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基于多组学数据鉴定滩羊被毛卷曲形成相关基因及其功能分析

摘要第6-7页
Abstract第7-8页
缩略词语表第13-14页
第一章 文献综述第14-30页
    1.1 引言第14-15页
    1.2 毛用绵羊品种及特性第15页
    1.3 滩羊中毛发卷曲的生长第15-18页
        1.3.1 滩羊的品种特点第15-17页
        1.3.2 滩羊裘皮性状的研究进展第17-18页
    1.4 毛发卷曲性状的研究现状第18-23页
        1.4.1 羊毛弯曲的生物学基础第18-21页
        1.4.2 影响毛发卷曲形成的重要信号通路及其之间的联系第21-23页
    1.5 筛选候选基因的研究方法第23-27页
        1.5.1 抑制性消减杂交技术第23-25页
        1.5.2 全基因组甲基化分析第25-26页
        1.5.3 miRNA-Seq测序技术第26-27页
    1.6 多重组学整合分析第27页
    1.7 研究目的和意义第27-29页
    1.8 技术路线第29-30页
第二章 不同生长时期滩羊皮肤组织抑制性消减杂交分析第30-52页
    2.1 前言第30页
    2.2 材料与方法第30-41页
        2.2.1 实验动物第30页
        2.2.2 主要仪器第30-31页
        2.2.3 总RNA提取第31页
        2.2.4 总RNA的分离第31-32页
        2.2.5 消减文库的构建第32-37页
        2.2.6 消减文库的鉴定第37-38页
        2.2.7 EST测序第38页
        2.2.8 数据预处理第38-39页
        2.2.9 数据的聚类分析第39页
        2.2.10 数据的拼接第39页
        2.2.11 Unigene开放阅读框(ORF)的预测第39页
        2.2.12 基因的特异表达分析第39页
        2.2.13 基因的注释和功能分类第39-40页
        2.2.14 差异基因荧光定量PCR验证第40-41页
    2.3 结果与分析第41-50页
        2.3.1 RNA提取与质量检测第41页
        2.3.2 cDNA的合成及其HaeⅢ酶切结果第41-42页
        2.3.3 抑制消减结果第42页
        2.3.4 克隆的PCR鉴定第42-43页
        2.3.5 序列测定及分析第43-45页
        2.3.6 滩羊两个时期差异表达基因信号通路富集分析第45-49页
        2.3.7 滩羊两个时期差异表达基因荧光定量PCR验证第49-50页
    2.4 讨论第50-51页
        2.4.1 消减杂交技术分析影响滩羊被毛形成的差异表达基因第50-51页
        2.4.2 差异表达基因涉及信号通路分析第51页
    2.5 小结第51-52页
第三章 不同生长时期滩羊皮肤组织全基因组甲基化模式分析第52-66页
    3.1 前言第52页
    3.2 材料与方法第52-56页
        3.2.1 实验动物第52页
        3.2.2 实验仪器与试剂第52-53页
        3.2.3 组织DNA提取与质量检测第53-54页
        3.2.4 DNA样品处理及文库构建第54页
        3.2.5 序列拼接和注释第54页
        3.2.6 全基因组DNA甲基化位点分析第54-55页
        3.2.7 差异甲基化位点(DMS)分析第55页
        3.2.8 差异甲基化区域(DMRs)鉴定和分析第55页
        3.2.9 DMR邻近基因GO和KEGG分析第55页
        3.2.10 差异甲基化水平相关基因的焦磷酸测序第55-56页
    3.3 结果与分析第56-63页
        3.3.1 全基因组重亚硫酸盐测序数据分析第56页
        3.3.2 滩羊DNA甲基化图谱第56-59页
        3.3.3 DNA甲基化位点在各功能区的分布第59页
        3.3.4 滩羊两个时期差异甲基化CG位点鉴定第59-61页
        3.3.5 滩羊两个时期皮肤组织DMR鉴定第61-62页
        3.3.6 DMR邻近基因分析第62页
        3.3.7 DMR邻近基因甲基化水平检验第62-63页
    3.4 讨论第63-65页
        3.4.1 滩羊的甲基化图谱第63-64页
        3.4.2 滩羊两个生长时期中差异甲基化区域分析第64页
        3.4.3 DMRs位于启动子区的相关基因分析第64-65页
    3.5 小结第65-66页
第四章 不同生长时期滩羊皮肤组织miRNA-Seq分析第66-81页
    4.1 前言第66页
    4.2 材料与方法第66-69页
        4.2.1 实验动物第66页
        4.2.2 实验仪器与试剂第66-67页
        4.2.3 miRAN文库构建及测序第67-68页
        4.2.4 miRNA测序原始数据质控第68页
        4.2.5 与参考基因组比对第68页
        4.2.6 差异miRNA筛选第68页
        4.2.7 靶基因预测第68-69页
        4.2.8 miRNA靶基因的KEGG和GO分析第69页
        4.2.9 差异miRNA qRT-PCR验证第69页
        4.2.10 miRNA与消减文库关联分析第69页
    4.3 结果与分析第69-79页
        4.3.1 总RNA质量检测及文库构建第69-70页
        4.3.2 miRNA测序及分析第70-71页
        4.3.3 保守和新miRNA分析第71-72页
        4.3.4 滩羊两组皮肤中差异表达miRNA检测第72-75页
        4.3.5 靶基因预测和信号通路分析第75-77页
        4.3.6 差异表达miRNA q-PCR验证第77页
        4.3.7 整合分析miRNA-seq和SSH第77-79页
    4.4 讨论第79-80页
        4.4.1 差异表达miRNA分析第79页
        4.4.2 联合分析结果第79-80页
    4.5 小结第80-81页
第五章 候选功能基因验证第81-107页
    5.1 前言第81-82页
    5.2 候选基因KRT71的研究第82-93页
        5.2.1 材料与方法第82-88页
        5.2.2 结果与分析第88-92页
        5.2.3 讨论第92-93页
        5.2.4 小结第93页
    5.3 候选基因KRT83的研究第93-107页
        5.3.1 材料与方法第93-98页
        5.3.2 结果与分析第98-105页
        5.3.3 讨论第105-106页
        5.3.4 小结第106-107页
第六章 结论第107-109页
    6.1 主要结论第107-108页
    6.2 创新点第108-109页
参考文献第109-119页
附录第119-130页
致谢第130-131页
个人简历第131-132页

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