| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 第一章 引言 | 第13-29页 |
| 1.1 旋毛虫及旋毛虫病概述 | 第13-14页 |
| 1.2 旋毛虫的功能蛋白 | 第14-19页 |
| 1.2.1 排泄分泌产物 | 第14-15页 |
| 1.2.2 尚未揭示功能的蛋白 | 第15-16页 |
| 1.2.3 具有确定功能的旋毛虫的蛋白 | 第16-19页 |
| 1.3 寄生性蠕虫药物靶标研究进展 | 第19-29页 |
| 1.3.1 抗蠕虫药物研发的三个阶段 | 第19-20页 |
| 1.3.2 基于机理的新型抗寄生虫药物研发流程 | 第20-23页 |
| 1.3.3 已经获得成功的基于蛋白靶标筛选的抗寄生虫药物的例子 | 第23页 |
| 1.3.4 体外培养系统和药物筛选 | 第23-27页 |
| 1.3.5 高通量抗蠕虫药物筛选前景和挑战 | 第27-29页 |
| 第二章 旋毛虫正选择基因、旋毛虫与相关物种半胱氨酸蛋白酶差异基因及组织蛋白酶F进化研究 | 第29-45页 |
| 2.1 材料和方法 | 第29-32页 |
| 2.1.1 旋毛虫正选择基因研究材料与方法 | 第29-30页 |
| 2.1.2 旋毛虫与人类宿主及蠕虫半胱氨酸蛋白酶差异基因研究 | 第30-31页 |
| 2.1.3 组织蛋白酶F中的结构组成材料与方法 | 第31页 |
| 2.1.4 蠕虫组织蛋白酶F系统进化分析材料与方法 | 第31-32页 |
| 2.2 结果 | 第32-41页 |
| 2.2.1 旋毛虫正选择基因研究结果 | 第32-34页 |
| 2.2.2 旋毛虫与人类宿主及蠕虫半胱氨酸蛋白酶家族差异基因研究 | 第34-35页 |
| 2.2.3 组织蛋白酶F中的结构组成结果 | 第35-37页 |
| 2.2.4 蠕虫组织蛋白酶F系统进化分析 | 第37-41页 |
| 2.3 讨论 | 第41-45页 |
| 第三章 旋毛虫组织蛋白酶F家族蛋白特征研究 | 第45-76页 |
| 3.1 材料和方法 | 第45-53页 |
| 3.1.1 虫种和抗原 | 第45-46页 |
| 3.1.2 实验动物 | 第46页 |
| 3.1.3 载体与菌株 | 第46页 |
| 3.1.4 主要试剂 | 第46页 |
| 3.1.5 主要软件和仪器 | 第46页 |
| 3.1.6 实验中所使用的引物 | 第46页 |
| 3.1.7 TsCF1、TsCF2和TsCF3表达载体构建 | 第46-50页 |
| 3.1.8 重组蛋白的原核表达以及纯化 | 第50页 |
| 3.1.9 TsCF1、TsCF2和TsCF3的分子对接研究 | 第50页 |
| 3.1.10 兔抗TsCF1、TsCF2和TsCF3重组蛋白高免血清制备和WesternBlotting反应 | 第50-51页 |
| 3.1.11 免疫定位 | 第51-52页 |
| 3.1.12 酶活性实验和抑制实验 | 第52页 |
| 3.1.13 抗体阻断实验 | 第52页 |
| 3.1.14 重组蛋白免疫保护性实验 | 第52-53页 |
| 3.2 结果 | 第53-72页 |
| 3.2.1 旋毛虫TsCF1、TsCF2和TsCF3基因片段扩增 | 第53-54页 |
| 3.2.2 pET30a-TsCF1、pET30a-TsCF2和pET-30a-TsCF3重组表达质粒的鉴定 | 第54-56页 |
| 3.2.3 原核表达产物纯化 | 第56-57页 |
| 3.2.4 TsCF1、TsCF2和TsCF3蛋白分子建模 | 第57-66页 |
| 3.2.5 免疫印迹实验 | 第66-68页 |
| 3.2.6 免疫定位实验 | 第68页 |
| 3.2.7 酶活性实验和抑制实验 | 第68-70页 |
| 3.2.8 抗体阻断实验结果 | 第70-71页 |
| 3.2.9 免疫保护实验 | 第71-72页 |
| 3.3 讨论 | 第72-76页 |
| 第四章 旋毛虫组织蛋白酶F家族与cystatin家族互作及旋毛虫组织蛋白酶F的虚拟筛选 | 第76-109页 |
| 4.1 材料与方法 | 第76-80页 |
| 4.1.1 旋毛虫组织蛋白酶F家族与cystatin家族互作 | 第76-77页 |
| 4.1.2 旋毛虫组织蛋白酶F家族与FDA药物库和天然代谢产物之间虚拟筛选 | 第77-80页 |
| 4.2 结果 | 第80-104页 |
| 4.2.1 旋毛虫组织蛋白酶F家族与cystatin家族互作 | 第80-101页 |
| 4.2.2 旋毛虫组织蛋白酶F家族与FDA药物库和天然代谢物库分子对接和虚拟筛选 | 第101-104页 |
| 4.3 讨论 | 第104-109页 |
| 第五章 组织蛋白酶F实际药物筛选 | 第109-122页 |
| 5.1 材料和方法 | 第109-110页 |
| 5.1.1 实验仪器和样品 | 第109页 |
| 5.1.2 实验方法 | 第109-110页 |
| 5.1.3 芯片准备及SPR实时动力学分析 | 第110页 |
| 5.2 实验数据与结果 | 第110-119页 |
| 5.2.1 阴阳性对照信号图 | 第110-111页 |
| 5.2.2 FDA小分子样品与组织蛋白酶F样品的相互作用 | 第111-112页 |
| 5.2.3 FDA小分子样品与组织蛋白酶F1样品浓度梯度结合情况实例 | 第112-119页 |
| 5.3 讨论 | 第119-122页 |
| 第六章 全文结论 | 第122-123页 |
| 参考文献 | 第123-143页 |
| 附录 | 第143-157页 |
| 致谢 | 第157-158页 |
| 作者简历 | 第158页 |
