| 符号说明 | 第4-7页 |
| 中文摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 1 前言 | 第11-19页 |
| 1.1 miRNAs研究进展 | 第11-16页 |
| 1.1.1 miRNAs概述 | 第11-12页 |
| 1.1.2 miRNAs的生物合成过程及作用机制 | 第12-13页 |
| 1.1.3 miRNAs对乳腺发育及泌乳的调节 | 第13-16页 |
| 1.2 MEN1研究进展 | 第16-17页 |
| 1.2.1 MEN1基因与细胞增殖 | 第16页 |
| 1.2.2 MEN1基因对奶牛乳腺发育及泌乳的影响 | 第16-17页 |
| 1.3 miR-24研究进展 | 第17-18页 |
| 1.4 研究目的与意义 | 第18-19页 |
| 2 材料与方法 | 第19-32页 |
| 2.1 试验材料、试剂及仪器 | 第19-20页 |
| 2.1.1 细胞与组织 | 第19页 |
| 2.1.2 试验仪器 | 第19页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第19页 |
| 2.1.4 常用试剂及配制 | 第19-20页 |
| 2.2 试验方法 | 第20-31页 |
| 2.2.1 靶基因预测 | 第20页 |
| 2.2.2 奶牛乳腺上皮细胞系的培养 | 第20-21页 |
| 2.2.3 荧光素酶活性检测 | 第21-22页 |
| 2.2.4 MAC-T细胞中bta-miR-24-3p对MEN1基因的影响 | 第22-28页 |
| 2.2.5 不同泌乳时期乳腺组织中bta-miR-24-3p的表达 | 第28页 |
| 2.2.6 MAC-T细胞中MEN1基因对bta-miR-24-3p的影响 | 第28页 |
| 2.2.7 bta-miR-24-3pmimics/inhibitor对MAC-T的影响 | 第28-31页 |
| 2.3 数据处理 | 第31-32页 |
| 3 结果与分析 | 第32-49页 |
| 3.1 靶向关系预测结果 | 第32-33页 |
| 3.2 荧光素酶活性测定 | 第33页 |
| 3.3 MAC-T细胞中bta-miR-24-3p对MEN1基因的影响 | 第33-38页 |
| 3.3.1 bta-miR-24-3pmimics最佳转染时间确定 | 第33-34页 |
| 3.3.2 bta-miR-24-3pmimics对MAC-T细胞内MEN1基因mRNA及蛋白水平的影响 | 第34-36页 |
| 3.3.3 bta-miR-24-3pinhibitor最佳转染时间确定 | 第36-37页 |
| 3.3.4 bta-miR-24-3pinhibitor对MAC-T细胞内MEN1基因mRNA及蛋白水平的影响. | 第37-38页 |
| 3.4 bta-miR-24-3p在不同泌乳时期乳腺组织的表达 | 第38-40页 |
| 3.4.1 奶牛乳腺组织RNA质量检测 | 第38-39页 |
| 3.4.2 bta-miR-24-3p在不同泌乳时期乳腺组织中的表达 | 第39-40页 |
| 3.5 MAC-T细胞内MEN1基因对bta-miR-24-3p的影响 | 第40页 |
| 3.6 bta-miR-24-3pmimics/inhibitor对MAC-T的影响 | 第40-49页 |
| 3.6.1 bta-miR-24-3pmimics对MAC-T细胞增殖影响 | 第40-41页 |
| 3.6.2 bta-miR-24-3pmimics对MAC-T细胞细胞周期的影响 | 第41-43页 |
| 3.6.3 bta-miR-24-3pmimics对MAC-T细胞细胞周期相关因子的表达分析 | 第43页 |
| 3.6.4 bta-miR-24-3pmimics对乳蛋白合成相关通路的影响 | 第43-44页 |
| 3.6.5 bta-miR-24-3pinhibitor对MAC-T细胞增殖及活性的影响 | 第44-45页 |
| 3.6.6 bta-miR-24-3pinhibitor对MAC-T细胞细胞周期的影响 | 第45-46页 |
| 3.6.7 bta-miR-24-3pinhibitor对MAC-T细胞细胞周期相关因子的表达分析 | 第46-47页 |
| 3.6.8 bta-miR-24-3pinhibitor对乳蛋白合成相关通路的影响 | 第47-49页 |
| 4 讨论 | 第49-55页 |
| 4.1 bta-miR-24-3p靶向MEN1基因的3'UTR | 第49-50页 |
| 4.2 bta-miR-24-3p与MEN1之间存在负反馈调节 | 第50-51页 |
| 4.3 bta-miR-24-3p对奶牛乳腺上皮细胞增殖及细胞周期的影响 | 第51-52页 |
| 4.4 奶牛乳腺上皮细胞中bta-miR-24-3p对乳蛋白合成的影响 | 第52-53页 |
| 4.5 bta-miR-24-3p与MEN1基因协同调控奶牛乳腺上皮细胞 | 第53-55页 |
| 5 结论 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-63页 |
| 致谢 | 第63页 |
