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抗猪瘟病毒干扰素刺激基因的筛选及GBP1抗病毒分子机制的研究

摘要第6-7页
Abstract第7-8页
英文缩略表第12-14页
第一章 引言第14-28页
    1.1 猪瘟与猪瘟病毒第14-15页
        1.1.1 猪瘟第14页
        1.1.2 猪瘟病毒第14-15页
    1.2 猪瘟病毒的复制周期及感染机制第15-20页
        1.2.1 CSFV复制周期第15-16页
        1.2.2 结构蛋白及非结构蛋白第16-20页
    1.3 干扰素刺激基因(ISGS)及其研究方法第20-24页
        1.3.1 干扰素(IFN)第20-22页
        1.3.2 干扰素刺激基因(ISGs)第22-23页
        1.3.3 ISGs的筛选方法第23页
        1.3.4 ISGs的鉴定筛选方法第23-24页
    1.4 与猪瘟病毒及其它黄病毒科成员相关ISGS的研究进展第24-26页
        1.4.1 粘病毒抗性基因(Mx)第25页
        1.4.2 2’,5’寡腺苷酸合成酶(OAS)第25页
        1.4.3 双链RNA依赖的蛋白质激酶(PKR)第25-26页
        1.4.4 ISG20第26页
        1.4.5 ISG15第26页
    1.5 GBP家族及GBP1第26-27页
    1.6 本研究目的与意义第27-28页
第二章 抗猪瘟病毒干扰素刺激基因的筛选及GBP1抗病毒分子机制的研究第28-57页
    2.1 材料和方法第28-38页
        2.1.1 毒株、细胞和载体第28页
        2.1.2 主要仪器设备第28页
        2.1.3 主要试剂第28-29页
        2.1.4 RNA提取及反转录第29页
        2.1.5 质粒构建和转染第29-30页
        2.1.6 过表达细胞系构建第30-31页
        2.1.7 过表达筛选试验第31页
        2.1.8 抗病毒ISGs的鉴定第31页
        2.1.9 RNA干扰试验第31-32页
        2.1.10 荧光素酶试验第32页
        2.1.11 病毒毒价测定第32页
        2.1.12 荧光定量RT-PCR第32-33页
        2.1.13 Western blotting检测第33页
        2.1.14 细胞活力检测第33页
        2.1.15 动物感染试验第33-34页
        2.1.16 双荧光素酶报告试验第34-35页
        2.1.17 免疫共沉淀试验第35-36页
        2.1.18 GST pulldown试验第36页
        2.1.19 激光共聚焦试验第36-37页
        2.1.20 GTPase酶活力测定第37页
        2.1.21 数据统计学分析第37-38页
    2.2 结果第38-53页
        2.2.1 过表达细胞系的构建及鉴定第38页
        2.2.2 抗CSFV ISGs的筛选结果第38-39页
        2.2.3 抗CSFV ISGs的鉴定第39-41页
        2.2.4 GBP1抑制CSFV复制第41-43页
        2.2.5 CSFV感染后GBP1上调表达第43-44页
        2.2.6 GBP1不激活IFN-β 及NF-κB通路第44-45页
        2.2.7 GBP1的第51位赖氨酸对于其GTPase活性和抑制CSFV复制是必需的第45-47页
        2.2.8 CSFV NS5A蛋白与GBP1相互作用第47-49页
        2.2.9 GBP1的第51位赖氨酸是NS5A与GBP1相互作用的关键位点第49-51页
        2.2.10 NS5A的C端是其与GBP1相互作用的关键区域第51-52页
        2.2.11 NS5A通过抑制GBP1的GTPase活性进而拮抗GBP1的抗病毒功能第52-53页
    2.3 讨论第53-57页
第三章 全文结论第57-58页
参考文献第58-71页
附录第71-76页
致谢第76-78页
作者简历第78页

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