摘要 | 第6-7页 |
abstract | 第7-8页 |
第一章 文献综述 | 第11-22页 |
1.1 花绒寄甲生物学研究 | 第11页 |
1.2 人工繁育 | 第11-12页 |
1.3 花绒寄甲在生物防治方面的应用 | 第12-13页 |
1.4 花绒寄甲的衰老机制研究 | 第13-14页 |
1.5 Mth/Mth-like受体 | 第14-16页 |
1.5.1 Mth受体的结构特征家族种类及组织表达分布特异性 | 第14-15页 |
1.5.2 Mth受体的生理功能 | 第15-16页 |
1.6 昆虫的RNAi | 第16-20页 |
1.6.1 RNAi的作用机制 | 第16-18页 |
1.6.2 RNAi的特征 | 第18页 |
1.6.3 RNAi在昆虫研究中的应用 | 第18-20页 |
1.7 研究内容及目的意义 | 第20-21页 |
1.7.1 研究内容 | 第20页 |
1.7.2 目的意义 | 第20-21页 |
1.8 技术路线 | 第21-22页 |
第二章 材料与方法 | 第22-29页 |
2.1 材料 | 第22页 |
2.1.1 供试昆虫 | 第22页 |
2.1.2 主要仪器设备 | 第22页 |
2.1.3 主要试剂(盒) | 第22页 |
2.2 花绒寄甲mth-likel基因鉴定及生物信息学分析 | 第22-23页 |
2.3 花绒寄甲幼虫、成虫总RNA提取及cDNA合成 | 第23-24页 |
2.3.1 总RNA提取 | 第23页 |
2.3.2 RNA质量检测 | 第23页 |
2.3.3 cDNA第一链的合成与纯化 | 第23-24页 |
2.4 mthl基因片段的克隆 | 第24页 |
2.4.1 基因的PCR | 第24页 |
2.4.2 PCR产物的回收 | 第24页 |
2.4.3 PCR产物的克隆 | 第24页 |
2.5 实时荧光定量PCR/RT-qPCR | 第24-26页 |
2.5.1 实时荧光定量PCR | 第24-25页 |
2.5.2 定量引物的检测 | 第25-26页 |
2.6 花绒寄甲的RNAi | 第26-28页 |
2.6.1 dsRNA的合成 | 第26-27页 |
2.6.2 花绒寄甲幼虫、成虫dsRNA最佳注射浓度的筛选 | 第27页 |
2.6.3 花绒寄甲成虫RNAi后的胁迫处理 | 第27-28页 |
2.7 数据分析 | 第28-29页 |
第三章 结果与分析 | 第29-44页 |
3.1 花绒寄甲mthl基因检索及序列分析 | 第29-32页 |
3.2 花绒寄甲mth-like基因高表达的筛选 | 第32-34页 |
3.3 花绒寄甲的RNAi | 第34-44页 |
3.3.1 dsRNA的合成 | 第34页 |
3.3.2 不同dsRNA浓度下花绒寄甲幼虫和成虫目标基因的表达量变化 | 第34-38页 |
3.3.3 注射dsRNA后幼虫、成虫表型变化 | 第38-39页 |
3.3.4 注射dsRNA对雌成虫产卵及成虫成活率的影响 | 第39-40页 |
3.3.5 不同胁迫下RNAi后成虫的变化 | 第40-44页 |
第四章 结论与讨论 | 第44-48页 |
4.1 主要结论 | 第44-45页 |
4.1.1 三条花绒寄甲mth-likecDNA全长序列及比对分析 | 第44页 |
4.1.2 三条花绒寄甲mth-like的表达比较 | 第44页 |
4.1.3 花绒寄甲幼虫注射dsRNA后Mth-like2-2的表达 | 第44页 |
4.1.4 花绒寄甲成虫注射dsRNA后Mth-like2-5的表达 | 第44页 |
4.1.5 花绒寄甲成虫RNAi后的胁迫处理 | 第44-45页 |
4.2 讨论 | 第45-48页 |
4.2.1 dsRNA导入虫体方式与剂量 | 第45页 |
4.2.2 dsRNA长度及试验条件与RNAi效果 | 第45-46页 |
4.2.3 dsRNA干扰与花绒寄甲雌虫的生殖 | 第46页 |
4.2.4 dsRNA干扰与花绒寄甲成虫的寿命 | 第46-48页 |
第五章 创新与展望 | 第48-49页 |
5.1 创新点 | 第48页 |
5.2 研究展望 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-56页 |
致谢 | 第56-57页 |
作者简介 | 第57页 |