| 摘要 | 第7-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 缩略词表 Abbreviation | 第10-11页 |
| 1 前言 | 第11-23页 |
| 1.1 植物的逆境 | 第11-12页 |
| 1.1.1 植物逆境的分类 | 第11-12页 |
| 1.1.2 逆境对植物的伤害 | 第12页 |
| 1.2 植物对逆境的适应性 | 第12-15页 |
| 1.2.1 植物对逆境信号的传导途径 | 第12-14页 |
| 1.2.2 植物适应逆境的策略 | 第14-15页 |
| 1.3 类受体蛋白激酶基因家族分类和功能鉴定 | 第15-20页 |
| 1.3.1 类受体蛋白激酶基因家族的分类 | 第15-17页 |
| 1.3.2 富含Cys残基类受体蛋白家族基因在植物抗逆性中的作用 | 第17-19页 |
| 1.3.3 富含Leu残基类受体蛋白家族基因在植物抗逆性中的作用 | 第19-20页 |
| 1.4 SNRK蛋白激酶基因在植物抗逆性中的作用 | 第20-21页 |
| 1.5 植物GT家族基因功能的研究 | 第21页 |
| 1.6 本课题研究的意义 | 第21-23页 |
| 2 材料和方法 | 第23-49页 |
| 2.1 实验材料 | 第23-25页 |
| 2.1.1 水稻材料和菌株 | 第23页 |
| 2.1.2 生化试剂与仪器 | 第23-25页 |
| 2.1.3 培养大肠杆菌及农杆菌所用培养基及组培培养基 | 第25页 |
| 2.2 实验方法 | 第25-49页 |
| 2.2.1 水稻幼苗的培养 | 第25页 |
| 2.2.2 水稻幼苗cDNA的合成 | 第25-26页 |
| 2.2.3 CRK10、OSK24、LRK1和GE74E2基因在非生物逆境中的诱导表达 | 第26-28页 |
| 2.2.4 CRK10、OSK24、LRK1和GT74E2基因的克隆 | 第28-32页 |
| 2.2.5 CRK10、OSK24、LRK1和GT74E2基因超表达载体的构建 | 第32-33页 |
| 2.2.6 CRK10、OSK24、LRK1和GT74E2超表达载体转入农杆菌 | 第33-35页 |
| 2.2.7 农杆菌介导的水稻愈伤组织的转化 | 第35-39页 |
| 2.2.8 CRK10基因T-DNA插入突变体的鉴定 | 第39-41页 |
| 2.2.9 超表达转基因植株及T-DNA插入突变体的抗逆性分析 | 第41-42页 |
| 2.2.10 CRK10、OSK24和LRK1基因GST融合表达载体的构建 | 第42-46页 |
| 2.2.11 GST融合蛋白的诱导表达及检测 | 第46-49页 |
| 3 结果与分析 | 第49-72页 |
| 3.1 CRK10、OSK24、LRK1和GT74E2基因的结构分析 | 第49-54页 |
| 3.1.1 基因的基本信息 | 第49页 |
| 3.1.2 蛋白序列的同源性分析 | 第49-53页 |
| 3.1.3 基因的基因组结构分析 | 第53-54页 |
| 3.2 CRK10、OSK24、LRK1和GT74E2基因在非生物逆境下表达 | 第54-57页 |
| 3.2.1 水稻叶片总RNA的提取 | 第54页 |
| 3.2.2 在非生物逆境下基因表达的RT-PCR检测 | 第54-57页 |
| 3.3 CRK10、OSK24、LRK1和GT74E2基因克隆和超表达载体构建 | 第57-59页 |
| 3.3.1 基因克隆到T-载体 | 第57-58页 |
| 3.3.2 基因超表达载体的构建 | 第58-59页 |
| 3.4 CRK10、OSK24、LRK1和GT74E2超表达载体转入农杆菌 | 第59-60页 |
| 3.5 农杆菌介导的水稻愈伤组织的转化 | 第60-63页 |
| 3.5.1 农杆菌介导的水稻愈伤组织的转化 | 第60-61页 |
| 3.5.2 超表达转基因植株的PCR检测 | 第61页 |
| 3.5.3 超表达转基因T_1代植株的初步筛选 | 第61-62页 |
| 3.5.4 超表达转基因植株的表达检测 | 第62页 |
| 3.5.5 超表达转基因T_1代植株的表型观察 | 第62-63页 |
| 3.6 CRK10基因T-DNA插入突变体的鉴定 | 第63-65页 |
| 3.6 1 突变体植株的潮霉素筛选 | 第63页 |
| 3.6.2 突变体植株纯合子的检测 | 第63-64页 |
| 3.6.3 突变体植株纯合子的RT-PCR检测 | 第64页 |
| 3.6.4 突变体植株的表型观察 | 第64-65页 |
| 3.7 超表达转基因植株和T-DNA插入突变体的抗逆性鉴定 | 第65-69页 |
| 3.7.1 CRK10超表达转基因种子及突变体种子萌发对H_20_2的敏感性 | 第65-66页 |
| 3.7.2 CRK10超表达转基因种子及突变体种子发芽对ABA的敏感性 | 第66-67页 |
| 3.7.3 超表达转基因植株和T-DNA插入突变体的抗逆性分析 | 第67-69页 |
| 3.8 CRK10、OSK24和LRK1基因融合蛋白表达载体构建和诱导 | 第69-72页 |
| 3.8.1 基因融合表达载体的构建 | 第69-70页 |
| 3.8.2 GST融合蛋白的诱导表达及检测 | 第70-72页 |
| 4 讨论 | 第72-76页 |
| 4.1 长片段的克隆与质粒转化农杆菌 | 第72-73页 |
| 4.1.1 长片段的克隆 | 第72页 |
| 4.1.2 质粒转化农杆菌 | 第72-73页 |
| 4.2 转基因阳性植株的鉴定 | 第73-74页 |
| 4.2.1 外源基因整合水平的鉴定 | 第73-74页 |
| 4.2.2 外源基因表达水平的鉴定 | 第74页 |
| 4.3 类受体蛋白激酶基因和GT蛋白基因的功能鉴定 | 第74-75页 |
| 4.4 GT74家族成员在植物生长发育巧抗逆性中的功能 | 第75-76页 |
| 参考文献 | 第76-82页 |
| 附录 常用试剂的配方 | 第82-84页 |
| 致谢 | 第84页 |
