摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-9页 |
前言 | 第10-19页 |
第一部分 细粒棘球绦虫候选抗原数据库的建立 | 第19-37页 |
1 材料 | 第19页 |
2 方法 | 第19-21页 |
2.1 囊液蛋白序列的筛选 | 第19-20页 |
2.2 含重复氨基酸序列的蛋白筛选 | 第20页 |
2.3 分泌蛋白组的生物信息学预测和分析 | 第20-21页 |
3 结果 | 第21-34页 |
3.1 细粒棘球蚴囊液蛋白数据库的建立 | 第21页 |
3.2 细粒棘球绦虫包含重复氨基酸序列的蛋白数据库建立 | 第21-34页 |
4 讨论 | 第34-37页 |
第二部分 细粒棘球绦虫候选抗原的高通量克隆表达 | 第37-59页 |
1. 材料 | 第37页 |
2. 试剂与仪器 | 第37-39页 |
3. 方法 | 第39-49页 |
3.1 Trizol法小量提取细粒棘球绦虫TotalRNA | 第39-40页 |
3.2 细粒棘球绦虫原头蚴cDNA的制备 | 第40-41页 |
3.3 载体线性化 | 第41-44页 |
3.4 PCR扩增目的基因 | 第44页 |
3.5 目的基因的In-Fuson克隆 | 第44-46页 |
3.6 抽提质粒 | 第46-47页 |
3.7 重组质粒的高通量表达 | 第47-48页 |
3.8 免疫印迹分析 | 第48-49页 |
3.9 统计分析 | 第49页 |
4 结果 | 第49-57页 |
4.1 细粒棘球绦虫cDNA制备 | 第49-50页 |
4.2 线性载体的制备 | 第50-51页 |
4.3 细粒棘球绦虫基因PCR扩增 | 第51-55页 |
4.4 无缝克隆 | 第55页 |
4.5 免疫印迹(Western blot)分析无细胞表达蛋白 | 第55-57页 |
5 讨论 | 第57-59页 |
第三部分 基于蛋白芯片的细粒棘蚴病诊断抗原筛选及评价 | 第59-74页 |
1 材料 | 第59页 |
2 试剂与仪器 | 第59-60页 |
3 方法 | 第60-62页 |
3.1 细粒棘球蚴重组蛋白芯片的制备及质量评价 | 第60-61页 |
3.2 采用蛋白芯片对细粒棘球蚴病诊断抗原进行高通量筛选与评价 | 第61-62页 |
3.3 数据分析 | 第62页 |
4. 结果 | 第62-72页 |
4.1 细粒棘球蚴重组蛋白芯片的制备及质量评价 | 第62-64页 |
4.2 细粒棘球蚴病诊断抗原高通量筛选与评价结果 | 第64-70页 |
4.3 细粒棘球蚴病术后抗原谱分析 | 第70-72页 |
5. 讨论 | 第72-74页 |
全文总结 | 第74-75页 |
创新性 | 第75-76页 |
参考文献 | 第76-80页 |
致谢 | 第80-81页 |
附录 | 第81-83页 |
附件 | 第83-96页 |