| 中文摘要 | 第4-7页 |
| 英文摘要 | 第7-10页 |
| 英文缩写索引 | 第14-17页 |
| 第一章 实验研究 | 第17-68页 |
| 1.1 引言 | 第17-20页 |
| 1.2 实验材料 | 第20-23页 |
| 1.2.1 主要试剂与材料 | 第20页 |
| 1.2.2 主要仪器与设备 | 第20页 |
| 1.2.3 常用液体的配制 | 第20-23页 |
| 1.3 实验方法 | 第23-37页 |
| 1.3.1 小鼠胚胎的制备 | 第23页 |
| 1.3.2 MEF细胞的制备 | 第23页 |
| 1.3.3 MEF细胞的培养、传代 | 第23-24页 |
| 1.3.4 MEF细胞的冻存、复苏 | 第24页 |
| 1.3.5 细胞存活力的测定(MTT法) | 第24-25页 |
| 1.3.6 细胞增殖的测定(BrdU法) | 第25-26页 |
| 1.3.7 细胞划痕实验 | 第26-27页 |
| 1.3.8 细胞迁移实验(Boyden chamber法) | 第27页 |
| 1.3.9 细胞蛋白质的提取 | 第27-28页 |
| 1.3.10 Western blotting | 第28-30页 |
| 1.3.11 MEF细胞内钙离子浓度测定(Fura-2/AM,钙离子荧光探针法) | 第30页 |
| 1.3.12 实时荧光定量PCR | 第30-32页 |
| 1.3.13 小鼠尾中提取DNA | 第32-33页 |
| 1.3.14 DNA溶度的检测及完整性分析 | 第33页 |
| 1.3.15 基因敲除小鼠DNA的基因分型检测(PCR法) | 第33-36页 |
| 1.3.16 实验数据的统计分析 | 第36-37页 |
| 1.4 实验结果 | 第37-60页 |
| 1.4.1 胞外酸性对MEF细胞迁移的影响 | 第37-48页 |
| 1.4.1.1 胞外酸性单独或协同PDGF促进MEF细胞迁移 | 第37-42页 |
| 1.4.1.2 胞外酸性对MEF细胞存活率和增殖的影响 | 第42-44页 |
| 1.4.1.3 胞外酸性通过Gi蛋白偶联受体协同PDGF促进MEF细胞迁移 | 第44-46页 |
| 1.4.1.4 胞外酸性协同PDGF促进MEF细胞迁移通过激活p38MAPK信号通路起作用 | 第46-48页 |
| 1.4.2 胞外酸性对MEF胞内钙离子浓度的影响 | 第48-51页 |
| 1.4.2.1 胞外酸性促进MEF细胞内钙离子浓度的升高 | 第48-49页 |
| 1.4.2.2 胞外酸性通过Gq蛋白偶联受体诱导MEF胞内Ca~(2+)浓度升高 | 第49-50页 |
| 1.4.2.3 Gq/11和TRPV1通道均未参与PDGF诱导的MEF胞内Ca~(2+)浓度升高 | 第50-51页 |
| 1.4.3 MEF细胞应答胞外酸性的质子感知机制 | 第51-58页 |
| 1.4.3.1 质子感知受体在MEF中的表达 | 第51-53页 |
| 1.4.3.2 GPR4、TDAG8、OGR1未参与胞外酸性协同PDGF促进的细胞迁移 | 第53-55页 |
| 1.4.3.3 TRPV1不参与胞外酸性协同PDGF促进的细胞迁移 | 第55-56页 |
| 1.4.3.4 OGR1未参与胞外酸性诱导的MEF细胞胞内Ca~(2+)浓度升高 | 第56-57页 |
| 1.4.3.5 TRPV1通道均未参与胞外酸性诱导的MEF细胞胞内Ca~(2+)浓度升高 | 第57-58页 |
| 1.4.4 实验结果总结 | 第58-60页 |
| 1.5 讨论 | 第60-65页 |
| 1.5.1 胞外酸性通过质子感知受体/Gi/p38MAPK信号通路,单独或协同PDGF促进MEF迁移,而质子感知受体/Gq/钙信号通路不参与此过程 | 第60页 |
| 1.5.2 胞外酸性与PDGF诱导的信号通路通过cross-talk相互作用 | 第60-62页 |
| 1.5.3 胞外酸性可能通过Gq/PLC/IP3信号通路促进[Ca~(2+)_i的升高 | 第62-63页 |
| 1.5.4 其他新的质子感知GPCR存在于MEF细胞中 | 第63-65页 |
| 1.6 结论 | 第65页 |
| 1.7 展望 | 第65-68页 |
| 第二章 文献综述 | 第68-80页 |
| 综述(一) 胞外酸性与肿瘤的浸润转移 | 第68-74页 |
| 综述(二) 细胞迁移的信号传导机制进展 | 第74-80页 |
| 参考文献 | 第80-88页 |
| 致谢 | 第88-89页 |
| 发表文章目录及科研项目 | 第89-90页 |
