| 摘要 | 第7-10页 |
| ABSTRACT | 第10-13页 |
| 序言 | 第14-19页 |
| 1 研究背景 | 第14-16页 |
| 1.1 薄荷醇的促透作用研究 | 第14页 |
| 1.2 Caco-2 细胞中P-gp的研究 | 第14-15页 |
| 1.3 P-gp相关信号通路的研究 | 第15-16页 |
| 2 研究的创新点 | 第16-17页 |
| 3 设计思想和研究方案 | 第17-18页 |
| 3.1 设计思想 | 第17页 |
| 3.2 研究方案 | 第17-18页 |
| 4 研究意义 | 第18-19页 |
| 第一章 药物对Caco-2 细胞毒性范围研究 | 第19-25页 |
| 1 实验材料 | 第19-20页 |
| 1.1 主要仪器设备 | 第19页 |
| 1.2 试剂 | 第19页 |
| 1.3 实验细胞 | 第19-20页 |
| 2 实验方法 | 第20-22页 |
| 2.1 药物与试剂配制 | 第20页 |
| 2.2 Caco-2 细胞的培养 | 第20-21页 |
| 2.3 Caco-2 细胞模型的建立 | 第21页 |
| 2.4 采用CCK-8 法测定药物对Caco-2 细胞毒性范围 | 第21-22页 |
| 3 结果 | 第22-23页 |
| 4 讨论 | 第23-25页 |
| 第二章 药物对Caco-2 细胞的时效毒性研究 | 第25-29页 |
| 1 实验材料 | 第25页 |
| 2 实验方法 | 第25页 |
| 2.1 细胞培养 | 第25页 |
| 2.2 Caco-2 细胞分组给药 | 第25页 |
| 3 结果 | 第25-28页 |
| 4 讨论 | 第28-29页 |
| 第三章 薄荷醇对Caco-2 细胞中MDR1基因及P-gp蛋白表达的影响 | 第29-50页 |
| 第一节 薄荷醇对MDR1表达的影响 | 第29-39页 |
| 1 实验材料 | 第29-30页 |
| 1.1 主要仪器设备 | 第29-30页 |
| 1.2 主要试剂 | 第30页 |
| 2 实验方法 | 第30-33页 |
| 2.1 药物与试剂配制 | 第30页 |
| 2.2 细胞培养 | 第30页 |
| 2.3 Caco-2 细胞总RNA的提取 | 第30-31页 |
| 2.4 逆转录实验 | 第31-32页 |
| 2.5 荧光定量PCR反应 | 第32-33页 |
| 3 统计学处理 | 第33页 |
| 4 实验结果 | 第33-37页 |
| 4.1 P-gp及内参引物检测 | 第33页 |
| 4.2 不同时间点薄荷醇对P-gp MDR1表达的影响 | 第33-37页 |
| 5 讨论 | 第37-39页 |
| 第二节 薄荷醇对P-糖蛋白表达的影响 | 第39-50页 |
| 1 实验材料 | 第39-40页 |
| 1.1 主要仪器设备 | 第39页 |
| 1.2 主要试剂 | 第39-40页 |
| 2 实验方法 | 第40-43页 |
| 2.1 药物试剂配制 | 第40页 |
| 2.2 细胞的培养给药 | 第40页 |
| 2.3 细胞总蛋白提取 | 第40-41页 |
| 2.4 BCA蛋白定量 | 第41页 |
| 2.5 目的蛋白western blot正式实验 | 第41-43页 |
| 3 统计学处理 | 第43页 |
| 4 实验结果 | 第43-49页 |
| 4.1 不同时间点薄荷醇对P-gp蛋白表达影响的结果 | 第43-49页 |
| 5 讨论 | 第49-50页 |
| 第四章 薄荷醇对Caco-2 细胞NF-kB信号通路的影响 | 第50-72页 |
| 1 实验材料 | 第50-51页 |
| 1.1 主要仪器设备 | 第50页 |
| 1.2 主要试剂 | 第50-51页 |
| 2 实验方法 | 第51-53页 |
| 2.1 药物试剂配制 | 第51页 |
| 2.2 细胞培养 | 第51页 |
| 2.3 Caco-2 细胞总RNA的提取 | 第51页 |
| 2.4 荧光定量PCR实验 | 第51-52页 |
| 2.5 细胞总蛋白提取 | 第52页 |
| 2.6 细胞质细胞核蛋白的分离提取 | 第52页 |
| 2.7 BCA蛋白定量与Western blot | 第52-53页 |
| 3 统计学处理 | 第53页 |
| 4 实验结果 | 第53-71页 |
| 4.1 IkBa及GAPDH引物检测 | 第53页 |
| 4.2 不同时间点薄荷醇对Ik Ba mRNA表达影响结果 | 第53-57页 |
| 4.3 不同时间点薄荷醇对IкBa蛋白表达影响结果 | 第57-62页 |
| 4.4 不同浓度薄荷醇在不同时间点对NF-kB p65核/浆蛋白表达水平的影响 | 第62-71页 |
| 5 讨论 | 第71-72页 |
| 第五章 总结 | 第72-73页 |
| 参考文献 | 第73-79页 |
| 综述 | 第79-87页 |
| 参考文献 | 第83-87页 |
| 致谢 | 第87页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第87页 |
| 中英文缩略词表 | 第87-88页 |
