| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-24页 |
| 1.1 橡胶树概论 | 第9-10页 |
| 1.2 植物遗传转化的理论基础 | 第10-11页 |
| 1.3 根癌农杆菌介导的植物遗传转化原理 | 第11-12页 |
| 1.4 根癌农杆菌介导的遗传转化的特点 | 第12页 |
| 1.5 植物体细胞胚的理论研究 | 第12-13页 |
| 1.6 植物体细胞胚的起源与发生途径 | 第13-14页 |
| 1.7 植物体细胞发生的影响因素 | 第14-17页 |
| 1.7.1 激素对体细胞胚发生的影响 | 第14-15页 |
| 1.7.2 植物的基因型对体细胞胚发生的影响 | 第15-16页 |
| 1.7.3 外植体对体细胞胚发生的影响 | 第16页 |
| 1.7.4 其他因素对体细胞胚发生的影响 | 第16-17页 |
| 1.8 体细胞胚发生关键基因的影响 | 第17-19页 |
| 1.9 体细胞胚发生关键基因LEC1的研究进展 | 第19-21页 |
| 1.10 橡胶树体细胞胚发生的研究现状 | 第21-22页 |
| 1.11 本研究的目的和意义 | 第22-23页 |
| 技术路线 | 第23-24页 |
| 第二章 农杆菌介导的橡胶树愈伤组织的遗传转化 | 第24-53页 |
| 2. 材料和方法 | 第24-36页 |
| 2.1 材料 | 第24-27页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第24页 |
| 2.1.2 菌株与质粒 | 第24页 |
| 2.1.3 本实验所用试剂与药品 | 第24页 |
| 2.1.4 植物组织培养条件 | 第24-25页 |
| 2.1.5 植物组织培养过程中所用的培养基 | 第25页 |
| 2.1.6 根癌农杆菌介导的转化橡胶树愈伤组织的研究 | 第25-27页 |
| 2.2 实验方法 | 第27-36页 |
| 2.2.1 橡胶树胚性愈伤组织的继代增殖培养 | 第27页 |
| 2.2.2 根癌农杆菌介导的AtLEC1基因对胚性愈伤组织转化因素的影响 | 第27-29页 |
| 2.2.3 不同浓度的替卡西林和卡那霉素对AtLEC1基因转化胚性愈伤组织的影响 | 第29页 |
| 2.2.4 愈伤组织的抗性筛选 | 第29页 |
| 2.2.5 诱导抗性胚状体和转化植株 | 第29页 |
| 2.2.6 GUS组织化学染色 | 第29-30页 |
| 2.2.7 愈伤组织细胞活性的测定 | 第30页 |
| 2.2.8 试验数据统计与分析 | 第30页 |
| 2.2.9 拟转化植株的抗性愈伤组织的分子检测 | 第30-36页 |
| 3. 结果与分析 | 第36-50页 |
| 3.1 不同浓度抗生素对橡胶树品种热研7-33-97易碎胚性愈伤组织生长的影响 | 第36-38页 |
| 3.1.1 不同浓度的替卡西林对农杆菌的抑制作用及愈伤组织生长的影响 | 第36-37页 |
| 3.1.2 不同浓度的卡那霉素对转化橡胶树胚性愈伤组织的影响 | 第37-38页 |
| 3.2 不同处理对橡胶树橡胶树品种热研7-33-97易碎胚性愈伤组织转化的影响 | 第38-41页 |
| 3.2.1 侵染时间对易碎胚性愈伤组织转化的影响 | 第38页 |
| 3.2.2 菌液浓度对易碎胚性愈伤组织转化的影响 | 第38-39页 |
| 3.2.3 共培养时间对易碎胚性愈伤组织转化的影响 | 第39-40页 |
| 3.2.4 共培养温度对易碎胚性愈伤组织转化的影响 | 第40-41页 |
| 3.2.5 共培养pH对易碎胚性愈伤组织转化的影响 | 第41页 |
| 3.3 橡胶树品种热研7-33-97抗性愈伤组织的培养 | 第41-43页 |
| 3.4 橡胶树品种热研7-33-97抗性愈伤组织诱导体细胞胚发生及植株再生 | 第43-44页 |
| 3.5 AtLEC1基因转化橡胶树愈伤组织诱导抗性胚状体与对照胚状体数目比较 | 第44-45页 |
| 3.6 橡胶树品种热研7-33-97抗性愈伤组织、体细胞胚及转化植株的GUS染色 | 第45-46页 |
| 3.7 橡胶树品种热研7-33-97抗性愈伤组织的分子检测 | 第46-50页 |
| 3.7.1 抗性愈伤组织DNA的提取 | 第46页 |
| 3.7.2 抗性愈伤组织PCR检测 | 第46-47页 |
| 3.7.3 PCR产物回收与测序 | 第47页 |
| 3.7.4 抗性愈伤组织RNA的提取 | 第47-50页 |
| 4. 讨论 | 第50-53页 |
| 4.1 关于遗传转化所用的愈伤组织活性的讨论 | 第50-51页 |
| 4.2 关于遗传转化所用的卡那霉素浓度的讨论 | 第51页 |
| 4.3 关于遗传转化过程侵染时间的讨论 | 第51-52页 |
| 4.4 关于AtLEC1基因的表达的讨论 | 第52-53页 |
| 第三章 结论 | 第53-54页 |
| 附表1 | 第54-55页 |
| 附表2 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-65页 |
| 致谢 | 第65页 |
