摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4页 |
1. 绪论 | 第8-14页 |
1.1 KAI1/CD82 的分子结构特点 | 第8-9页 |
1.2 KAI1/CD82 基因表达的调节 | 第9-10页 |
1.3 KAI1/CD82 的翻译后修饰 | 第10页 |
1.3.1 十六(烷)酰化 | 第10页 |
1.3.2 糖基化 | 第10页 |
1.4 参与免疫应答 | 第10-11页 |
1.4.1 与 T 细胞的免疫应答 | 第10-11页 |
1.4.2 与 B 细胞的免疫应答 | 第11页 |
1.5 参与调节细胞黏附 | 第11页 |
1.6 调节细胞的迁移 | 第11-12页 |
1.7 诱导细胞的凋亡 | 第12页 |
1.8 CD82 与肿瘤的关系 | 第12-13页 |
1.9 展望 | 第13-14页 |
2 七鳃鳗 CD82 的分子克隆 | 第14-24页 |
2.1 材料 | 第14-15页 |
2.1.1 实验材料 | 第14页 |
2.1.2 仪器设备 | 第14页 |
2.1.3 药品及试剂 | 第14-15页 |
2.2 方法 | 第15-21页 |
2.2.1 引物设计 | 第15页 |
2.2.2 白细胞分离 | 第15-16页 |
2.2.3 脂肪体总 RNA 的提取 | 第16页 |
2.2.4 反转录成 cDNA | 第16-17页 |
2.2.5 PCR 扩增 | 第17-18页 |
2.2.6 目的片段的回收 | 第18页 |
2.2.7 目的片段与载体连接及转化 | 第18-19页 |
2.2.8 阳性菌落的鉴定 | 第19-20页 |
2.2.9 重组质粒的提取及测序 | 第20-21页 |
2.3 结果 | 第21-22页 |
2.3.1 免疫小体总 RNA 的提取 | 第21页 |
2.3.2 日本七鳃鳗 CD82 的基因克隆 | 第21-22页 |
2.4 讨论 | 第22-23页 |
2.5 小结 | 第23-24页 |
3 CD82 氨基酸序列的生物信息学分析 | 第24-39页 |
3.1 使用的在线网站和软件(表 3.1) | 第24页 |
3.2 结果 | 第24-37页 |
3.2.1 一级结构分析 | 第24-28页 |
3.2.2 功能结构域预测 | 第28-29页 |
3.2.3 二级结构预测 | 第29-30页 |
3.2.4 三级结构模拟 | 第30-31页 |
3.2.5 抗原表位预测 | 第31页 |
3.2.6 同源序列比对 | 第31-33页 |
3.2.7 保守性分析 | 第33-36页 |
3.2.8 系统发育分析 | 第36-37页 |
3.3 讨论 | 第37-38页 |
3.4 小结 | 第38-39页 |
4 半定量 RT-PCR 检测 CD82 在七鳃鳗各组织中的相对表达量 | 第39-46页 |
4.1 材料 | 第39-40页 |
4.1.1 实验材料 | 第39页 |
4.1.2 仪器设备 | 第39页 |
4.1.3 药品及试剂 | 第39-40页 |
4.2 方法 | 第40-43页 |
4.2.1 菌液刺激七鳃鳗 | 第40页 |
4.2.2 白细胞的分离及组织提取 | 第40页 |
4.2.3 白细胞及组织总 RNA 的提取 | 第40-41页 |
4.2.4 半定量 RT-PCR 法检测 CD82 在七鳃鳗中相对表达量 | 第41-43页 |
4.3 结果 | 第43-44页 |
4.3.1 七鳃鳗各组织总 RNA 提取 | 第43页 |
4.3.2 CD82 在七鳃鳗不同组织中的相对表达量 | 第43-44页 |
4.4 讨论 | 第44页 |
4.5 小结 | 第44-46页 |
5 原核表达载体的构建 | 第46-52页 |
5.1 材料 | 第46-47页 |
5.1.1 仪器设备 | 第46页 |
5.1.2 药品及试剂 | 第46-47页 |
5.2 方法 | 第47-49页 |
5.2.1 设计引物 | 第47页 |
5.2.2 PCR 扩增 | 第47-48页 |
5.2.3 目的片段的回收与双酶切 | 第48-49页 |
5.2.4 重组表达菌的鉴定 | 第49页 |
5.3 结果 | 第49-50页 |
5.4 讨论 | 第50-51页 |
5.5 小结 | 第51-52页 |
6 结论 | 第52-53页 |
本论文的创新点 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-56页 |
附录A 脂肪体 cDNA 文库中 CD82 的 EST 序列 | 第56-57页 |
附录B 不同物种的 CD82 的 FASTA 格式氨基酸序列 | 第57-62页 |
研究生期间发表文章及研究成果 | 第62-63页 |
致谢 | 第63页 |