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七鳃鳗CD82的分子克隆及生物信息学分析

摘要第3-4页
Abstract第4页
1. 绪论第8-14页
    1.1 KAI1/CD82 的分子结构特点第8-9页
    1.2 KAI1/CD82 基因表达的调节第9-10页
    1.3 KAI1/CD82 的翻译后修饰第10页
        1.3.1 十六(烷)酰化第10页
        1.3.2 糖基化第10页
    1.4 参与免疫应答第10-11页
        1.4.1 与 T 细胞的免疫应答第10-11页
        1.4.2 与 B 细胞的免疫应答第11页
    1.5 参与调节细胞黏附第11页
    1.6 调节细胞的迁移第11-12页
    1.7 诱导细胞的凋亡第12页
    1.8 CD82 与肿瘤的关系第12-13页
    1.9 展望第13-14页
2 七鳃鳗 CD82 的分子克隆第14-24页
    2.1 材料第14-15页
        2.1.1 实验材料第14页
        2.1.2 仪器设备第14页
        2.1.3 药品及试剂第14-15页
    2.2 方法第15-21页
        2.2.1 引物设计第15页
        2.2.2 白细胞分离第15-16页
        2.2.3 脂肪体总 RNA 的提取第16页
        2.2.4 反转录成 cDNA第16-17页
        2.2.5 PCR 扩增第17-18页
        2.2.6 目的片段的回收第18页
        2.2.7 目的片段与载体连接及转化第18-19页
        2.2.8 阳性菌落的鉴定第19-20页
        2.2.9 重组质粒的提取及测序第20-21页
    2.3 结果第21-22页
        2.3.1 免疫小体总 RNA 的提取第21页
        2.3.2 日本七鳃鳗 CD82 的基因克隆第21-22页
    2.4 讨论第22-23页
    2.5 小结第23-24页
3 CD82 氨基酸序列的生物信息学分析第24-39页
    3.1 使用的在线网站和软件(表 3.1)第24页
    3.2 结果第24-37页
        3.2.1 一级结构分析第24-28页
        3.2.2 功能结构域预测第28-29页
        3.2.3 二级结构预测第29-30页
        3.2.4 三级结构模拟第30-31页
        3.2.5 抗原表位预测第31页
        3.2.6 同源序列比对第31-33页
        3.2.7 保守性分析第33-36页
        3.2.8 系统发育分析第36-37页
    3.3 讨论第37-38页
    3.4 小结第38-39页
4 半定量 RT-PCR 检测 CD82 在七鳃鳗各组织中的相对表达量第39-46页
    4.1 材料第39-40页
        4.1.1 实验材料第39页
        4.1.2 仪器设备第39页
        4.1.3 药品及试剂第39-40页
    4.2 方法第40-43页
        4.2.1 菌液刺激七鳃鳗第40页
        4.2.2 白细胞的分离及组织提取第40页
        4.2.3 白细胞及组织总 RNA 的提取第40-41页
        4.2.4 半定量 RT-PCR 法检测 CD82 在七鳃鳗中相对表达量第41-43页
    4.3 结果第43-44页
        4.3.1 七鳃鳗各组织总 RNA 提取第43页
        4.3.2 CD82 在七鳃鳗不同组织中的相对表达量第43-44页
    4.4 讨论第44页
    4.5 小结第44-46页
5 原核表达载体的构建第46-52页
    5.1 材料第46-47页
        5.1.1 仪器设备第46页
        5.1.2 药品及试剂第46-47页
    5.2 方法第47-49页
        5.2.1 设计引物第47页
        5.2.2 PCR 扩增第47-48页
        5.2.3 目的片段的回收与双酶切第48-49页
        5.2.4 重组表达菌的鉴定第49页
    5.3 结果第49-50页
    5.4 讨论第50-51页
    5.5 小结第51-52页
6 结论第52-53页
本论文的创新点第53-54页
参考文献第54-56页
附录A 脂肪体 cDNA 文库中 CD82 的 EST 序列第56-57页
附录B 不同物种的 CD82 的 FASTA 格式氨基酸序列第57-62页
研究生期间发表文章及研究成果第62-63页
致谢第63页

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