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棕色棉色素相关MYB转录因子基因的克隆及功能研究

摘要第6-8页
abstract第8-9页
英文缩略表第14-15页
第一章 引言第15-20页
    1.1 天然彩色棉的研究进展第15-16页
        1.1.1 色素成分第15页
        1.1.2 类黄酮合成途径第15-16页
    1.2 转录因子与类黄酮的合成第16-18页
    1.3 影响类黄酮合成的外部因素第18页
    1.4 类黄酮与纤维发育第18-19页
    1.5 本研究的目的和意义第19-20页
第二章 棕色棉纤维分化发育规律的研究第20-26页
    2.1 试验材料第20页
    2.2 取样方法第20页
    2.3 试验方法第20-21页
        2.3.1 棉纤维分化观察方法第20页
        2.3.2 棕色棉纤维色素分布观察第20-21页
    2.4 结果与分析第21-24页
        2.4.1 棕色棉纤维分化发育规律第21-22页
        2.4.2 棕色棉纤维色素沉积分布规律第22-24页
    2.5 讨论第24-26页
        2.5.1 棕色棉纤维分化发育规律第24-25页
        2.5.2 棕色棉纤维色素沉积分布规律第25-26页
第三章 棕色棉类黄酮合成途径中结构基因及转录因子的表达分析第26-34页
    3.1 试验材料第26页
    3.2 试验方法第26-27页
        3.2.1 棉花各组织总RNA的提取第26页
        3.2.2 cDNA的合成第26页
        3.2.3 实时荧光定量(Real-time quantitative PCR, qPCR)检测第26-27页
        3.2.4 数据处理第27页
    3.3 结果与分析第27-31页
        3.3.1 类黄酮合成途径中结构基因及相关转录因子在白色棉和棕色棉纤维不同时期中的表达分析第27-31页
        3.3.2 类黄酮合成途径中后期结构基因及相关转录因子在白色棉和棕色棉根茎叶中的表达分析第31页
    3.4 讨论第31-34页
        3.4.1 类黄酮合成途径中结构基因在白色棉和棕色棉纤维不同时期及不同组织中的表达差异第31-32页
        3.4.2 类黄酮合成途径相关转录因子在白色棉和棕色棉纤维不同时期及不同组织中的表达差异第32-34页
第四章 棕色棉中MYB转录因子的克隆及酵母单杂交功能验证第34-54页
    4.1 试验材料第34页
    4.2 试验方法第34-42页
        4.2.1 棉花总RNA的提取及cDNA的合成第34页
        4.2.2 MYB转录因子基因克隆第34-35页
        4.2.3 T载体的连接及转化第35页
        4.2.4 棕色棉类黄酮合成途径中关键酶基因启动子分析第35页
        4.2.5 构建诱饵表达载体第35-38页
        4.2.6 获得含诱饵表达载体pBait-AbAi的酵母菌株第38-39页
        4.2.7 利用AbAr的表达检测诱饵菌株第39-40页
        4.2.8 构建酵母单杂交的猎物表达载体第40-41页
        4.2.9 点对点验证MYB转录因子与类黄酮合成过程中结构基因的互作第41页
        4.2.10 构建亚细胞定位的表达载体第41-42页
        4.2.11 转化农杆菌第42页
        4.2.12 烟草叶片亚细胞定位第42页
    4.3 结果与分析第42-52页
        4.3.1 MYB转录因子基因克隆结果第42-43页
        4.3.2 结构基因GhDFR、GhANS、GhANR和GhUFGT的启动子分析第43-44页
        4.3.3 构建诱饵表达载体(bait)第44-45页
        4.3.4 转化酵母菌株第45-46页
        4.3.5 抑制诱饵酵母菌株生长的最低AbA浓度第46-47页
        4.3.6 酵母单杂交中猎物表达载体(prey)的构建第47-49页
        4.3.7 点对点验证MYB转录因子与类黄酮合成过程中结构基因的互作结果第49-50页
        4.3.8 亚细胞定位表达载体的构建第50页
        4.3.9 转化农杆菌鉴定第50-51页
        4.3.10 烟草叶片亚细胞定位观察第51-52页
    4.4 讨论第52-54页
第五章 MeJA处理下的胚珠离体培养第54-58页
    5.1 试验材料第54页
    5.2 试验方法第54-55页
        5.2.1 胚珠离体培养第54页
        5.2.2 离体培养后纤维RNA提取第54页
        5.2.3 离体培养后纤维cDNA的合成第54页
        5.2.4 实时荧光定量((Real-time quantitative PCR, qPCR)检测第54-55页
        5.2.5 数据处理第55页
    5.3 结果与分析第55-56页
    5.4 讨论第56-58页
第六章 田间喷施MeJA对棕色棉颜色及纤维品质的影响第58-62页
    6.1 试验材料第58页
    6.2 试验方法第58页
        6.2.1 田间喷施MeJA第58页
        6.2.2 分光测色仪测定彩色棉色泽的变化规律第58页
        6.2.3 棕色棉纤维品质第58页
    6.3 数据统计与分析第58页
    6.4 结果与分析第58-61页
        6.4.1 不同浓度MeJA处理时棉纤维色值的变化第58-59页
        6.4.2 不同浓度MeJA处理时棉纤维色差的变化第59-60页
        6.4.3 不同浓度MeJA处理时的棉纤维品质第60-61页
    6.5 讨论第61-62页
第七章 全文结论第62-63页
参考文献第63-69页
致谢第69-70页
作者简历第70页

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