摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
英文缩写词表 | 第8-11页 |
文献综述 | 第11-18页 |
1 引言 | 第18-19页 |
2 材料与方法 | 第19-27页 |
2.1 试验材料 | 第19-22页 |
2.1.1 菌株和质粒 | 第19页 |
2.1.2 主要试剂 | 第19-20页 |
2.1.3 主要仪器设备 | 第20页 |
2.1.4 主要试剂的配制 | 第20页 |
2.1.5 Tricine-SDS-PAGE相关溶液的配制 | 第20-21页 |
2.1.6 引物合成 | 第21-22页 |
2.2 试验方法 | 第22-27页 |
2.2.1 鸡AvBD2基因的合成 | 第22-23页 |
2.2.2 融合蛋白的诱导表达 | 第23-24页 |
2.2.3 单表达与串联表达融合蛋白的纯化 | 第24-25页 |
2.2.4 AvBD2融合蛋白浓度的测定 | 第25页 |
2.2.5 纯化后单、串联表达蛋白的Tricine-SDS-PAGE电泳检测 | 第25页 |
2.2.6 纯化后单、串联表达蛋白Western blot检测 | 第25-26页 |
2.2.7 纯化蛋白的MALDI-TOF-MS质谱分析 | 第26页 |
2.2.8 单、串联AvBD2融合蛋白抑菌活性的检测 | 第26-27页 |
3 结果与分析 | 第27-33页 |
3.1 鸡AvBD2表达载体的构建 | 第27页 |
3.1.1 表达载体pET-28a-AvBD2op的构建 | 第27页 |
3.1.2 串联表达载体pET-28a-AvBD2op-AvBD2的构建 | 第27页 |
3.2 串联鸡AvBD2大肠杆菌工程菌株的制备 | 第27-28页 |
3.2.1 单表达载体的转化 | 第27-28页 |
3.2.2 串联表达载体的转化 | 第28页 |
3.3 鸡AvBD2融合蛋白的诱导表达 | 第28-32页 |
3.3.1 AvBD2融合蛋白浓度的测定 | 第29页 |
3.3.2 鸡AvBD2纯化蛋白的Tricine-SDS-PAGE电泳检测 | 第29-30页 |
3.3.3 鸡AvBD2纯化蛋白Western Blot检测 | 第30页 |
3.3.4 鸡AvBD2纯化蛋白的MALDI-TOF-MS质谱鉴定 | 第30-32页 |
3.4 鸡AvBD2融合蛋白抑菌活性的分析 | 第32-33页 |
4 讨论 | 第33-36页 |
4.1 AvBD2串联表达载体的构建 | 第33页 |
4.2 串联表达实现阳离子抗菌肽的外源高效表达 | 第33-34页 |
4.3 密码子优化对AvBD2抗菌活性的影响 | 第34页 |
4.4 AvBD2目的蛋白的纯化和检测 | 第34-36页 |
5 结论 | 第36-37页 |
参考文献 | 第37-41页 |
致谢 | 第41-42页 |
个人简介 | 第42页 |