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番茄类胡萝卜素ε-羟化酶基因(SlLUT1)提高植物抗旱性的机制

中文摘要第9-11页
Abstract第11-12页
1 前言第13-25页
    1.1 叶黄素循环第13-19页
        1.1.1 玉米黄质循环的功能第15-16页
        1.1.2 黄体素环氧化物循环第16-19页
            1.1.2.1 黄体素的结构及合成途径第16-17页
            1.1.2.2 黄体素在PSⅡ光保护中的作用第17-19页
    1.2 干旱胁迫对植物的影响及植物的响应机制第19-24页
        1.2.1 干旱胁迫对植物的影响第19-20页
            1.2.1.1 机械损伤第19-20页
            1.2.1.2 膜及膜系统受损第20页
            1.2.1.3 破坏植物正常的代谢过程第20页
        1.2.2 植物抗干旱胁迫的机制第20-24页
            1.2.2.1 调整根系结构第20-21页
            1.2.2.2 叶子特征第21页
            1.2.2.3 光合作用第21-22页
            1.2.2.4 渗透调节第22-23页
            1.2.2.5 抗氧化防御系统第23页
            1.2.2.6 植物激素第23-24页
    1.3 本研究的目的与意义第24-25页
2 材料与方法第25-41页
    2.1 实验材料第25-27页
        2.1.1 植物材料第25页
        2.1.2 材料的培养和处理第25页
        2.1.3 菌株与质粒第25-26页
        2.1.4 生化试剂及各种酶第26页
        2.1.5 PCR引物第26-27页
        2.1.6 培养基配方第27页
    2.2 实验方法第27-41页
        2.2.1 植物总RNA的提取第27-28页
        2.2.2 反转录合成cDNA第28页
        2.2.3 SlLUT1基因启动子的克隆第28页
        2.2.4 目的片段回收第28页
        2.2.5 克隆载体的构建第28-30页
            2.2.5.1 目的片段与克隆载体的连接第28-29页
            2.2.5.2 大肠杆菌感受态的制备第29页
            2.2.5.3 大肠杆菌转化、筛选与测序第29-30页
            2.2.5.4 菌落PCR的筛选及鉴定第30页
            2.2.5.5 大肠杆菌质粒DNA的提取第30页
        2.2.6 真核表达载体的构建第30-32页
            2.2.6.1 目的片段与表达载体的连接、转化与筛选第30-31页
            2.2.6.2 农杆菌感受态细胞的制备第31-32页
            2.2.6.3 农杆菌转化第32页
        2.2.7 实时荧光定量PCR第32-33页
        2.2.8 叶绿体结构的亚显微观察第33页
        2.2.9 转基因植株生理指标的测定第33-40页
            2.2.9.1 叶黄素循环组分的分析第33页
            2.2.9.2 烟草种子的萌发率分析第33页
            2.2.9.3 相对含水量的测定第33-34页
            2.2.9.4 叶片台盼蓝染色分析第34页
            2.2.9.5 电解质外渗和膜脂过氧化程度的测定第34页
            2.2.9.6 游离脯氨酸和可溶性糖含量的测定第34-35页
            2.2.9.7 H_2O_2和O_2~(·?)的定性与定量分析第35页
            2.2.9.8 SOD、APX和CAT活性的测定第35页
            2.2.9.9 净光合速率的测定第35-36页
            2.2.9.10 叶绿素荧光参数的测定第36页
            2.2.9.11 叶绿素含量测定第36页
            2.2.9.12 类囊体膜蛋白的提取第36页
            2.2.9.13 蓝绿温和胶(BN-PAGE)第36-38页
            2.2.9.14 聚丙烯酰胺凝胶电泳第38-40页
            2.2.9.15 Westernblot分析第40页
        2.2.10 数据分析第40-41页
3 结果与分析第41-54页
    3.1 SlLUT1基因启动子元件分析第41页
    3.2 SlLUT1基因的表达受干旱胁迫诱导第41-43页
    3.3 过表达SlLUT1基因提高了烟草的抗干旱能力第43-45页
    3.4 过表达SlLUT1基因保护了干旱胁迫下烟草的叶绿体结构第45-46页
    3.5 过表达SlLUT1基因提高了干旱胁迫下烟草PSⅡ蛋白复合体的稳定性第46-47页
    3.6 过表达SlLUT1基因维持了干旱胁迫下烟草光合作用第47-49页
    3.7 过表达SlLUT1基因降低了干旱胁迫下烟草活性氧的水平第49-51页
    3.8 过表达SlLUT1基因减轻了干旱胁迫下烟草的膜脂过氧化程度第51-54页
4 讨论第54-57页
    4.1 黄体素在植物体内发挥重要的作用第54-55页
    4.2 过表达SlLUT1维持了干旱胁迫下烟草的光合能力第55页
    4.3 过表达SlLUT1降低了干旱胁迫下烟草活性氧的积累第55-57页
5 结论第57-58页
参考文献第58-67页
致谢第67-68页
攻读学位期间发表的论文第68页

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