中文摘要 | 第2-5页 |
ABSTRACT | 第5-9页 |
中英文缩略语对照表 | 第14-16页 |
引言 | 第16-23页 |
1 研究背景 | 第16-21页 |
2 研究内容及方法 | 第21-22页 |
3 研究路线图 | 第22-23页 |
第一部分 电针对颅脑损伤大鼠行为学及细胞凋亡影响的研究 | 第23-53页 |
1 实验材料 | 第23-25页 |
1.1 实验动物 | 第23页 |
1.2 主要药品及试剂 | 第23-24页 |
1.3 主要仪器 | 第24-25页 |
2 实验方法 | 第25-36页 |
2.1 动物分组及训练 | 第25-26页 |
2.1.1 动物分组 | 第25-26页 |
2.1.2 大鼠行为功能训练及评分 | 第26页 |
2.1.3 模型打击设备 | 第26页 |
2.2 TBI大鼠模型制备过程 | 第26-27页 |
2.3 模型评价 | 第27-29页 |
2.3.1 大鼠生命体征的观察、行为学评价 | 第27-29页 |
2.3.2 TBI大鼠造模及治疗情况评估记录表 | 第29页 |
2.4 针刺治疗方案 | 第29-30页 |
2.5 动物取材 | 第30-31页 |
2.6 血清中NSE含量变化ELISA检测 | 第31-32页 |
2.6.1 血清样本采集方法 | 第31页 |
2.6.2 实验操作步骤 | 第31-32页 |
2.7 病理切片及染色 | 第32-34页 |
2.7.1 切片准备 | 第32页 |
2.7.2 染色 | 第32-34页 |
2.8 细胞凋亡检测 | 第34-35页 |
2.8.1 工作原理 | 第34页 |
2.8.2 主要试剂 | 第34页 |
2.8.3 实验步骤 | 第34-35页 |
2.9 数据统计与图像分析 | 第35-36页 |
3 结果与分析 | 第36-51页 |
3.1 大鼠生命体征情况 | 第36-37页 |
3.1.1 各组动物出血情况 | 第36页 |
3.1.2 造模时大鼠抽搐、术后呼吸情况以及存活情况 | 第36-37页 |
3.2 大鼠行为学评价结果 | 第37-43页 |
3.2.1 大鼠神经功能评价结果 | 第37-38页 |
3.2.2 大鼠平衡功能评价结果 | 第38-39页 |
3.2.3 大鼠行走功能评价结果 | 第39-41页 |
3.2.4 大鼠右侧前肢肢体回缩力测试结果 | 第41-42页 |
3.2.5 大鼠右侧后肢肢体回缩力测试结果 | 第42-43页 |
3.3 光镜检测 | 第43-46页 |
3.4 血清中NSE变化的ELISA检测 | 第46-48页 |
3.4.1 标准曲线制作 | 第46页 |
3.4.2 各组大鼠血清中NSE实际浓度的统计 | 第46-48页 |
3.5 细胞凋亡变化的检测 | 第48-51页 |
3.5.1 细胞凋亡检测图片结果 | 第48-49页 |
3.5.2 细胞凋亡检测平均光密度值统计 | 第49-51页 |
4 小结 | 第51-53页 |
第二部分 电针对颅脑损伤大鼠PI3K/AKT信号转导通路相关蛋白调控的研究 | 第53-112页 |
1 实验材料 | 第53-56页 |
1.1 实验动物 | 第53页 |
1.2 主要试剂 | 第53-55页 |
1.3 主要仪器 | 第55-56页 |
2 实验方法 | 第56-69页 |
2.1 动物分组及训练 | 第56页 |
2.2 TBI大鼠模型制备及评价 | 第56-57页 |
2.3 针刺治疗方案及动物取材 | 第57页 |
2.4 脑组织中蛋白含量变化ELISA检测 | 第57页 |
2.4.1 脑组织样本采集方法 | 第57页 |
2.4.2 实验操作步骤 | 第57页 |
2.5 免疫组化检测 | 第57-58页 |
2.5.1 抗原修复液配制 | 第57页 |
2.5.2 实验步骤 | 第57-58页 |
2.6 免疫荧光检测 | 第58-60页 |
2.6.1 工作液配制 | 第58-59页 |
2.6.2 实验步骤 | 第59-60页 |
2.7 Western-blot检测 | 第60-64页 |
2.7.1 工作液配制 | 第60页 |
2.7.2 脑组织总蛋白的提取 | 第60页 |
2.7.3 Western-blot实验步骤 | 第60-64页 |
2.8 荧光定量PCR检测 | 第64-68页 |
2.8.1 引物设计 | 第64页 |
2.8.2 创伤脑组织中总RNA提取 | 第64-66页 |
2.8.3 RNA检验 | 第66-67页 |
2.8.4 RNA反转录 | 第67页 |
2.8.5 PCR扩增实验 | 第67-68页 |
2.9 图像处理与数据分析 | 第68-69页 |
3 结果与分析 | 第69-111页 |
3.1 颅脑损伤大鼠脑组织中TNF-α 浓度变化的检测 | 第69-81页 |
3.1.1 ELISA检测颅脑损伤大鼠脑组织中TNF-α 浓度变化 | 第69-71页 |
3.1.2 免疫组化法检测颅脑损伤大鼠脑组织中TNF-α 的变化 | 第71-74页 |
3.1.3 免疫荧光检测颅脑损伤大鼠脑组织中TNF-α 的变化 | 第74-77页 |
3.1.4 Western-blot检测颅脑损伤大鼠脑组织中TNF-α 的变化 | 第77-79页 |
3.1.5 荧光定量PCR检测颅脑损伤大鼠脑组织中TNF-α m RNA的变化 | 第79-81页 |
3.2 颅脑损伤大鼠脑组织中AKT变化的检测 | 第81-91页 |
3.2.1 免疫组化法检测颅脑损伤大鼠脑组织中AKT变化的检测 | 第81-84页 |
3.2.2 免疫荧光检测颅脑损伤大鼠脑组织中AKT的变化 | 第84-87页 |
3.2.3 Western-blot检测颅脑损伤大鼠脑组织中AKT的变化 | 第87-89页 |
3.2.4 荧光定量PCR检测颅脑损伤大鼠脑组织中AKT m RNA的变化 | 第89-91页 |
3.3 颅脑损伤大鼠脑组织中Caspase-3 变化的检测 | 第91-101页 |
3.3.1 免疫组化法检测颅脑损伤大鼠脑组织中Caspase-3 的变化 | 第91-94页 |
3.3.2 免疫荧光检测颅脑损伤大鼠脑组织中Caspase-3 的变化 | 第94-97页 |
3.3.3 Western-blot检测颅脑损伤大鼠脑组织中Caspase-3 的变化 | 第97-99页 |
3.3.4 荧光定量PCR检测颅脑损伤大鼠脑组织中Caspase-3 m RNA的变化 | 第99-101页 |
3.4 颅脑损伤大鼠脑组织中ERK变化的检测 | 第101-111页 |
3.4.1 免疫组化法检测颅脑损伤大鼠脑组织中ERK的变化 | 第101-104页 |
3.4.2 免疫荧光检测颅脑损伤大鼠脑组织中ERK的变化 | 第104-107页 |
3.4.3 Western-blot检测颅脑损伤大鼠脑组织中ERK的变化 | 第107-109页 |
3.4.4 荧光定量PCR检测颅脑损伤大鼠脑组织中ERK mRNA的变化 | 第109-111页 |
4 小结 | 第111-112页 |
第三部分 电针对颅脑损伤大鼠调节脑水肿及细胞凋亡相关蛋白的研究 | 第112-147页 |
1 实验材料 | 第112-115页 |
1.1 实验动物 | 第112页 |
1.2 主要试剂 | 第112-114页 |
1.3 主要仪器 | 第114-115页 |
2 实验方法 | 第115-119页 |
2.1 动物分组及训练 | 第115页 |
2.2 TBI大鼠模型制备及评价 | 第115-116页 |
2.3 针刺治疗方案及动物取材 | 第116页 |
2.4 脑组织中蛋白含量变化ELISA检测 | 第116页 |
2.5 免疫组化检测及免疫荧光检测 | 第116页 |
2.6 Western-blot检测 | 第116页 |
2.7 荧光定量PCR检测 | 第116-117页 |
2.8 原位杂交检测 | 第117-118页 |
2.8.1 A20 mRNA序列 | 第117页 |
2.8.2 主要试剂 | 第117页 |
2.8.3 实验步骤 | 第117-118页 |
2.9 图像处理与数据分析 | 第118-119页 |
3.结果与分析 | 第119-146页 |
3.1 颅脑损伤大鼠脑组织中AQP-4 变化的检测 | 第119-126页 |
3.1.1 免疫组化法检测颅脑损伤大鼠脑组织中AQP-4 的变化 | 第119-122页 |
3.1.2 免疫荧光检测颅脑损伤大鼠脑组织中AQP-4 的变化 | 第122-125页 |
3.1.3 荧光定量PCR检测颅脑损伤大鼠脑组织中AQP-4 m RNA的变化 | 第125-126页 |
3.2 颅脑损伤大鼠脑组织中TIMP-1 变化的检测 | 第126-134页 |
3.2.1 ELISA检测颅脑损伤大鼠脑组织中TIMP-1 浓度的变化 | 第126-128页 |
3.2.2 免疫组化法检测颅脑损伤大鼠脑组织中TIMP-1 的变化 | 第128-131页 |
3.2.3 免疫荧光检测颅脑损伤大鼠脑组织中TIMP-1 的变化 | 第131-134页 |
3.3 颅脑损伤大鼠脑组织中MMP-9 变化的检测 | 第134-141页 |
3.3.1 免疫组化法检测颅脑损伤大鼠脑组织中MMP-9 的变化 | 第134-137页 |
3.3.2 Western-blot检测颅脑损伤大鼠脑组织中MMP-9 的变化 | 第137-139页 |
3.3.3 荧光定量PCR检测颅脑损伤大鼠脑组织中MMP-9 m RNA的变化 | 第139-141页 |
3.4 颅脑损伤大鼠脑组织中A20 mRNA变化的检测 | 第141-146页 |
3.4.1 原位杂交检测颅脑损伤大鼠脑组织中A20 mRNA的变化 | 第141-144页 |
3.4.2 荧光定量PCR检测颅脑损伤大鼠脑组织中A20 mRNA的变化 | 第144-146页 |
4 小结 | 第146-147页 |
讨论 | 第147-166页 |
1 中医学对颅脑损伤的认识 | 第147-149页 |
2 针灸对颅脑损伤的治疗 | 第149-151页 |
3 针灸治疗颅脑损伤穴位选择的依据 | 第151-153页 |
4 电针治疗颅脑损伤时间选取的依据 | 第153-154页 |
5 电针对颅脑损伤大鼠行为学及血清中NSE的影响 | 第154-157页 |
5.1 电针对颅脑损伤大鼠行为学的影响 | 第154-155页 |
5.2 电针对颅脑损伤大鼠血清中NSE的影响 | 第155-157页 |
6 电针对颅脑损伤大鼠脑神经细胞凋亡及水肿的调控机制 | 第157-166页 |
6.1 电针对颅脑损伤大鼠脑神经细胞凋亡的调控机制 | 第157-160页 |
6.1.1 PI3K/AKT在颅脑损伤后脑神经细胞凋亡中的作用 | 第157-159页 |
6.1.2 Caspase-3 在颅脑损伤后脑神经细胞凋亡中的作用 | 第159-160页 |
6.2 电针对颅脑损伤大鼠脑神经细胞水肿的调控机制 | 第160-164页 |
6.2.1 PI3K/AKT在颅脑损伤后脑神经细水肿中的作用 | 第160-162页 |
6.2.2 AQP-4 在颅脑损伤后脑神经细水肿中的作用 | 第162-164页 |
6.3 脑水肿与脑神经细胞凋亡之间的关系 | 第164-165页 |
6.4 检测指标之间的关系图 | 第165-166页 |
结论 | 第166-167页 |
特色与创新 | 第167-168页 |
问题与展望 | 第168-169页 |
致谢 | 第169-170页 |
参考文献 | 第170-185页 |
附件材料 | 第185-203页 |
附件 1:综述一 | 第185-192页 |
参考文献 | 第190-192页 |
附件 2:综述二 | 第192-198页 |
参考文献 | 第196-198页 |
附件 3:TBI大鼠造模及治疗情况评估记录表 | 第198-202页 |
附件 4:在读期间公开发表论文论著及所获课题科研成果 | 第202-203页 |