| 摘要 | 第4-8页 |
| ABSTRACT | 第8-11页 |
| 缩略语 | 第19-21页 |
| 第一章 引言 | 第21-39页 |
| 1.1 微囊藻毒素的化学结构、产生和理化性质 | 第21-23页 |
| 1.1.1 微囊藻毒素的化学结构 | 第21-22页 |
| 1.1.2 微囊藻毒素的产生 | 第22-23页 |
| 1.1.3 微囊藻毒素的理化性质 | 第23页 |
| 1.2 我国水体微囊藻毒素污染状况及其检测方法 | 第23-26页 |
| 1.2.1 我国淡水水体微囊藻毒素的污染状况 | 第23-24页 |
| 1.2.2 微囊藻毒素的检测方法 | 第24-26页 |
| 1.3 微囊藻毒素的毒性 | 第26-35页 |
| 1.3.1 微囊藻毒素对植物的影响 | 第26-28页 |
| 1.3.2 微囊藻毒素对动物的危害 | 第28-33页 |
| 1.3.3 微囊藻毒素对人类健康的危害 | 第33-35页 |
| 1.4 微囊藻毒素的毒性机理 | 第35-36页 |
| 1.4.1 抑制PP1和PP2A活性 | 第35页 |
| 1.4.2 氧化应激 | 第35-36页 |
| 1.5 本研究的目的及意义、内容和技术路线 | 第36-39页 |
| 1.5.1 研究目的及意义 | 第36页 |
| 1.5.2 研究内容 | 第36-37页 |
| 1.5.3 技术路线 | 第37-39页 |
| 第二章 MC-LR亚慢性暴露致小鼠肝细胞凋亡 | 第39-59页 |
| 2.1 实验材料 | 第39-41页 |
| 2.1.1 实验动物 | 第39页 |
| 2.1.2 主要试剂及其配制 | 第39-40页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第40-41页 |
| 2.2 实验方法 | 第41-48页 |
| 2.2.1 实验动物饲养 | 第41页 |
| 2.2.2 LD50测定 | 第41页 |
| 2.2.3 MC-LR暴露 | 第41-42页 |
| 2.2.4 血清酶活性测定 | 第42-44页 |
| 2.2.5 组织病理学检测 | 第44-45页 |
| 2.2.6 蛋白浓度测定 | 第45页 |
| 2.2.7 肝组织蛋白样品的制备 | 第45-46页 |
| 2.2.8 SDS-PAGE | 第46-47页 |
| 2.2.9 Western blot | 第47页 |
| 2.2.10 统计分析 | 第47-48页 |
| 2.3 结果 | 第48-56页 |
| 2.3.1 LD50 | 第48页 |
| 2.3.2 MC-LR暴露 28 d对小鼠血清酶活性的影响 | 第48-50页 |
| 2.3.3 小鼠肝脏组织病理学检测结果 | 第50-51页 |
| 2.3.4 MC-LR暴露对小鼠肝脏凋亡相关蛋白Bcl-2 和Bax的影响 | 第51-53页 |
| 2.3.5 MC-LR对小鼠肝脏cytc蛋白的影响 | 第53-54页 |
| 2.3.6 MC-LR对小鼠肝脏caspase 3 和caspase 9 蛋白的影响 | 第54-56页 |
| 2.4 讨论 | 第56-58页 |
| 2.5 小结和结论 | 第58-59页 |
| 第三章 亚慢性MC-LR暴露对小鼠肝脏的氧化损伤及其对Nrf2通路的影响 | 第59-77页 |
| 3.1 实验材料 | 第60页 |
| 3.1.1 实验动物 | 第60页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第60页 |
| 3.1.3 实验仪器 | 第60页 |
| 3.2 实验方法 | 第60-63页 |
| 3.2.1 实验动物饲养 | 第60页 |
| 3.2.2 MC-LR暴露 | 第60页 |
| 3.2.3 ROS活性测定 | 第60-61页 |
| 3.2.4 抗氧化酶活性测定 | 第61-62页 |
| 3.2.5 T-AOC测定 | 第62页 |
| 3.2.6 脂质过氧化检测和样品蛋白浓度测定 | 第62页 |
| 3.2.7 统计分析 | 第62-63页 |
| 3.3 结果 | 第63-72页 |
| 3.3.1 ROS测定 | 第63页 |
| 3.3.2 脂质过氧化测定 | 第63-64页 |
| 3.3.3 抗氧化酶活性 | 第64-66页 |
| 3.3.4 MC-LR对GSH和GST的影响 | 第66-67页 |
| 3.3.5 MC-LR对T-AOC的影响 | 第67-68页 |
| 3.3.6 MC-LR对Nrf2、NQO1、HO-1 和GCLC蛋白的影响 | 第68-72页 |
| 3.4 讨论 | 第72-75页 |
| 3.5 小结和结论 | 第75-77页 |
| 第四章 MC-LR染毒对小鼠肝脏CYP1A1、CYP2E1和CYP3A11基因表达及其酶活性的影响 | 第77-93页 |
| 4.1 实验材料 | 第77-78页 |
| 4.1.1 实验动物 | 第77页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第77-78页 |
| 4.1.3 主要仪器 | 第78页 |
| 4.2 实验方法 | 第78-84页 |
| 4.2.1 实验动物饲养 | 第78页 |
| 4.2.2 MC-LR处理 | 第78-79页 |
| 4.2.3 总RNA的提取 | 第79页 |
| 4.2.4 RNA反转录 | 第79-80页 |
| 4.2.5 实时荧光定量PCR测定 | 第80页 |
| 4.2.6 微粒体制备 | 第80-81页 |
| 4.2.7 CYP酶活性测定 | 第81-83页 |
| 4.2.8 统计分析 | 第83-84页 |
| 4.3 结果 | 第84-90页 |
| 4.3.1 MC-LR对小鼠肝脏CYP1A1 m RNA水平、蛋白含量和酶活性的影响 | 第84-85页 |
| 4.3.2 CYP2E1 | 第85-87页 |
| 4.3.3 CYP3A11 | 第87-88页 |
| 4.3.4 MC-LR对CYP2E1高表达小鼠血清酶ALT和AST酶活性的影响 | 第88-89页 |
| 4.3.5 MC-LR对CYP2E1高表达小鼠ROS的影响 | 第89-90页 |
| 4.4 讨论 | 第90-92页 |
| 4.5 小结和结论 | 第92-93页 |
| 第五章 MC-LR暴露后小鼠肝脏数字基因表达谱分析 | 第93-113页 |
| 5.1 实验材料 | 第93-94页 |
| 5.1.1 实验动物 | 第93页 |
| 5.1.2 主要试剂 | 第93页 |
| 5.1.3 主要仪器 | 第93-94页 |
| 5.2 实验方法 | 第94-98页 |
| 5.2.1 实验动物饲养 | 第94页 |
| 5.2.2 MC-LR处理 | 第94页 |
| 5.2.3 总RNA的提取 | 第94页 |
| 5.2.4 基因数字表达谱检测 | 第94-95页 |
| 5.2.5 信息分析流程 | 第95-97页 |
| 5.2.6 实时荧光定量PCR | 第97-98页 |
| 5.3 结果 | 第98-108页 |
| 5.3.1 测序评估结果 | 第98-101页 |
| 5.3.2 基因覆盖度统计分析 | 第101-102页 |
| 5.3.3 差异基因统计 | 第102页 |
| 5.3.4 GO分析 | 第102-105页 |
| 5.3.5 通路分析 | 第105-108页 |
| 5.4 讨论 | 第108-111页 |
| 5.4.1 TLRs | 第108-109页 |
| 5.4.2 细胞因子 | 第109页 |
| 5.4.3 趋化因子 | 第109页 |
| 5.4.4 其他免疫、炎症相关蛋白 | 第109-110页 |
| 5.4.5 细胞凋亡 | 第110-111页 |
| 5.5 小结和结论 | 第111-113页 |
| 第六章 MC-LR染毒致小鼠肝脏炎症反应及其机理 | 第113-131页 |
| 6.1 实验材料 | 第114页 |
| 6.1.1 实验动物 | 第114页 |
| 6.1.2 主要试剂 | 第114页 |
| 6.1.3 主要仪器 | 第114页 |
| 6.2 实验方法 | 第114-116页 |
| 6.2.1 实验动物饲养 | 第114页 |
| 6.2.2 MC-LR处理 | 第114页 |
| 6.2.3 血清ALT和AST活性测定 | 第114-115页 |
| 6.2.4 ELISA法测定肝组织中细胞因子的含量 | 第115页 |
| 6.2.5 统计分析 | 第115-116页 |
| 6.3 结果 | 第116-127页 |
| 6.3.1 MC-LR暴露对小鼠血清ALT和AST酶活性的影响 | 第116-117页 |
| 6.3.2 MC-LR暴露对小鼠肝脏NF-k B p65和Ik B α含量的影响 | 第117-118页 |
| 6.3.3 MC-LR暴露对小鼠肝脏MIF和CRP含量的影响 | 第118-119页 |
| 6.3.4 MC-LR暴露对小鼠肝脏TNF-α、IL-6 和IL-1β含量的影响 | 第119-120页 |
| 6.3.5 MC-LR暴露对小鼠肝脏IL-8 和IL-18 含量的影响 | 第120-121页 |
| 6.3.6 MC-LR暴露对小鼠肝脏IL-2、IL-4 和IL-10 含量的影响 | 第121-123页 |
| 6.3.7 MC-LR暴露对小鼠肝脏TLRs含量的影响 | 第123-127页 |
| 6.4 讨论 | 第127-130页 |
| 6.5 小结和结论 | 第130-131页 |
| 结论和展望 | 第131-133页 |
| 本研究创新点 | 第133-135页 |
| 参考文献 | 第135-165页 |
| 附录 | 第165-167页 |
| 致谢 | 第167-169页 |
| 攻读学位期间发表的学术成果 | 第169-170页 |
