| 摘要 | 第6-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 第一章 绪论 | 第16-34页 |
| 1.1 基因治疗与基因转染 | 第16页 |
| 1.2 基因转染过程的多重障碍 | 第16-17页 |
| 1.3 基因转染法 | 第17-22页 |
| 1.3.1 物理法 | 第18页 |
| 1.3.2 病毒包装法 | 第18-19页 |
| 1.3.3 阳离子脂质体法 | 第19-20页 |
| 1.3.4 阳离子聚合物法 | 第20-22页 |
| 1.4 树形高分子基因载体 | 第22-29页 |
| 1.4.1 树形高分子的结构特点 | 第22-23页 |
| 1.4.2 阳离子树形高分子作为基因载体的优势 | 第23-24页 |
| 1.4.3 树形高分子基因载体的现状 | 第24-29页 |
| 1.5 树形高分子作为基因载体存在的问题 | 第29-31页 |
| 1.6 本文的研究思路及创新点 | 第31-34页 |
| 第二章 基于低分子量树形高分子和可逆化学交联方法制备高效、低毒的基因载体 | 第34-52页 |
| 2.1 引言 | 第34-35页 |
| 2.2 实验部分 | 第35-38页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第35页 |
| 2.2.2 纳米聚集体的合成和表征 | 第35-37页 |
| 2.2.3 纳米聚集体DCDs与DNA复合物的形成与表征 | 第37页 |
| 2.2.4 细胞培养和基因转染 | 第37-38页 |
| 2.2.5 细胞摄入和共定位研究 | 第38页 |
| 2.2.6 细胞毒性检测 | 第38页 |
| 2.3 结果与分析 | 第38-50页 |
| 2.3.1 DCDs的合成 | 第39-40页 |
| 2.3.2 纳米聚集体的基因转染效率与细胞毒性探究 | 第40-43页 |
| 2.3.3 转染机制研究 | 第43-50页 |
| 2.4 小结 | 第50-52页 |
| 第三章 氟化修饰策略制备在低氮磷比条件下实现高效基因转染的树形高分子载体 | 第52-70页 |
| 3.1 引言 | 第52-53页 |
| 3.2 实验部分 | 第53-55页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第53页 |
| 3.2.2 氟化修饰的G5 PAMAM树形高分子的合成 | 第53页 |
| 3.2.3 茚三酮法表征材料 | 第53-54页 |
| 3.2.4 体外基因转染与细胞毒性研究 | 第54-55页 |
| 3.2.5 琼脂糖凝胶电泳与ζ电势测定 | 第55页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第55-67页 |
| 3.3.1 氟化修饰树形高分子的合成 | 第55-56页 |
| 3.3.2 氟化修饰提高基因转染效率 | 第56-64页 |
| 3.3.3 氟化修饰的树形高分子的低细胞毒性 | 第64页 |
| 3.3.4 极低氮磷比条件的转染 | 第64-67页 |
| 3.4 本章小结 | 第67-70页 |
| 第四章 基于低分子量树形高分子和氟化修饰方法制备高效、低毒的基因载体 | 第70-86页 |
| 4.1 引言 | 第70-71页 |
| 4.2 实验部分 | 第71-73页 |
| 4.2.1 实验材料 | 第71页 |
| 4.2.2 氟化修饰的PPI树形高分子的合成与表征 | 第71-72页 |
| 4.2.3 氟化修饰的PPI树形高分子与DNA复合物的形成与表征 | 第72页 |
| 4.2.4 氟化修饰的PPI树形高分子的基因转染 | 第72-73页 |
| 4.2.5 细胞毒性研究 | 第73页 |
| 4.2.6 3D多细胞球体的基因转染 | 第73页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第73-84页 |
| 4.3.1 氟化修饰的PPI树形高分子的合成与表征 | 第73-77页 |
| 4.3.2 低氮磷比条件实现高效基因转染 | 第77-82页 |
| 4.3.3 氟化修饰的PPI树形高分子的细胞毒性研究 | 第82-83页 |
| 4.3.4 3D多细胞球体的转染 | 第83-84页 |
| 4.4 本章小结 | 第84-86页 |
| 第五章 基于氟化修饰方法制备高效、低毒的siRNA载体 | 第86-108页 |
| 5.1 引言 | 第86-87页 |
| 5.2 实验部分 | 第87-93页 |
| 5.2.1 实验材料 | 第87-88页 |
| 5.2.2 氟化修饰的树形高分子的合成 | 第88-90页 |
| 5.2.3 产物表征 | 第90页 |
| 5.2.4 siRNAs | 第90-91页 |
| 5.2.5 载体与siRNA复合物的形成与表征 | 第91页 |
| 5.2.6 基因沉默效率 | 第91-92页 |
| 5.2.7 Real-time PCR | 第92页 |
| 5.2.8 细胞毒性研究 | 第92页 |
| 5.2.9 细胞摄入研究 | 第92-93页 |
| 5.3 结果与讨论 | 第93-106页 |
| 5.3.1 氟化修饰的PAMAM树形高分子的合成 | 第93-97页 |
| 5.3.2 基因沉默效率 | 第97-104页 |
| 5.3.3 结构与功能关系探究 | 第104-106页 |
| 5.4 本章小结 | 第106-108页 |
| 第六章 结论与展望 | 第108-110页 |
| 参考文献 | 第110-122页 |
| 附录 | 第122-132页 |
| 致谢 | 第132-134页 |
| 攻读博士学位期间发表的学术论文 | 第134页 |
