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花绒寄甲调控寿命基因(mthl)及其RNA干扰研究

摘要第6-7页
abstract第7-8页
第一章 文献综述第11-22页
    1.1 花绒寄甲生物学研究第11页
    1.2 人工繁育第11-12页
    1.3 花绒寄甲在生物防治方面的应用第12-13页
    1.4 花绒寄甲的衰老机制研究第13-14页
    1.5 Mth/Mth-like受体第14-16页
        1.5.1 Mth受体的结构特征家族种类及组织表达分布特异性第14-15页
        1.5.2 Mth受体的生理功能第15-16页
    1.6 昆虫的RNAi第16-20页
        1.6.1 RNAi的作用机制第16-18页
        1.6.2 RNAi的特征第18页
        1.6.3 RNAi在昆虫研究中的应用第18-20页
    1.7 研究内容及目的意义第20-21页
        1.7.1 研究内容第20页
        1.7.2 目的意义第20-21页
    1.8 技术路线第21-22页
第二章 材料与方法第22-29页
    2.1 材料第22页
        2.1.1 供试昆虫第22页
        2.1.2 主要仪器设备第22页
        2.1.3 主要试剂(盒)第22页
    2.2 花绒寄甲mth-likel基因鉴定及生物信息学分析第22-23页
    2.3 花绒寄甲幼虫、成虫总RNA提取及cDNA合成第23-24页
        2.3.1 总RNA提取第23页
        2.3.2 RNA质量检测第23页
        2.3.3 cDNA第一链的合成与纯化第23-24页
    2.4 mthl基因片段的克隆第24页
        2.4.1 基因的PCR第24页
        2.4.2 PCR产物的回收第24页
        2.4.3 PCR产物的克隆第24页
    2.5 实时荧光定量PCR/RT-qPCR第24-26页
        2.5.1 实时荧光定量PCR第24-25页
        2.5.2 定量引物的检测第25-26页
    2.6 花绒寄甲的RNAi第26-28页
        2.6.1 dsRNA的合成第26-27页
        2.6.2 花绒寄甲幼虫、成虫dsRNA最佳注射浓度的筛选第27页
        2.6.3 花绒寄甲成虫RNAi后的胁迫处理第27-28页
    2.7 数据分析第28-29页
第三章 结果与分析第29-44页
    3.1 花绒寄甲mthl基因检索及序列分析第29-32页
    3.2 花绒寄甲mth-like基因高表达的筛选第32-34页
    3.3 花绒寄甲的RNAi第34-44页
        3.3.1 dsRNA的合成第34页
        3.3.2 不同dsRNA浓度下花绒寄甲幼虫和成虫目标基因的表达量变化第34-38页
        3.3.3 注射dsRNA后幼虫、成虫表型变化第38-39页
        3.3.4 注射dsRNA对雌成虫产卵及成虫成活率的影响第39-40页
        3.3.5 不同胁迫下RNAi后成虫的变化第40-44页
第四章 结论与讨论第44-48页
    4.1 主要结论第44-45页
        4.1.1 三条花绒寄甲mth-likecDNA全长序列及比对分析第44页
        4.1.2 三条花绒寄甲mth-like的表达比较第44页
        4.1.3 花绒寄甲幼虫注射dsRNA后Mth-like2-2的表达第44页
        4.1.4 花绒寄甲成虫注射dsRNA后Mth-like2-5的表达第44页
        4.1.5 花绒寄甲成虫RNAi后的胁迫处理第44-45页
    4.2 讨论第45-48页
        4.2.1 dsRNA导入虫体方式与剂量第45页
        4.2.2 dsRNA长度及试验条件与RNAi效果第45-46页
        4.2.3 dsRNA干扰与花绒寄甲雌虫的生殖第46页
        4.2.4 dsRNA干扰与花绒寄甲成虫的寿命第46-48页
第五章 创新与展望第48-49页
    5.1 创新点第48页
    5.2 研究展望第48-49页
参考文献第49-56页
致谢第56-57页
作者简介第57页

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