | 第51-54页 |
5.3 结果 | 第54-58页 |
5.3.1 重组腺病毒载体构建 | 第55-56页 |
5.3.2 单克隆重组腺病毒体的制备及其检测 | 第56-58页 |
5.4 讨论 | 第58页 |
5.5 小结 | 第58-59页 |
6 七鳃鳗 HBP1 的表达对 Raji 细胞增殖的抑制及其机制研究 | 第59-67页 |
6.1 七鳃鳗 HBP1 的表达对 Raji 细胞增殖抑制的研究 | 第59-60页 |
6.1.1 材料 | 第59页 |
6.1.2 方法 | 第59-60页 |
6.2 七鳃鳗 HBP1 抑制 Raji 细胞增殖机制的研究 | 第60-61页 |
6.2.1 材料 | 第60页 |
6.2.2 方法 | 第60-61页 |
6.3 结果 | 第61-65页 |
6.3.1 重组腺病毒感染人淋巴瘤 Raji 细胞及目的基因鉴定 | 第61-62页 |
6.3.2 七鳃鳗 HBP1 的表达对 Raji 细胞增殖的抑制 | 第62-65页 |
6.3.3 七鳃鳗 HBP1 抑制 Raji 细胞增殖机制的研究 | 第65页 |
6.4 讨论 | 第65-66页 |
6.5 小结 | 第66-67页 |
结论 | 第67-68页 |
本论文的创新点 | 第68-69页 |
参考文献 | 第69-71页 |
附录A 不同物种的七鳃鳗 HBP1 的 FASTA 格式氨基酸序列 | 第71-74页 |
附录B 腺病毒载体 Adeno-X-HBP1 构建流程图 | 第74-75页 |
研究生期间发表文章及研究成果 | 第75-76页 |
致谢 | 第76页 |