| 中文摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-10页 |
| 专业名词缩写符号 | 第11-18页 |
| 第一章 文献综述 | 第18-30页 |
| 1 前言 | 第18页 |
| 2 鹅肝脏的特殊性 | 第18页 |
| 2.1 鹅肝脂肪变性的可逆性 | 第18页 |
| 2.2 鹅肥肝的营养特点 | 第18页 |
| 3 影响细胞增殖的因素 | 第18-23页 |
| 3.1 葡萄糖对细胞增殖的影响 | 第19-20页 |
| 3.1.1 葡萄糖通过细胞周期调控因子调控细胞增殖 | 第19-20页 |
| 3.1.2 葡萄糖通过PI3K信号途径调控细胞增殖 | 第20页 |
| 3.2 胰岛素对细胞增殖的影响 | 第20-22页 |
| 3.2.1 胰岛素通过细胞周期调控因子调控细胞增殖 | 第21页 |
| 3.2.2 胰岛素通过PI3K信号途径调控细胞增殖 | 第21-22页 |
| 3.3 胰岛素和葡萄糖的联合调控作用 | 第22-23页 |
| 4 影响细胞增殖的因子 | 第23-28页 |
| 4.1 细胞周期调控因子与细胞增殖 | 第23-25页 |
| 4.1.1 细胞周期蛋白D(CyclinD)与细胞增殖 | 第23-24页 |
| 4.1.2 CDK抑制蛋白p21和p27与细胞增殖 | 第24-25页 |
| 4.2 FoxO1与细胞增殖 | 第25-27页 |
| 4.2.1 FoxO1的功能 | 第25-26页 |
| 4.2.2 FoxO1对细胞增殖的作用 | 第26-27页 |
| 4.3 Sirt1与细胞增殖 | 第27-28页 |
| 4.3.1 Sirt1的功能 | 第27页 |
| 4.3.2 Sirt1对细胞增殖的作用 | 第27-28页 |
| 5 本研究目的、意义 | 第28-29页 |
| 6 主要研究内容及技术路线 | 第29-30页 |
| 6.1 主要研究内容 | 第29页 |
| 6.2 技术路线 | 第29-30页 |
| 第二章 填肥对天府肉鹅和钢鹅组织细胞增殖相关基因表达的影响 | 第30-47页 |
| 1 前言 | 第30页 |
| 2 材料与方法 | 第30-36页 |
| 2.1 试验动物选取、饲养与样品采集 | 第30-31页 |
| 2.1.1 品种与数量 | 第30页 |
| 2.1.2 饲养管理 | 第30-31页 |
| 2.1.3 血样采集与处理 | 第31页 |
| 2.1.4 组织样品采集与处理 | 第31页 |
| 2.2 主要仪器与试剂 | 第31-33页 |
| 2.2.1 主要仪器 | 第31-32页 |
| 2.2.2 主要试剂及试剂盒 | 第32页 |
| 2.2.3 主要试剂的配制 | 第32-33页 |
| 2.3 石蜡组织切片法检测肝细胞脂肪变性 | 第33页 |
| 2.4 血清胰岛素、葡萄糖和TG浓度的检测 | 第33页 |
| 2.5 细胞增殖调控基因mRNA表达水平的检测 | 第33-36页 |
| 2.5.1 组织总RNA的提取与cDNA合成 | 第33-34页 |
| 2.5.2 被检测基因的引物设计与合成 | 第34-35页 |
| 2.5.3 实时定量引物特异性的检测与鉴定 | 第35页 |
| 2.5.4 基因表达分析 | 第35-36页 |
| 2.6 肝脏中与细胞增殖相关蛋白含量的测定 | 第36页 |
| 2.7 数据统计分析 | 第36页 |
| 3 结果 | 第36-44页 |
| 3.1 填肥对天府肉鹅和钢鹅生长性能的影响 | 第36-38页 |
| 3.2 填肥对天府肉鹅和钢鹅肝脏脂肪变性的影响 | 第38页 |
| 3.3 填肥对天府肉鹅和钢鹅血清胰岛素、葡萄糖和TG浓度的影响 | 第38-39页 |
| 3.4 填肥对天府肉鹅和钢鹅中PI3K-Akt1-mTOR信号通路相关基因表达的影响 | 第39-41页 |
| 3.5 填肥对天府肉鹅和钢鹅中CyclinD1/D2/D3、p27基因表达的影响 | 第41-42页 |
| 3.6 填肥对天府肉鹅和钢鹅中FoxO1和Sirt1表达的影响 | 第42-44页 |
| 4 讨论 | 第44-46页 |
| 4.1 填肥对天府肉鹅和钢鹅生长性能和血清胰岛素、葡萄糖和TG浓度的影响 | 第44页 |
| 4.2 填肥对PI3K-Akt-mTOR信号通路相关基因表达的作用 | 第44-45页 |
| 4.3 填肥对CyclinD1/D2/D3、p27基因表达的影响 | 第45页 |
| 4.4 填肥对Sirt1和FoxO1表达的影响 | 第45-46页 |
| 5 小结 | 第46-47页 |
| 第三章 胰岛素对鹅肝细胞增殖的影响 | 第47-66页 |
| 1 前言 | 第47页 |
| 2 材料与方法 | 第47-52页 |
| 2.1 材料 | 第47-49页 |
| 2.1.1 主要试剂盒 | 第47页 |
| 2.1.2 主要设备 | 第47-48页 |
| 2.1.3 主要试剂配制 | 第48-49页 |
| 2.2 方法 | 第49-52页 |
| 2.2.1 鹅原代肝细胞的分离、培养与处理 | 第49-50页 |
| 2.2.2 CCK-8试剂盒检测细胞活性 | 第50页 |
| 2.2.3 鹅原代肝细胞周期分析 | 第50页 |
| 2.2.4 Brdu-ELISA法检测肝细胞DNA合成率 | 第50页 |
| 2.2.5 细胞Brdu免疫染色检测鹅肝细胞增殖率 | 第50-51页 |
| 2.2.6 ELISA法检测与鹅肝细胞增殖相关因子的蛋白含量 | 第51页 |
| 2.2.7 鹅原代肝细胞总RNA分离提取和Rel-Time RT-PCR | 第51页 |
| 2.2.8 Western blot分析肝细胞CyclinD1、p21、S6K的蛋白表达 | 第51-52页 |
| 2.3 数据统计分析 | 第52页 |
| 3 结果 | 第52-63页 |
| 3.1 胰岛素对鹅肝细胞增殖的影响 | 第52-55页 |
| 3.2 PI3K-Akt-mTOR信号通路抑制剂对胰岛素刺激鹅肝细胞增殖的影响 | 第55-59页 |
| 3.3 胰岛素对PI3K-Akt-mTOR信号通路的影响 | 第59-60页 |
| 3.4 三种抑制剂对胰岛素刺激PI3K-Akt-mTOR信号通路的影响 | 第60-63页 |
| 4 讨论 | 第63-65页 |
| 4.1 胰岛素对鹅肝细胞增殖的作用 | 第63页 |
| 4.2 PI3K-Akt-mTOR信号通路抑制剂在胰岛素刺激鹅肝细胞增殖中的作用 | 第63-64页 |
| 4.3 细胞周期调控因子在胰岛素刺激鹅肝细胞增殖中的作用 | 第64-65页 |
| 5 小结 | 第65-66页 |
| 第四章 葡萄糖及葡萄糖与胰岛素共同处理对鹅肝细胞增殖的影响 | 第66-83页 |
| 1 前言 | 第66-67页 |
| 2 材料与方法 | 第67-68页 |
| 2.1 材料 | 第67页 |
| 2.2 方法 | 第67-68页 |
| 2.2.1 鹅原代肝细胞的分组与处理 | 第67页 |
| 2.2.2 CCK-8试剂盒检测细胞活性 | 第67页 |
| 2.2.3 鹅原代肝细胞周期分析 | 第67页 |
| 2.2.4 Brdu-ELISA法检测肝细胞DNA合成率 | 第67页 |
| 2.2.5 细胞Brdu免疫染色检测鹅肝细胞增殖率 | 第67页 |
| 2.2.6 ELISA法检测与鹅肝细胞增殖相关因子的蛋白含量 | 第67-68页 |
| 2.2.7 鹅原代肝细胞总RNA分离提取和Real-Time RT-PCR | 第68页 |
| 2.2.8 Western blot分析肝细胞CylinD1和p21的蛋白表达 | 第68页 |
| 2.3 数据统计分析 | 第68页 |
| 3 结果 | 第68-78页 |
| 3.1 葡萄糖对鹅肝细胞增殖的影响 | 第68-69页 |
| 3.2 三种抑制剂对葡萄糖诱导鹅肝细胞增殖作用的影响 | 第69-76页 |
| 3.2.1 LY294002对葡萄糖诱导鹅肝细胞增殖作用的影响 | 第69-73页 |
| 3.2.2 Rapamycin对葡萄糖诱导鹅肝细胞增殖作用的影响 | 第73-74页 |
| 3.2.3 NVP-BEZ235对葡萄糖诱导鹅肝细胞增殖作用的影响 | 第74-76页 |
| 3.3 胰岛素和葡萄糖共同处理对鹅肝细胞增殖的影响 | 第76-78页 |
| 3.3.1 胰岛素和葡萄糖对鹅肝细胞DNA合成率的影响 | 第76-77页 |
| 3.3.2 胰岛素和葡萄糖对肝细胞CyclinD1蛋白含量的影响 | 第77-78页 |
| 3.3.3 胰岛素和葡萄糖对鹅肝细胞CyclinD1/D2/D3 mRNA相对表达水平的影响 | 第78页 |
| 4 讨论 | 第78-82页 |
| 4.1 葡萄糖对鹅原代肝细胞增殖的影响 | 第78-79页 |
| 4.2 PI3K-Akt-mTOR信号通路在葡萄糖诱导鹅肝细胞增殖中的作用 | 第79-80页 |
| 4.3 胰岛素和葡萄糖共同处理对鹅肝细胞增殖的影响 | 第80-81页 |
| 4.4 鹅肝细胞增殖与肝细胞脂肪变性的关系 | 第81-82页 |
| 5 小结 | 第82-83页 |
| 第五章 FoxO1在鹅肝细胞增殖中的调控作用 | 第83-98页 |
| 1 前言 | 第83页 |
| 2 材料与方法 | 第83-86页 |
| 2.1 材料 | 第83-84页 |
| 2.1.1 主要试剂及试剂盒 | 第83-84页 |
| 2.1.2 主要试剂配制 | 第84页 |
| 2.2 方法 | 第84-86页 |
| 2.2.1 鹅FoxO1基因干扰载体的构建 | 第84-85页 |
| 2.2.2 鹅原代肝细胞的分离培养 | 第85页 |
| 2.2.3 鹅原代肝细胞转染miR-FoxO1干扰质粒 | 第85页 |
| 2.2.4 鹅原代肝细胞的分组与处理 | 第85页 |
| 2.2.5 CCK-8试剂盒检测细胞活性 | 第85-86页 |
| 2.2.6 细胞周期分析 | 第86页 |
| 2.2.7 Brdu-ELISA法检测肝细胞DNA合成率 | 第86页 |
| 2.2.8 细胞Brdu免疫染色检测鹅肝细胞增殖率 | 第86页 |
| 2.2.9 ELISA法检测与鹅肝细胞增殖相关因子的蛋白含量 | 第86页 |
| 2.2.10 鹅原代肝细胞总RNA分离提取和实时定量RT-PCR检测 | 第86页 |
| 2.2.11 Western Blot分析CyclinD1蛋白表达 | 第86页 |
| 2.3 数据统计分析 | 第86页 |
| 3 结果 | 第86-95页 |
| 3.1 干扰FoxO1对鹅肝细胞增殖的影响 | 第86-89页 |
| 3.2 FoxO1对胰岛素调控鹅肝细胞增殖的影响 | 第89-92页 |
| 3.3 FoxO1对PI3K-Akt-mTOR信号通路调控鹅肝细胞增殖的影响 | 第92-95页 |
| 4 讨论 | 第95-97页 |
| 4.1 FoxO1对鹅原代肝细胞增殖的影响 | 第95-96页 |
| 4.2 PI3K-Akt-mTOR信号通路在FoxO1抑制鹅肝细胞增殖中的作用 | 第96页 |
| 4.3 胰岛素在FoxO1抑制鹅肝细胞增殖中的作用 | 第96-97页 |
| 4.4 FoxO1在鹅肝细胞增殖及脂肪变性中的作用 | 第97页 |
| 5 小结 | 第97-98页 |
| 第六章 Sirt1在鹅肝细胞增殖中的调控作用 | 第98-114页 |
| 1 前言 | 第98页 |
| 2 材料与方法 | 第98-100页 |
| 2.1 主要试剂及试剂盒 | 第98-99页 |
| 2.2 方法 | 第99-100页 |
| 2.2.1 鹅原代肝细胞的分组与处理 | 第99页 |
| 2.2.2 CCK-8试剂盒检测细胞活性 | 第99页 |
| 2.2.3 鹅原代肝细胞周期分析 | 第99页 |
| 2.2.4 Brdu-ELISA法检测肝细胞DNA合成率 | 第99页 |
| 2.2.5 细胞Brdu免疫染色检测鹅肝细胞增殖率 | 第99页 |
| 2.2.6 ELISA法检测与鹅肝细胞增殖相关因子的蛋白含量 | 第99页 |
| 2.2.7 鹅原代肝细胞总RNA分离提取和Real-Time RT-PCR | 第99-100页 |
| 2.2.8 Western blot分析肝细胞CyclinD1和FoxO1的蛋白表达 | 第100页 |
| 2.3 数据统计分析 | 第100页 |
| 3 结果 | 第100-110页 |
| 3.1 维生素PP与PI3K-Akt-mTOR信号通路抑制剂共同处理对鹅肝细胞增殖的影响 | 第100-104页 |
| 3.2 维生素PP和FoxO1干扰质粒共同处理对鹅肝细胞增殖的影响 | 第104-108页 |
| 3.3 维生素PP和胰岛素共同处理对鹅肝细胞增殖的影响 | 第108-110页 |
| 4 讨论 | 第110-112页 |
| 4.1 Sirt1对鹅原代肝细胞增殖的作用 | 第110页 |
| 4.2 PI3K-Akt-mTOR信号通路在Sirt1抑制鹅肝细胞增殖中的作用 | 第110-111页 |
| 4.3 FoxO1在Sirt1抑制鹅肝细胞增殖中的作用 | 第111页 |
| 4.4 胰岛素在Sirt1抑制鹅肝细胞增殖中的作用 | 第111-112页 |
| 4.5 Sirt1在鹅肝细胞增殖及脂肪变性中的作用 | 第112页 |
| 5 小结 | 第112-114页 |
| 第七章 总结 | 第114-117页 |
| 1 本研究的主要结果 | 第114-115页 |
| 1.1 填肥对鹅生长性能及肝细胞增殖的影响 | 第114页 |
| 1.2 胰岛素和葡萄糖对鹅肝细胞增殖的影响 | 第114页 |
| 1.3 FoxO1对鹅肝细胞增殖的影响 | 第114-115页 |
| 1.4 Sirt1对鹅肝细胞增殖的影响 | 第115页 |
| 2 结论 | 第115-116页 |
| 3 创新之处 | 第116-117页 |
| 参考文献 | 第117-133页 |
| 致谢 | 第133-134页 |
| 攻读博士期间发表的论文 | 第134页 |
