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拟南芥葡萄糖信号转导元件AtRGS1和AtHXK1的功能关联性研究

摘要第10-12页
英文摘要第12-13页
1 引言第14-34页
    1.1 葡萄糖在植物体中的生物学重要性第15-21页
        1.1.1 构件分子第15-18页
        1.1.2 能量中枢分子第18-19页
        1.1.3 信号分子第19-21页
    1.2 酵母菌中的葡萄糖信号转导途径第21-24页
        1.2.1 Hxk2/Snf1/Mig1途径第22-23页
        1.2.2 Snf3/Rgt2-Rgt1途径第23页
        1.2.3 cAMP/PKA途径第23页
        1.2.4 酵母菌葡萄糖信号转导途径的整合第23-24页
    1.3 拟南芥中的葡萄糖信号转导途径第24-31页
        1.3.1 依赖AtHXK1的信号转导途径第26-27页
        1.3.2 依赖AtRGS1的G蛋白信号转导途径第27-29页
        1.3.3 依赖糖酵解的SnRK1/TOR信号转导途径第29-31页
        1.3.4 拟南芥葡萄糖信号转导途径的整合第31页
    1.4 研究的目的意义与技术路线第31-34页
        1.4.1 研究目的与意义第31-32页
        1.4.2 技术路线第32-34页
2 材料与方法第34-54页
    2.1 实验材料第34-39页
        2.1.1 植物材料第34页
        2.1.2 质粒载体及菌种第34页
        2.1.3 主要实验试剂和药品第34-35页
        2.1.4 主要仪器第35-36页
        2.1.5 引物序列第36页
        2.1.6 主要试剂第36-38页
        2.1.7 培养基第38-39页
        2.1.8 作图和分析软件第39页
    2.2 实验方法第39-54页
        2.2.1 拟南芥的培养第39页
        2.2.2 突变体基因型分析第39-41页
        2.2.3 突变体转录缺失分析第41-42页
        2.2.4 荧光定量PCR第42-44页
        2.2.5 幼苗对葡萄糖的敏感性分析第44页
        2.2.6 幼苗对盐胁迫的敏感性分析第44-45页
        2.2.7 成株对光的敏感性分析第45页
        2.2.8 蛋白质互作网络分析第45页
        2.2.9 蛋白质功能聚类分析第45-46页
        2.2.10 蛋白质三维结构分析第46页
        2.2.11 双分子荧光互补(BiFC)分析蛋白质相互作用第46-49页
        2.2.12 拟南芥叶肉细胞原生质体瞬时表达第49-51页
        2.2.13 浸花法转化拟南芥第51-52页
        2.2.14 AtRGS1-YFP的细胞内吞定量分析第52-54页
3 结果与分析第54-92页
    3.1 拟南芥AtHXK1缺失突变体的筛选和鉴定第54-55页
    3.2 拟南芥hxk1-3/rgs1-2 双突变体的获得第55-56页
    3.3 HXK1蛋白和RGS1蛋白在幼苗生长发育过程中的功能相关性第56-67页
        3.3.1 高浓度葡萄糖对幼苗生长发育的抑制作用第56-58页
        3.3.2 不同浓度葡萄糖对幼苗根伸长的作用第58-60页
        3.3.3 幼苗叶片的生长发育第60-61页
        3.3.4 葡萄糖在根端分生组织活化中的功能第61-63页
        3.3.5 盐胁迫对幼苗生长发育的抑制作用第63-66页
        3.3.6 幼苗对光强的敏感性分析第66-67页
    3.4 AtRGS1和AtHXK1共同调控一系列葡萄糖应答基因的转录第67-75页
        3.4.1 AtRGS1和AtHXK1共同调控葡萄糖对TBL26基因的诱导第67-69页
        3.4.2 AtRGS1和AtHXK1共同调控TBL26基因表达的模型第69-70页
        3.4.3 AtRGS1和AtHXK1共同调控葡萄糖对CA2和CAB2基因的抑制第70-72页
        3.4.4 AtRGS1和AtHXK1共同调控CA2和CAB2基因表达的模型第72-73页
        3.4.5 AtRGS1和AtHXK1在葡萄糖抑制DIN1基因表达中的功能第73-74页
        3.4.6 AtRGS1和AtHXK1参与葡萄糖抑制DIN1基因表达的模型第74-75页
    3.5 信号通路的上位分析第75-77页
    3.6 生物信息学分析AtHXK1与AtRGS1间的关联性第77-83页
        3.6.1 蛋白互作分析——RHIP1第77-80页
        3.6.2 蛋白互作分析——VHA-B1/B3第80-83页
    3.7 拟南芥RHIP1蛋白的亚细胞定位分析第83-84页
    3.8 拟南芥RHIP1缺失突变体的筛选和鉴定第84-85页
    3.9 拟南芥AtRHIP1超表达体的转化和鉴定第85-86页
    3.10 拟南芥AtRHIP1缺失突变体和超表达体的表型分析第86-92页
        3.10.1 拟南芥AtRHIP1缺失突变体和超表达体的生长发育表型第86-88页
        3.10.2 拟南芥AtRHIP1缺失突变体中葡萄糖应答基因的调控第88-91页
        3.10.3 拟南芥AtRHIP1缺失突变体背景下的AtRGS1信号途径第91-92页
4 讨论第92-98页
    4.1 AtHXK1信号途径的复杂调控机制第92-94页
    4.2 AtRGS1信号途径的复杂调控机制第94-95页
    4.3 AtHXK1信号途径与AtRGS1信号途径之间的关联第95-98页
5 结论第98-100页
致谢第100-102页
参考文献第102-116页
攻读博士学位期间发表的学术论文第116页

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