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七鳃鳗HBP1基因的克隆、表达及生物学活性研究

摘要第3-4页
Abstract第4-5页
1 引言第9-15页
    1.1 HBP1 基因的结构及特征第9-10页
    1.2 HBP1 对细胞周期 G1 期调控作用第10页
    1.3 HBP1 对 c-Myc 调控作用第10-11页
    1.4 HBP1 与 p38 MAPK 信号转导通路第11-13页
    1.5 HBP1 与 Wnt-β连环蛋白信号通路第13-14页
    1.6 总结与展望第14-15页
2 七鳃鳗 HBP1 基因的分子克隆及在各组织中的相对表达第15-31页
    2.1 七鳃鳗 HBP1 基因的分子克隆第15-24页
        2.1.1 实验动物及材料第15-16页
        2.1.2 实验方法第16-24页
    2.2 HBP1 在七鳃鳗各组织中的相对表达量第24-26页
        2.2.1 实验材料第24页
        2.2.2 实验方法第24-26页
    2.3 结果第26-29页
        2.3.1 总 RNA 的提取第26-27页
        2.3.2 七鳃鳗 HBP1 基因的扩增第27-29页
        2.3.3 HBP1 在七鳃鳗各组织中的相对表达量第29页
    2.4 讨论第29-30页
    2.5 小结第30-31页
3 七鳃鳗 HBP1 生物信息学分析第31-39页
    3.1 生物信息学分析所用的在线网站及软件第31页
    3.2 结果第31-37页
        3.2.1 一级结构分析第31-34页
        3.2.2 功能结构域预测第34页
        3.2.3 二级结构域预测第34-35页
        3.2.4 三级结构域模拟第35-36页
        3.2.5 同源序列比对第36页
        3.2.6 系统发育学分析第36-37页
    3.3 讨论第37-38页
    3.4 小结第38-39页
4 七鳃鳗 HBP1 原核载体的构建及表达第39-47页
    4.1 材料第39页
    4.2 方法第39-43页
        4.2.1 引物设计第39-40页
        4.2.2 PCR 扩增第40页
        4.2.3 目的片段的回收第40页
        4.2.4 目的片段与载体相连与转化第40-41页
        4.2.5 重组表达菌的鉴定第41-42页
        4.2.6 蛋白的诱导表达第42页
        4.2.7 SDS-PAGE 鉴定第42-43页
        4.2.8 重组蛋白可溶性鉴定第43页
    4.3 结果第43-45页
    4.4 讨论第45-46页
    4.5 小结第46-47页
5 腺病毒载体 Adeno-X-HBP1 的制备及感染效率的测定第47-59页
    5.1 材料第47页
    5.2 方法第47-54页
        5.2.1 细胞的培养第47-48页
        5.2.2 穿梭质粒载体 pShuttle 2-HBP1 的构建及鉴定第48-50页
        5.2.3 重组腺病毒载体构建第50-51页
        5.2.4 制备单克隆重组腺病毒体第51-54页
    5.3 结果第54-58页
        5.3.1 重组腺病毒载体构建第55-56页
        5.3.2 单克隆重组腺病毒体的制备及其检测第56-58页
    5.4 讨论第58页
    5.5 小结第58-59页
6 七鳃鳗 HBP1 的表达对 Raji 细胞增殖的抑制及其机制研究第59-67页
    6.1 七鳃鳗 HBP1 的表达对 Raji 细胞增殖抑制的研究第59-60页
        6.1.1 材料第59页
        6.1.2 方法第59-60页
    6.2 七鳃鳗 HBP1 抑制 Raji 细胞增殖机制的研究第60-61页
        6.2.1 材料第60页
        6.2.2 方法第60-61页
    6.3 结果第61-65页
        6.3.1 重组腺病毒感染人淋巴瘤 Raji 细胞及目的基因鉴定第61-62页
        6.3.2 七鳃鳗 HBP1 的表达对 Raji 细胞增殖的抑制第62-65页
        6.3.3 七鳃鳗 HBP1 抑制 Raji 细胞增殖机制的研究第65页
    6.4 讨论第65-66页
    6.5 小结第66-67页
结论第67-68页
本论文的创新点第68-69页
参考文献第69-71页
附录A 不同物种的七鳃鳗 HBP1 的 FASTA 格式氨基酸序列第71-74页
附录B 腺病毒载体 Adeno-X-HBP1 构建流程图第74-75页
研究生期间发表文章及研究成果第75-76页
致谢第76页

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