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拟南芥氧化固醇结合蛋白相关蛋白突变体abr1的表型分析

符号说明第4-8页
中文摘要第8-9页
Abstract第9页
1 前言第11-23页
    1.1 脱落酸第11-15页
        1.1.1 脱落酸第11页
        1.1.2 脱落酸的信号转导过程第11-15页
            1.1.2.1 ABA受体-PYR/PYL/RCAR第11-12页
            1.1.2.2 PYR/PYL/RCAR可以抑制PP2C的活性第12页
            1.1.2.3 PP2C是ABA信号转导的负向调节子第12-13页
            1.1.2.4 SnRK2s是ABA信号的正向调节子第13-14页
            1.1.2.5 SnRK2s激活底物ABA反应基因的表达第14页
            1.1.2.6 ABA信号通路核心途径模型第14-15页
    1.2 ORPs的分类和功能第15-18页
        1.2.1 ORPs蛋白的分类第15-17页
        1.2.2 ORPs蛋白的功能第17-18页
    1.3 G蛋白第18-22页
        1.3.1 G蛋白的组成与分类第18-19页
        1.3.2 G蛋白偶联受体途径第19-20页
        1.3.3 G蛋白的功能第20-22页
            1.3.3.1 G蛋白参与调节种子萌发第20-21页
            1.3.3.2 G蛋白参与调节细胞的分裂第21页
            1.3.3.3 G蛋白参与调节离子通道第21-22页
    1.4 本研究的目的及其意义第22-23页
2 材料与方法第23-36页
    2.1 实验材料第23-27页
        2.1.1 植物材料及生长条件第23页
        2.1.2 菌株与质粒第23页
        2.1.3 酶与各种生化试剂第23-27页
            2.1.3.1 各种酶第23页
            2.1.3.2 各种生化试剂第23-24页
            2.1.3.3 各种缓冲液及培养基配方第24-27页
    2.2 实验方法第27-36页
        2.2.1 构建植物转基因表达载体的一般步骤第27-30页
            2.2.1.1 PCR引物设计第27页
            2.2.1.2 PCR扩增目的片段第27页
            2.2.1.3 目的片段与克隆载体的连接第27-28页
            2.2.1.4 大肠杆菌DH5a感受态细胞的制备第28页
            2.2.1.5 大肠杆菌感受态细胞的转化(热激法)第28页
            2.2.1.6 大肠杆菌的菌落PCR鉴定第28-29页
            2.2.1.7 质粒DNA的提取第29页
            2.2.1.8 质粒DNA的酶切验证第29页
            2.2.1.9 DNA片段的回收(试剂盒法)第29页
            2.2.1.10 目的DNA片段与质粒DNA片段的连接第29-30页
        2.2.2 根癌农杆菌GV3101感受态细胞的制备与转化第30页
            2.2.2.1 根癌农杆菌GV3101感受态细胞的制备第30页
            2.2.2.2 液氮冷冻法转化农杆菌第30页
        2.2.3 拟南芥的栽培与转化第30-31页
            2.2.3.1 拟南芥的栽培第30-31页
            2.2.3.2 拟南芥的转化第31页
        2.2.4 植物总DNA的提取第31页
        2.2.5 转基因拟南芥阳性植株的筛选第31-32页
        2.2.6 植物总RNA的提取第32-33页
        2.2.7 总RNA的反转录及定量分析第33页
        2.2.8 ABR1的组织定位第33页
        2.2.9 GUS染色第33-34页
        2.2.10 ABA的萌发率实验第34页
        2.2.11 酵母双杂交第34-35页
            2.2.11.1 酵母感受态细胞的制备第34页
            2.2.11.2 酵母双杂共转过程第34-35页
        2.2.12 拟南芥杂交第35页
        2.2.13 三引物法鉴定T-DNA插入突变体第35-36页
3 结果与分析第36-45页
    3.1 Abscisic acid resistance 1(abr1)突变体的鉴定与表型分析第36-39页
        3.1.1 abr1突变体的鉴定第36-37页
        3.1.2 abr1突变体表型分析第37-39页
            3.1.2.1 abr1突变体果荚与莲座叶的表型分析第37页
            3.1.2.2 abr1突变体对ABA不敏感第37-39页
    3.2 ABR1的表达模式分析第39-41页
        3.2.1 GUS染色分析ABR1的表达第39-41页
        3.2.2 ABR1的亚细胞定位第41页
    3.3 ABR1过量表达体的表型分析第41-43页
        3.3.1 ABR1过量表达体的表型分析第41-42页
        3.3.2 ABR1过量表达体对ABA的敏感性第42-43页
    3.4 ABR1蛋白与VAP27蛋白的互作研究第43-45页
        3.4.1 ABR1蛋白的结构与分析第43页
        3.4.2 ABR1蛋白可与VAP27蛋白相互作用第43-45页
4 讨论第45-46页
5 结论与展望第46-47页
参考文献第47-54页
致谢第54页

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