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烟草合子及二细胞原胚差减文库的构建和筛选以及相关基因的分析

摘要第5-8页
ABSTRACT第8-10页
缩写符号第11-15页
第一章 前言第15-42页
    1.植物胚胎发生相关研究进展第15-25页
        1.1 胚胎顶-基轴极性的建立第15-18页
        1.2 胚胎辐射轴向的建立及表皮原的形成第18-20页
        1.3 胚根原的特化及初生根根尖分生组织的形成第20-22页
        1.4 初生茎顶端分生组织的形成及子叶的起始第22-25页
    2.植物细胞非对称分裂相关研究进展第25-35页
        2.1 胚根细胞的非对称分裂第26-29页
        2.2 气孔细胞的非对称分裂第29-32页
        2.3 花粉细胞的非对称分裂第32-35页
    3.特定细胞的转录分析研究方法第35-41页
        3.1 特定细胞的分离技术第36-38页
            3.1.1 显微分离第36-37页
            3.1.2 激光显微切割第37页
            3.1.3 荧光激活细胞分选技术第37-38页
        3.2 特定细胞的转录分析技术第38-41页
            3.2.1 cDNA文库的构建第38-39页
            3.2.2 基因芯片第39-40页
            3.2.3 新一代mRNA-Seq技术第40-41页
    4.本研究的目的和意义第41-42页
第二章 烟草合子和非对称及对称二细胞原胚转录本的分析第42-77页
    1.材料和方法第44-49页
        1.1 体内合子和非对称分裂2-细胞原胚的手工分离第44-45页
        1.2 体外培养及对称分裂2-细胞原胚的获得第45页
        1.3 细胞总RNA的分离及cDNA的合成第45页
        1.4 抑制差减cDNA文库的构建第45-46页
        1.5 抑制差减文库的克隆转化第46-47页
        1.6 文库Macroarray点膜制备第47页
        1.7 探针的制备和杂交筛选第47-48页
        1.8 EST序列的生物信息学分析第48页
        1.9 候选基因表达的实时定量PCR验证第48-49页
        1.10 组织和器官中基因表达的定量PCR分析第49页
    2.结果第49-70页
        2.1 合子、非对称及对称2-细胞原胚的分离第49-51页
        2.2 合子和2-细胞原胚抑制差减文库的构建第51-52页
        2.3 合子和2-细胞原胚抑制差减文库的筛选第52-54页
        2.4 合子、非对称及对称2-细胞原胚转录本的差异第54-61页
        2.5 非对称细胞分裂和胚胎发育相关转录本的鉴定第61-64页
        2.6 合子和2-细胞原胚中候选基因的表达第64-68页
        2.7 不同组织和器官中候选基因的表达第68-70页
    3.讨论第70-76页
        3.1 合子体内非对称分裂和体外对称分裂前后基因表达的变化第70-71页
        3.2 体内合子非对称分裂前后差异表达基因的功能分析第71-73页
        3.3 体外合子对称分裂前后差异表达基因的功能分析第73-76页
    4.本章小结第76-77页
第三章 烟草二细胞原胚顶细胞和基细胞转录本的分析第77-102页
    1.材料和方法第79-81页
        1.1 体内2-细胞原胚顶细胞和基细胞的分离第79页
        1.2 抑制差减cDNA文库构建和筛选第79-80页
        1.3 EST序列的生物信息学分析第80页
        1.4 合子、顶细胞和基细胞中基因表达的定量PCR分析第80页
        1.5 组织和器官中基因表达的定量PCR分析第80页
        1.6 整体原位杂交分析第80-81页
    2.结果第81-98页
        2.1 2-细胞原胚顶细胞和基细胞的分离第81-83页
        2.2 2-细胞原胚顶细胞和基细胞抑制差减文库的构建第83-84页
        2.3 2-细胞原胚顶细胞和基细胞抑制差减文库的筛选第84-85页
        2.4 2-细胞原胚顶细胞和基细胞转录本的差异第85-91页
        2.5 合子、顶细胞和基细胞中候选基因的表达第91-94页
        2.6 合子和2-细胞原胚中候选基因的整体原位杂交第94-96页
        2.7 不同组织和器官中候选基因的表达第96-98页
    3.讨论第98-101页
        3.1 2-细胞原胚顶细胞和基细胞的基因表达差异第98-99页
        3.2 胚胎发生和胚后发育过程中候选基因的功能分析第99-101页
    4.本章小结第101-102页
第四章 总讨论第102-107页
    1.合子和早期胚胎顶-基轴极性的建立第102-103页
    2.2-细胞原胚中顶细胞和基细胞的命运抉择第103-104页
    3.合子胚胎发生过程中的信号传导及调控第104-107页
参考文献第107-133页
在读期间发表及投稿论文第133-134页
致谢第134页

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