中文摘要 | 第12-14页 |
Abstract | 第14-16页 |
缩略语词汇表 | 第17-18页 |
第一章 绪论 | 第18-30页 |
1 水蛭研究概述 | 第18-22页 |
1.1 水蛭生药学特征 | 第18-20页 |
1.2 水蛭的活性成分 | 第20-21页 |
1.3 水蛭的药理活性 | 第21-22页 |
2 动脉粥样硬化研究概述 | 第22-24页 |
2.1 动脉粥样硬化的形成 | 第22-23页 |
2.2 泡沫细胞中的脂质代谢 | 第23-24页 |
3 细胞自噬 | 第24-28页 |
3.1 自噬的概述 | 第24-25页 |
3.2 自噬与动脉粥样硬化 | 第25-28页 |
4 课题研究的内容及意义 | 第28-30页 |
第二章 构建泡沫细胞 | 第30-42页 |
1. 实验材料 | 第30-33页 |
1.1 实验细胞系 | 第30页 |
1.2 实验仪器 | 第30-31页 |
1.3 实验试剂 | 第31页 |
1.4 主要溶液及试剂配方 | 第31-33页 |
2. 实验方法 | 第33-36页 |
2.1 水蛭酶解物的制备 | 第33页 |
2.2 细胞培养 | 第33-34页 |
2.3 诱导巨噬细胞形成泡沫细胞的条件研究 | 第34页 |
2.4 oxLDL对泡沫细胞的氧化损伤作用 | 第34-36页 |
2.5 数据统计分析 | 第36页 |
3. 结果 | 第36-40页 |
3.1. 形态学观察 | 第36-37页 |
3.2 油红0染色结果 | 第37页 |
3.3 细胞内胆固醇及胆固醇酯含量分析 | 第37-38页 |
3.4 JC-1染色检测泡沫细胞的线粒体膜电位 | 第38-39页 |
3.5 Hoechst33342细胞凋亡形态学染色 | 第39页 |
3.6 DNA ladder | 第39-40页 |
4. 讨论 | 第40-41页 |
5. 本节小结 | 第41-42页 |
第三章 水蛭酶解物对泡沫细胞的作用 | 第42-54页 |
1. 实验材料 | 第42-43页 |
1.1 水蛭 | 第42页 |
1.2 实验仪器 | 第42页 |
1.3 实验试剂 | 第42-43页 |
2. 实验方法 | 第43-45页 |
2.1 水蛭酶解物最适给药浓度 | 第43-44页 |
2.2 实验分组 | 第44页 |
2.3 细胞油红0染色 | 第44页 |
2.4 JC-1染色检测泡沫细胞的线粒体膜电位 | 第44-45页 |
2.5 Hoechst33342细胞核形态学染色 | 第45页 |
2.6 DNA ladder | 第45页 |
2.7 数据统计分析 | 第45页 |
3. 结果 | 第45-52页 |
3.1 MTT法检测水蛭酶解物对巨噬细胞的活性影响 | 第45-46页 |
3.2 水蛭酶解物对细胞内胆固醇含量的影响 | 第46-47页 |
3.3. 形态学观察 | 第47-48页 |
3.4 油红0染色结果 | 第48-49页 |
3.5 JC-1染色检测泡沫细胞的线粒体膜电位 | 第49-50页 |
3.6 Hoechst 33342细胞核形态学染色 | 第50-51页 |
3.7 DNA ladder | 第51-52页 |
4. 讨论 | 第52-53页 |
5 小结 | 第53-54页 |
第四章 水蛭酶解物抑制泡沫细胞形成的机制研究 | 第54-74页 |
第一节 水蛭酶解物上调自噬抑制泡沫细胞形成 | 第54-67页 |
1. 实验材料 | 第54-57页 |
1.1 实验仪器 | 第54页 |
1.2 实验试剂 | 第54-55页 |
1.3 主要试剂溶液 | 第55-57页 |
2. 实验方法 | 第57-59页 |
2.1 MDC荧光染色检测自噬囊泡 | 第57-58页 |
2.2 Western blot检测LC3Ⅱ | 第58-59页 |
2.3 胆固醇含量 | 第59页 |
2.4 油红0染色 | 第59页 |
2.5 JC-1测定线粒体膜电位 | 第59页 |
2.6 DNA ladder | 第59页 |
3. 实验结果 | 第59-65页 |
3.1 MDC荧光染色自噬小体 | 第59-60页 |
3.2 Western blot检测LC3Ⅱ | 第60-61页 |
3.3 胆固醇含量 | 第61-62页 |
3.4 油红0染色 | 第62-63页 |
3.5 JC-1测定线粒体膜电位 | 第63-64页 |
3.6 DNA ladder | 第64-65页 |
4. 讨论 | 第65-66页 |
5. 小结 | 第66-67页 |
第二节 水蛭酶解物对泡沫细胞内胆固醇外排的影响 | 第67-74页 |
1. 实验材料 | 第67页 |
1.1 实验仪器 | 第67页 |
1.2 实验试剂 | 第67页 |
2. 主要溶液 | 第67-68页 |
3. 实验方法 | 第68-71页 |
3.1 泡沫细胞的建模 | 第68页 |
3.2 多聚酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR) | 第68-71页 |
3.3 结果分析 | 第71页 |
4. 结果 | 第71-72页 |
水蛭酶解物对泡沫细胞ACAT1、ABCA1和LXR α转录的影响 | 第71-72页 |
5. 讨论及小结 | 第72-74页 |
总结 | 第74-76页 |
参考文献 | 第76-82页 |
致谢 | 第82-83页 |
攻读学位期间发表的论文 | 第83-84页 |
学位论文评阅及答辩情况表 | 第84页 |