摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
第1章 绪论 | 第10-15页 |
1.1 CD81的结构 | 第11-12页 |
1.2 CD81与免疫应答 | 第12-13页 |
1.3 CD81与丙型肝炎 | 第13页 |
1.4 CD81与细胞迁移 | 第13-14页 |
1.5 展望 | 第14-15页 |
第2章 CD81分子系统发育的研究 | 第15-21页 |
2.0 所用到的在线网站和软件 | 第15页 |
2.1 同源序列比对 | 第15-17页 |
2.2 CD81的保守性分析 | 第17-19页 |
2.3 讨论 | 第19-20页 |
2.4 小结 | 第20-21页 |
第3章 日本七鳃鳗CD81表达载体构建与蛋白表达 | 第21-34页 |
3.1 材料与方法 | 第21-29页 |
3.1.1 材料 | 第21页 |
3.1.2 引物设计 | 第21-22页 |
3.1.3 表达载体的改造 | 第22-24页 |
3.1.4 表达载体的构建 | 第24-26页 |
3.1.5 重组蛋白Lja-CD81诱导条件摸索 | 第26-28页 |
3.1.6 可溶Lja-CD81的大量诱导 | 第28-29页 |
3.2 结果 | 第29-31页 |
3.2.1 pCold TF表达载体的改造 | 第29页 |
3.2.2 Lja-CD81表达载体的构建 | 第29-31页 |
3.2.3 Lja-CD81的蛋白表达 | 第31页 |
3.3 讨论 | 第31-32页 |
3.4 小结 | 第32-34页 |
第4章 日本七鳃鳗Lja-CD81的蛋白纯化与抗体检测 | 第34-43页 |
4.1 材料与方法 | 第34-37页 |
4.1.1 材料 | 第34页 |
4.1.2 重组蛋白的纯化 | 第34-36页 |
4.1.3 蛋白酶切 | 第36页 |
4.1.4 Lja-CD81蛋白的二次纯化 | 第36页 |
4.1.5 抗体制备与检测 | 第36-37页 |
4.2 结果 | 第37-41页 |
4.2.1 Lja-CD81蛋白的纯化与检测 | 第37-39页 |
4.2.2 抗原的预测 | 第39-40页 |
4.2.3 抗体的检验 | 第40-41页 |
4.3 讨论 | 第41-42页 |
4.4 小结 | 第42-43页 |
第5章 Lja-CD81蛋白在组织中的表达及相关功能的研究 | 第43-55页 |
5.1 材料与方法 | 第43-46页 |
5.1.1 材料 | 第43页 |
5.1.2 免疫印迹 | 第43-45页 |
5.1.3 免疫荧光 | 第45-46页 |
5.1.4 免疫沉淀 | 第46页 |
5.1.5 流式细胞术 | 第46页 |
5.2 结果 | 第46-52页 |
5.2.1 利用免疫印迹技术检测CD81在日本七鳃鳗各组织中的表达 | 第46-49页 |
5.2.2 利用免疫荧光检测CD81在日本七鳃鳗组织中的定位情况 | 第49-51页 |
5.2.3 利用流式细胞术检测CD81和VLRB的定位 | 第51页 |
5.2.4 利用免疫沉淀检测CD81与日本七鳃鳗免疫相关组织中蛋白的相互作用 | 第51-52页 |
5.3 讨论 | 第52-54页 |
5.4 小结 | 第54-55页 |
结论 | 第55-56页 |
本论文创新点 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-61页 |
附录A 不同物种中的CD81氨基酸序列(FASTA格式) | 第61-64页 |
附录B 不同物种中的CD9氨基酸序列(FASTA格式) | 第64-67页 |
附录C 表达载体pCold TF质粒图谱 | 第67-68页 |
附录D 免疫沉淀结果 | 第68-69页 |
攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第69-70页 |
致谢 | 第70页 |