摘要 | 第7-9页 |
ABSTRACT | 第9-11页 |
第1章 综述 | 第12-23页 |
1.1 血管平滑肌细胞与心脑血管疾病 | 第12-18页 |
1.1.1 动脉粥样硬化 | 第12-13页 |
1.1.2 血管成形术后再狭窄 | 第13-14页 |
1.1.3 血管平滑肌细胞 | 第14-15页 |
1.1.4 VSMC的表型转换 | 第15页 |
1.1.5 VSMC的增殖 | 第15-16页 |
1.1.6 VSMC的迁移 | 第16-18页 |
1.2 Exo70的研究背景 | 第18-23页 |
1.2.1 Exo70的结构 | 第19-20页 |
1.2.2 Exo70的亚细胞定位以及与细胞骨架蛋白的相互作用 | 第20-21页 |
1.2.3 Exo70在哺乳动物中的功能 | 第21-23页 |
第2章 Exo70在平滑肌细胞A7r5细胞中的表达 | 第23-29页 |
2.1 实验材料 | 第23页 |
2.1.1 实验材料 | 第23页 |
2.1.2 实验仪器及设备 | 第23页 |
2.1.3 实验试剂 | 第23页 |
2.2 实验方法 | 第23-26页 |
2.2.1 A7r5细胞培养 | 第23-25页 |
2.2.2 A7r5 cDNA抽提与检测 | 第25页 |
2.2.3 免疫荧光染色 | 第25-26页 |
2.3 实验结果 | 第26-27页 |
2.3.1 A7r5 cDNA质量鉴定 | 第26页 |
2.3.2 Exo70 PCR检测结果 | 第26-27页 |
2.3.3 在A7r5细胞中Exo70的表达情况 | 第27页 |
2.4 讨论 | 第27-29页 |
第3章 Exo70在A7r5细胞中的亚细胞定位 | 第29-35页 |
3.1 实验材料 | 第29页 |
3.1.1 实验材料 | 第29页 |
3.1.2 实验仪器及设备 | 第29页 |
3.1.3 实验试剂 | 第29页 |
3.2 实验方法 | 第29-30页 |
3.2.1 A7r5细胞培养 | 第29页 |
3.2.2 免疫荧光染色检测Exo70与细胞骨架的共定位 | 第29-30页 |
3.2.3 细胞划伤实验 | 第30页 |
3.3 实验结果 | 第30-33页 |
3.3.1 在A7r5细胞中,Exo70与α-actin的共定位 | 第30-31页 |
3.3.2 在A7r5细胞中,Exo70与Tubulin的定位情况 | 第31-32页 |
3.3.3 细胞松弛素B处理A7r5细胞 | 第32页 |
3.3.4 Exo70在A7r5细胞迁移过程中的定位 | 第32-33页 |
3.4 讨论 | 第33-35页 |
第4章 Exo70在平滑肌细胞A7r5迁移过程中的作用 | 第35-48页 |
4.1 实验材料 | 第35页 |
4.1.1 实验材料 | 第35页 |
4.1.2 实验仪器及设备 | 第35页 |
4.1.3 实验试剂 | 第35页 |
4.2 实验方法 | 第35-44页 |
4.2.1 A7r5细胞培养 | 第35-36页 |
4.2.2 ratExoc7 shRNA筛靶实验 | 第36-38页 |
4.2.3 A7r5-ratExoc7-KD稳定细胞株筛选实验 | 第38-39页 |
4.2.4 Western Blot检测 | 第39-43页 |
4.2.5 细胞划伤实验 | 第43-44页 |
4.3 实验结果 | 第44-46页 |
4.3.1 A7r5细胞干扰前后Exo70在RNA水平上的表达量差异 | 第44页 |
4.3.2 A7r5细胞干扰前后Exo70在蛋白质水平上的表达量差异 | 第44-45页 |
4.3.3 A7r5细胞干扰前后迁移能力检测 | 第45-46页 |
4.4 讨论 | 第46-48页 |
第5章 Exo70在平滑肌细胞系A7r5侵袭过程中的作用 | 第48-52页 |
5.1 实验材料 | 第48页 |
5.1.1 实验材料 | 第48页 |
5.1.2 实验仪器及设备 | 第48页 |
5.1.3 实验试剂 | 第48页 |
5.2 实验方法 | 第48-49页 |
5.2.1 细胞培养 | 第48页 |
5.2.2 侵袭实验 | 第48-49页 |
5.3 实验结果 | 第49-50页 |
5.3.1 A7r5细胞干扰前后侵袭能力检测 | 第49-50页 |
5.3.2 A7r5细胞干扰前后侵袭能力差异分析 | 第50页 |
5.4 讨论 | 第50-52页 |
结论 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-63页 |
附录1 实验仪器及设备 | 第63-64页 |
附录2 实验试剂 | 第64-65页 |
附录3 缩写词 | 第65-66页 |
附录4 引物序列 | 第66-67页 |
致谢 | 第67-68页 |
攻读硕士期间发表的文章 | 第68页 |