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稻曲病菌T-DNA插入突变体B1812、B1241侧翼基因克隆及Uvt-726互作因子的筛选

摘要第7-9页
ABSTRACT第9-10页
文献综述第11-36页
    第一章 水稻稻曲病的研究进展第12-22页
        1 稻曲病的危害第12页
        2 稻曲病菌的分类地位第12-13页
        3 稻曲病菌的生物学特性第13-14页
            3.1 厚垣孢子第13页
            3.2 分生孢子第13-14页
            3.3 子囊孢子第14页
        4 稻曲病菌代谢产物第14-15页
        5 稻曲病菌的分离第15-16页
            5.1 厚垣孢子悬液法第15页
            5.2 组织块分离法第15-16页
            5.3 菌核萌发法第16页
        6 稻曲病菌接种技术第16页
        7 稻曲病菌的侵染机制第16-17页
        8 稻曲病的防治技术第17-18页
        9 稻曲病菌的遗传多样性第18-19页
        10 稻曲病菌致病机制研究进展第19-22页
            10.1 稻曲病菌基因组第19页
            10.2 稻曲病菌的遗传转化及致病相关基因克隆第19-20页
            10.3 稻曲病菌与水稻之间的互作第20-22页
    第二章 酵母双杂交技术研究进展第22-26页
        1 酵母双杂交的原理第22页
        2 基于GAL4的双杂交系统第22-23页
            2.1 酵母宿主菌第22-23页
            2.2 用于检测蛋白相互作用的报告基因第23页
            2.3 用于调控报告基因的启动子第23页
            2.4 次序转化和共转化第23页
        3 基于LexA的双杂交系统第23-24页
        4 酵母双杂交系统存在的问题第24-26页
    第三章 本研究的选题依据及意义第26-28页
    参考文献第28-36页
研究内容第36-94页
    第一章 稻曲病菌T-DNA插入突变体B1812侧翼基因克隆第38-62页
        1 材料与方法第39-51页
            1.1 供试菌株第39页
            1.2 供试水稻第39页
            1.3 主要试剂第39-40页
            1.4 引物序列第40-41页
            1.5 突变菌株B1812生物学特性测定第41页
            1.6 菌株致病力测定第41页
            1.7 突变菌株PCR检测及Southern杂交第41-44页
            1.8 B1812 T-DNA插入位点侧翼序列分析第44-47页
            1.9 侧翼基因全长克隆第47-49页
            1.10 侧翼基因表达量分析第49-51页
        2 结果第51-58页
            2.1 突变菌株B1812的生物学性状和致病力观察第51-53页
            2.2 突变菌株B1812的T-DNA插入稳定性检测及Southern杂交第53页
            2.3 突变体B1812的T-DNA插入位点侧翼序列分析第53-58页
        3 讨论第58-59页
        4 结论第59-60页
        参考文献第60-62页
    第二章 稻曲病菌T-DNA插入突变菌株B1241侧翼基因克隆及GH18互作蛋白的筛选第62-86页
        1 材料与方法第64-73页
            1.1 供试菌株及供试水稻第64页
            1.2 主要试剂第64-65页
            1.3 引物序列第65-66页
            1.4 突变菌株B1241生物学特性测定第66页
            1.5 菌株致病力测定第66页
            1.6 突变菌株PCR检测及Southern杂交第66页
            1.7 B1241 T-DNA插入位点侧翼序列分析第66页
            1.8 侧翼基因全长克隆第66-67页
            1.9 侧翼基因表达量分析第67页
            1.10 重组质粒的构建第67-69页
            1.11 酵母感受态的制备及转化第69-71页
            1.12 诱饵质粒的毒性及自激活检测第71页
            1.13 诱饵菌株与文库菌株杂交第71-72页
            1.14 文库阳性克隆的鉴定第72-73页
        2 结果第73-81页
            2.1 突变菌株B1241侧翼基因克隆第73-79页
            2.2 酵母双杂交互作蛋白结果分析第79-81页
        3 讨论第81-83页
        4 结论第83-84页
        参考文献第84-86页
    第三章 利用酵母双杂交技术筛选Uvt-726的互作蛋白第86-94页
        1 材料与方法第87-88页
            1.1 供试菌株第87页
            1.2 主要试剂第87-88页
            1.3 引物序列第88页
            1.4 重组质粒的构建第88页
            1.5 酵母感受态的制备及转化第88页
            1.6 诱饵质粒的毒性及自激活检测第88页
            1.7 诱饵菌株与文库菌株进行杂交第88页
            1.8 文库阳性克隆的鉴定第88页
        2 结果第88-92页
            2.1 重组质粒的构建第88-89页
            2.2 诱饵蛋白的毒性及自激活检测第89-90页
            2.3 酵母双杂交的筛选结果第90-92页
        3 讨论第92页
        4 结论第92-93页
        参考文献第93-94页
全文总结第94-96页
附录第96-104页
攻读学位期间发表的论文第104-106页
致谢第106页

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