中文摘要 | 第9-11页 |
Abstract | 第11-12页 |
1 前言 | 第13-25页 |
1.1 叶黄素循环 | 第13-19页 |
1.1.1 玉米黄质循环的功能 | 第15-16页 |
1.1.2 黄体素环氧化物循环 | 第16-19页 |
1.1.2.1 黄体素的结构及合成途径 | 第16-17页 |
1.1.2.2 黄体素在PSⅡ光保护中的作用 | 第17-19页 |
1.2 干旱胁迫对植物的影响及植物的响应机制 | 第19-24页 |
1.2.1 干旱胁迫对植物的影响 | 第19-20页 |
1.2.1.1 机械损伤 | 第19-20页 |
1.2.1.2 膜及膜系统受损 | 第20页 |
1.2.1.3 破坏植物正常的代谢过程 | 第20页 |
1.2.2 植物抗干旱胁迫的机制 | 第20-24页 |
1.2.2.1 调整根系结构 | 第20-21页 |
1.2.2.2 叶子特征 | 第21页 |
1.2.2.3 光合作用 | 第21-22页 |
1.2.2.4 渗透调节 | 第22-23页 |
1.2.2.5 抗氧化防御系统 | 第23页 |
1.2.2.6 植物激素 | 第23-24页 |
1.3 本研究的目的与意义 | 第24-25页 |
2 材料与方法 | 第25-41页 |
2.1 实验材料 | 第25-27页 |
2.1.1 植物材料 | 第25页 |
2.1.2 材料的培养和处理 | 第25页 |
2.1.3 菌株与质粒 | 第25-26页 |
2.1.4 生化试剂及各种酶 | 第26页 |
2.1.5 PCR引物 | 第26-27页 |
2.1.6 培养基配方 | 第27页 |
2.2 实验方法 | 第27-41页 |
2.2.1 植物总RNA的提取 | 第27-28页 |
2.2.2 反转录合成cDNA | 第28页 |
2.2.3 SlLUT1基因启动子的克隆 | 第28页 |
2.2.4 目的片段回收 | 第28页 |
2.2.5 克隆载体的构建 | 第28-30页 |
2.2.5.1 目的片段与克隆载体的连接 | 第28-29页 |
2.2.5.2 大肠杆菌感受态的制备 | 第29页 |
2.2.5.3 大肠杆菌转化、筛选与测序 | 第29-30页 |
2.2.5.4 菌落PCR的筛选及鉴定 | 第30页 |
2.2.5.5 大肠杆菌质粒DNA的提取 | 第30页 |
2.2.6 真核表达载体的构建 | 第30-32页 |
2.2.6.1 目的片段与表达载体的连接、转化与筛选 | 第30-31页 |
2.2.6.2 农杆菌感受态细胞的制备 | 第31-32页 |
2.2.6.3 农杆菌转化 | 第32页 |
2.2.7 实时荧光定量PCR | 第32-33页 |
2.2.8 叶绿体结构的亚显微观察 | 第33页 |
2.2.9 转基因植株生理指标的测定 | 第33-40页 |
2.2.9.1 叶黄素循环组分的分析 | 第33页 |
2.2.9.2 烟草种子的萌发率分析 | 第33页 |
2.2.9.3 相对含水量的测定 | 第33-34页 |
2.2.9.4 叶片台盼蓝染色分析 | 第34页 |
2.2.9.5 电解质外渗和膜脂过氧化程度的测定 | 第34页 |
2.2.9.6 游离脯氨酸和可溶性糖含量的测定 | 第34-35页 |
2.2.9.7 H_2O_2和O_2~(·?)的定性与定量分析 | 第35页 |
2.2.9.8 SOD、APX和CAT活性的测定 | 第35页 |
2.2.9.9 净光合速率的测定 | 第35-36页 |
2.2.9.10 叶绿素荧光参数的测定 | 第36页 |
2.2.9.11 叶绿素含量测定 | 第36页 |
2.2.9.12 类囊体膜蛋白的提取 | 第36页 |
2.2.9.13 蓝绿温和胶(BN-PAGE) | 第36-38页 |
2.2.9.14 聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第38-40页 |
2.2.9.15 Westernblot分析 | 第40页 |
2.2.10 数据分析 | 第40-41页 |
3 结果与分析 | 第41-54页 |
3.1 SlLUT1基因启动子元件分析 | 第41页 |
3.2 SlLUT1基因的表达受干旱胁迫诱导 | 第41-43页 |
3.3 过表达SlLUT1基因提高了烟草的抗干旱能力 | 第43-45页 |
3.4 过表达SlLUT1基因保护了干旱胁迫下烟草的叶绿体结构 | 第45-46页 |
3.5 过表达SlLUT1基因提高了干旱胁迫下烟草PSⅡ蛋白复合体的稳定性 | 第46-47页 |
3.6 过表达SlLUT1基因维持了干旱胁迫下烟草光合作用 | 第47-49页 |
3.7 过表达SlLUT1基因降低了干旱胁迫下烟草活性氧的水平 | 第49-51页 |
3.8 过表达SlLUT1基因减轻了干旱胁迫下烟草的膜脂过氧化程度 | 第51-54页 |
4 讨论 | 第54-57页 |
4.1 黄体素在植物体内发挥重要的作用 | 第54-55页 |
4.2 过表达SlLUT1维持了干旱胁迫下烟草的光合能力 | 第55页 |
4.3 过表达SlLUT1降低了干旱胁迫下烟草活性氧的积累 | 第55-57页 |
5 结论 | 第57-58页 |
参考文献 | 第58-67页 |
致谢 | 第67-68页 |
攻读学位期间发表的论文 | 第68页 |