| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-22页 |
| ·口蹄疫 T 细胞表位研究进展 | 第12-15页 |
| ·口蹄疫病毒结构蛋白 T 细胞表位 | 第13-14页 |
| ·口蹄疫病毒非结构蛋白 T 细胞表位 | 第14-15页 |
| ·FMDV 表位疫苗概述 | 第15页 |
| ·细胞免疫检测方法 | 第15-21页 |
| ·体内功能检测 | 第16页 |
| ·体外表型检测 | 第16-18页 |
| ·体外功能检测 | 第18-21页 |
| ·研究的目的和意义 | 第21-22页 |
| 第二章 FMDV AF/72 株结构蛋白VP1 的扩增测序及T 细胞表位预测 | 第22-30页 |
| ·材料 | 第22-23页 |
| ·毒株 | 第22页 |
| ·主要试剂 | 第22-23页 |
| ·引物设计 | 第23页 |
| ·方法 | 第23-25页 |
| ·病毒 RNA 提取 | 第23页 |
| ·反转录 | 第23页 |
| ·VP1 基因扩增 | 第23-24页 |
| ·目的片段的回收与纯化 | 第24页 |
| ·测序 | 第24页 |
| ·VP1 的结构分析及 T 细胞表位的预测 | 第24-25页 |
| ·结果 | 第25-28页 |
| ·VP1 基因的扩增 | 第25页 |
| ·VP1 基因序列测定及分析 | 第25页 |
| ·VP1 基因结构分析 | 第25-27页 |
| ·VP1 蛋白 T 细胞表位预测 | 第27-28页 |
| ·讨论 | 第28-30页 |
| 第三章 FMDV AF/72 株结构蛋白 VP1 的合成、密码子优化表达及小鼠致敏淋巴细胞的制备 | 第30-40页 |
| ·材料 | 第30-31页 |
| ·实验动物 | 第30页 |
| ·菌种及质粒 | 第30-31页 |
| ·主要试剂及器皿 | 第31页 |
| ·方法 | 第31-33页 |
| ·VP1 基因的密码子优化及合成 | 第31页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第31页 |
| ·重组基因的诱导表达 | 第31-32页 |
| ·表达蛋白的纯化 | 第32页 |
| ·表达蛋白的SDS-PAGE 分析 | 第32页 |
| ·表达蛋白的Western blot 分析 | 第32-33页 |
| ·小鼠免疫 | 第33页 |
| ·致敏淋巴细胞的分离 | 第33页 |
| ·结果 | 第33-38页 |
| ·VP1 的优化及合成 | 第33-34页 |
| ·表达载体的构建与鉴定 | 第34页 |
| ·VP1 基因的表达 | 第34-36页 |
| ·VP1 表达蛋白的 Western blot 鉴定 | 第36页 |
| ·小鼠淋巴细胞的收集、培养及活力测定 | 第36-38页 |
| ·讨论 | 第38-40页 |
| 第四章 FMDV AF/72 株结构蛋白VP1 H-2D 限制性T 细胞表位的鉴定 | 第40-45页 |
| ·材料 | 第40页 |
| ·方法 | 第40-41页 |
| ·T 细胞增殖试验 | 第40-41页 |
| ·INF-γ ELISPOT 试验 | 第41页 |
| ·结果 | 第41-43页 |
| ·淋巴细胞体外增殖实验鉴定 CD8+T 细胞表位 | 第41页 |
| ·INF-γ ELISPOT 实验确认增殖实验的结果 | 第41-43页 |
| ·讨论 | 第43-45页 |
| 第五章 全文结论 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |
| 作者简历 | 第54页 |
