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牛PLCζ基因的克隆及其在卵母细胞激活中的作用的初步研究

摘要第6-8页
ABSTRACT第8-9页
文献综述第12-25页
    第一章 卵母细胞激活中产生的 Ca~(2+)波动第12-18页
        1.1 精子引发卵母细胞内 Ca~(2+)波动的机制第12-14页
        1.2 卵母细胞中的 Ca~(2+)波动模式第14-15页
        1.3 受精中的 Ca~(2+)释放机制的多种假说第15-16页
        1.4 可能存在一种精子激活因子第16-18页
    第二章 激活哺乳动物卵母细胞的特殊精子因子 PLCζ第18-25页
        2.1 精子因子的探索:一种新型的 PLCζ第18页
        2.2 PLCζ亚型是与众不同的第18-22页
            2.2.1 PLCζ的 XY 结构域第19页
            2.2.2 EF 手性结构域第19-20页
            2.2.3 PLCζ的 C2 结构域第20页
            2.2.4 PLCζ的 XY-linker 结构域第20-22页
        2.3. PLCζ在精子中和卵母细胞中的活性调节第22-23页
        2.4. PLCζ在卵中的定位第23-25页
试验研究第25-43页
    第三章 牛 PLCζ与牛 PLCζ-XY 基因的克隆和真核表达载体构建第25-37页
        3.1 材料和方法第25-30页
            3.1.1 仪器设备第25页
            3.1.2 主要试剂第25-26页
            3.1.3 试验材料第26页
            3.1.4 pVenus-PLCζ/pVenus-XY 真核表达载体的构建第26-29页
            3.1.5 pVenus-PLCζ和 pVenus-XY 真核表达载体体外转录获取 cRNA第29-30页
        3.2 结果第30-36页
            3.2.1 牛睾丸组织和牛精液中β-actin 基因的扩增结果第30-31页
            3.2.2 牛睾丸组织中 PLCζ/PLCζ-XY CDS 全长克隆及鉴定第31-32页
            3.2.3 pVenus-PLCζ/PLCζ-XY 真核表达载体双酶切鉴定第32-33页
            3.2.4 荧光显微镜下观察重组质粒 pVenus-PLCζ/PLCζ-XY 在 Hela 细胞中的表达、定位第33-35页
            3.3.5 RT-PCR 鉴定重组质粒 pVenus-PLCζ/PLCζ-XY 的表达第35页
            3.2.6 体外转录产物分析第35-36页
        3.3 讨论第36页
        3.4 小结第36-37页
    第四章 牛 PLCζ在牛卵母细胞中的作用的初步研究第37-43页
        4.1 材料和方法第37-39页
            4.1.1 仪器和设备第37页
            4.1.2 主要试剂第37页
            4.1.3 试验材料第37页
            4.1.4 在成熟的牛卵母细胞中表达 PLCζ以及 PLCζ-XY第37-38页
            4.1.5 卵母细胞的孤雌激活第38页
            4.1.6 统计分析第38-39页
        4.2 结果第39-41页
            4.2.1 PLCζ在成熟牛卵母细胞中的表达定位第39页
            4.2.2 PLCζ-XY 在成熟牛卵母细胞中的表达定位第39-40页
            4.2.3 PLCζ对成熟牛卵母细胞的作用第40-41页
            4.2.4 PLCζ-XY 对成熟牛卵母细胞的作用第41页
        4.3 讨论第41-42页
        4.4 小结第42-43页
结论第43页
本研究的创新点与进一步研究的课题第43-44页
    创新点第43页
    进一步的研究计划第43-44页
参考文献第44-50页
致谢第50-51页
作者简介第51页

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