摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-9页 |
文献综述 | 第12-25页 |
第一章 卵母细胞激活中产生的 Ca~(2+)波动 | 第12-18页 |
1.1 精子引发卵母细胞内 Ca~(2+)波动的机制 | 第12-14页 |
1.2 卵母细胞中的 Ca~(2+)波动模式 | 第14-15页 |
1.3 受精中的 Ca~(2+)释放机制的多种假说 | 第15-16页 |
1.4 可能存在一种精子激活因子 | 第16-18页 |
第二章 激活哺乳动物卵母细胞的特殊精子因子 PLCζ | 第18-25页 |
2.1 精子因子的探索:一种新型的 PLCζ | 第18页 |
2.2 PLCζ亚型是与众不同的 | 第18-22页 |
2.2.1 PLCζ的 XY 结构域 | 第19页 |
2.2.2 EF 手性结构域 | 第19-20页 |
2.2.3 PLCζ的 C2 结构域 | 第20页 |
2.2.4 PLCζ的 XY-linker 结构域 | 第20-22页 |
2.3. PLCζ在精子中和卵母细胞中的活性调节 | 第22-23页 |
2.4. PLCζ在卵中的定位 | 第23-25页 |
试验研究 | 第25-43页 |
第三章 牛 PLCζ与牛 PLCζ-XY 基因的克隆和真核表达载体构建 | 第25-37页 |
3.1 材料和方法 | 第25-30页 |
3.1.1 仪器设备 | 第25页 |
3.1.2 主要试剂 | 第25-26页 |
3.1.3 试验材料 | 第26页 |
3.1.4 pVenus-PLCζ/pVenus-XY 真核表达载体的构建 | 第26-29页 |
3.1.5 pVenus-PLCζ和 pVenus-XY 真核表达载体体外转录获取 cRNA | 第29-30页 |
3.2 结果 | 第30-36页 |
3.2.1 牛睾丸组织和牛精液中β-actin 基因的扩增结果 | 第30-31页 |
3.2.2 牛睾丸组织中 PLCζ/PLCζ-XY CDS 全长克隆及鉴定 | 第31-32页 |
3.2.3 pVenus-PLCζ/PLCζ-XY 真核表达载体双酶切鉴定 | 第32-33页 |
3.2.4 荧光显微镜下观察重组质粒 pVenus-PLCζ/PLCζ-XY 在 Hela 细胞中的表达、定位 | 第33-35页 |
3.3.5 RT-PCR 鉴定重组质粒 pVenus-PLCζ/PLCζ-XY 的表达 | 第35页 |
3.2.6 体外转录产物分析 | 第35-36页 |
3.3 讨论 | 第36页 |
3.4 小结 | 第36-37页 |
第四章 牛 PLCζ在牛卵母细胞中的作用的初步研究 | 第37-43页 |
4.1 材料和方法 | 第37-39页 |
4.1.1 仪器和设备 | 第37页 |
4.1.2 主要试剂 | 第37页 |
4.1.3 试验材料 | 第37页 |
4.1.4 在成熟的牛卵母细胞中表达 PLCζ以及 PLCζ-XY | 第37-38页 |
4.1.5 卵母细胞的孤雌激活 | 第38页 |
4.1.6 统计分析 | 第38-39页 |
4.2 结果 | 第39-41页 |
4.2.1 PLCζ在成熟牛卵母细胞中的表达定位 | 第39页 |
4.2.2 PLCζ-XY 在成熟牛卵母细胞中的表达定位 | 第39-40页 |
4.2.3 PLCζ对成熟牛卵母细胞的作用 | 第40-41页 |
4.2.4 PLCζ-XY 对成熟牛卵母细胞的作用 | 第41页 |
4.3 讨论 | 第41-42页 |
4.4 小结 | 第42-43页 |
结论 | 第43页 |
本研究的创新点与进一步研究的课题 | 第43-44页 |
创新点 | 第43页 |
进一步的研究计划 | 第43-44页 |
参考文献 | 第44-50页 |
致谢 | 第50-51页 |
作者简介 | 第51页 |