| 摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5页 |
| 第一章 绪论 | 第9-19页 |
| 1.1 蛋白酶概述 | 第9页 |
| 1.2 微生物蛋白酶简介 | 第9-14页 |
| 1.2.1 微生物蛋白酶分类及酶学性质 | 第10-11页 |
| 1.2.1.1 酸性蛋白酶 | 第10页 |
| 1.2.1.2 中性蛋白酶 | 第10页 |
| 1.2.1.3 碱性蛋白酶 | 第10-11页 |
| 1.2.2 微生物蛋白酶的生产 | 第11-12页 |
| 1.2.3 微生物蛋白酶的应用 | 第12-14页 |
| 1.2.3.1 微生物蛋白酶应用于净洗剂的制造 | 第12-13页 |
| 1.2.3.2 微生物蛋白酶应用于制革业 | 第13页 |
| 1.2.3.3 微生物蛋白酶的应用于食品工业 | 第13-14页 |
| 1.2.3.4 微生物蛋白酶应用于畜牧业 | 第14页 |
| 1.2.3.5 微生物蛋白酶应用于医疗领域 | 第14页 |
| 1.3 海洋微生物概述 | 第14-18页 |
| 1.3.1 海洋微生物的分布 | 第15-16页 |
| 1.3.2 海洋微生物的特点 | 第16页 |
| 1.3.3 海洋微生物的代谢产物 | 第16-17页 |
| 1.3.4 海洋微生物产蛋白酶的研究进展 | 第17-18页 |
| 1.4 课题的提出及内容 | 第18-19页 |
| 第二章 产蛋白酶的海洋微生物的筛选与鉴定 | 第19-31页 |
| 2.1 引言 | 第19页 |
| 2.2 材料与方法 | 第19-23页 |
| 2.2.1 实验试剂及仪器 | 第19-21页 |
| 2.2.1.1 所需试剂 | 第19-20页 |
| 2.2.1.2 所需仪器 | 第20-21页 |
| 2.2.1.3 培养基配方 | 第21页 |
| 2.2.2 方法 | 第21-23页 |
| 2.2.2.1 海水样品的取得 | 第21页 |
| 2.2.2.2 菌种筛选 | 第21页 |
| 2.2.2.3 酶活性测定 | 第21-23页 |
| 2.2.2.4 菌种鉴定 | 第23页 |
| 2.2.2.5 温度、pH、盐度对菌种液体发酵的影响 | 第23页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第23-29页 |
| 2.3.1 产蛋白酶海洋微生物的筛选 | 第23-24页 |
| 2.3.2 酶活测定 | 第24-26页 |
| 2.3.3 菌种鉴定 | 第26-27页 |
| 2.3.3.1 菌体形态与生理特性 | 第26页 |
| 2.3.3.2 16S rDNA 鉴定 | 第26-27页 |
| 2.3.4 温度、pH、盐度对菌种液体发酵的影响 | 第27-29页 |
| 2.3.4.1 菌种生长曲线的测定 | 第27-28页 |
| 2.3.4.2 温度、初始 pH、盐度对菌体生长的影响 | 第28-29页 |
| 2.4 小结 | 第29-31页 |
| 第三章 蛋白酶生产条件的研究 | 第31-41页 |
| 3.1 引言 | 第31页 |
| 3.2 材料与方法 | 第31-33页 |
| 3.2.1 实验试剂及仪器 | 第31-32页 |
| 3.2.2 实验方法 | 第32-33页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第33-40页 |
| 3.3.1 时间对发酵液酶活的影响 | 第33页 |
| 3.3.2 温度对发酵液酶活的影响 | 第33-34页 |
| 3.3.3 初始 pH 对发酵液酶活的影响 | 第34-35页 |
| 3.3.4 转速对发酵液酶活的影响 | 第35页 |
| 3.3.5 装液量对发酵液酶活的影响 | 第35-36页 |
| 3.3.6 不同碳源对发酵液酶活的影响 | 第36-37页 |
| 3.3.7 不同无机氮源对发酵液酶活的影响 | 第37-38页 |
| 3.3.8 不同金属离子对发酵液酶活的影响 | 第38-40页 |
| 3.4 小结 | 第40-41页 |
| 第四章 所产蛋白酶的纯化及性质研究 | 第41-53页 |
| 4.1 引言 | 第41页 |
| 4.2 材料与方法 | 第41-45页 |
| 4.2.1 实验试剂及仪器 | 第41-42页 |
| 4.2.2 实验方法 | 第42-45页 |
| 4.2.2.1 发酵液的预处理 | 第42页 |
| 4.2.2.2 盐析法提取 D5 菌蛋白酶 | 第42-43页 |
| 4.2.2.3 分子筛层析法提取 D5 菌蛋白酶 | 第43页 |
| 4.2.2.4 酶的最适温度及热稳定性测定 | 第43页 |
| 4.2.2.5 酶的最适 pH 及酸碱稳定性的研究 | 第43页 |
| 4.2.2.6 金属离子对酶活的影响 | 第43页 |
| 4.2.2.7 酶的分子量测定 | 第43-44页 |
| 4.2.2.8 常见抑制剂对酶活的影响 | 第44-45页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第45-52页 |
| 4.3.1 酶的提取 | 第45-48页 |
| 4.3.1.1 盐析法提取 D5 菌蛋白酶的研究 | 第45-47页 |
| 4.3.1.2 分子筛层析纯化 D5 菌蛋白酶 | 第47-48页 |
| 4.3.2 D5 菌蛋白酶的酶学性质 | 第48-52页 |
| 4.3.2.1 酶的最适温度及热稳定性 | 第48-49页 |
| 4.3.2.2 酶的最适 pH 及 pH 稳定性 | 第49-50页 |
| 4.3.2.3 金属离子对酶活的影响 | 第50页 |
| 4.3.2.4 酶的分子量测定结果 | 第50-51页 |
| 4.3.2.5 常见抑制剂对酶活的影响 | 第51-52页 |
| 4.4 小结 | 第52-53页 |
| 第五章 结论 | 第53-55页 |
| 参考文献 | 第55-59页 |
| 攻读学位期间所取得的相关科研成果 | 第59-61页 |
| 致谢 | 第61页 |
