| 中文摘要 | 第2-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 第1章 前言 | 第9-18页 |
| 1.1 生物固氮 | 第9-12页 |
| 1.1.1 生物固氮的分类 | 第9-12页 |
| 1.1.2 生物固氮的意义 | 第12页 |
| 1.2 快生型大豆根瘤菌 | 第12-14页 |
| 1.3 nodD基因与结瘤因子 | 第14-16页 |
| 1.3.1 nodD基因 | 第14-15页 |
| 1.3.2 结瘤因子 | 第15页 |
| 1.3.3 豆科植物根瘤形成的过程 | 第15-16页 |
| 1.4 本研究的内容及目的 | 第16页 |
| 1.5 本研究的技术路线 | 第16-18页 |
| 第2章 材料与方法 | 第18-42页 |
| 2.1 实验材料 | 第18-19页 |
| 2.1.1 菌株 | 第18页 |
| 2.1.2 质粒载体 | 第18页 |
| 2.1.3 植物材料 | 第18页 |
| 2.1.4 主要仪器设备及试剂 | 第18页 |
| 2.1.5 引物 | 第18-19页 |
| 2.2 实验方法 | 第19-42页 |
| 2.2.1 快生型大豆根瘤菌15067基因组DNA的提取 | 第19-20页 |
| 2.2.2 目的基因nodD的扩增和回收 | 第20-22页 |
| 2.2.3 表达载体的构建 | 第22-38页 |
| 2.2.4 转基因工程菌株的构建 | 第38-40页 |
| 2.2.5 盆栽试验 | 第40页 |
| 2.2.6 质粒的稳定性测定试验 | 第40-42页 |
| 第3章 结果与分析 | 第42-67页 |
| 3.1 快生型大豆根瘤菌15067基因组DNA的提取 | 第42页 |
| 3.2 目的基因nodD的扩增及生物信息学分析 | 第42-44页 |
| 3.2.1 目的基因nodD的扩增 | 第42-43页 |
| 3.2.2 目的基因nodD的生物信息学分析 | 第43-44页 |
| 3.3 表达载体的构建 | 第44-59页 |
| 3.3.1 含有nodD基因和lac启动子的表达载体构建 | 第44-53页 |
| 3.3.2 含有nodD基因和kan基因启动子的表达载体构建 | 第53-59页 |
| 3.4 转基因工程菌菌落发光活性的检测 | 第59-61页 |
| 3.5 盆栽试验结果 | 第61-65页 |
| 3.5.1 SF(pTR-P_(lac)-nodD)和SF(pTR-P_(kan)-nodD)的试验结果 | 第61-63页 |
| 3.5.2 SFH(pTR-P_(lac)-nodD)和SFH(pTR-P_(kan)-nodD)的试验结果 | 第63-65页 |
| 3.6 质粒的稳定性测定结果 | 第65-67页 |
| 3.6.1 自生条件下质粒的稳定性测定 | 第65页 |
| 3.6.2 共生条件下质粒的稳定性测定 | 第65-67页 |
| 第4章 讨论 | 第67-70页 |
| 4.1 载体的选择 | 第67-68页 |
| 4.2 关于三亲本杂交 | 第68页 |
| 4.3 下一步试验计划 | 第68-70页 |
| 4.3.1 基因工程菌株抗病性研究 | 第68-69页 |
| 4.3.2 pTR02载体的改造 | 第69-70页 |
| 第5章 结论 | 第70-72页 |
| 参考文献 | 第72-78页 |
| 附录 | 第78-80页 |
| 致谢 | 第80-82页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第82-83页 |
