| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-11页 |
| 文献综述 | 第11-20页 |
| 第一章 α-甘露糖苷酶的研究进展 | 第11-20页 |
| ·AMA 的分类 | 第11-12页 |
| ·I 类 AMA | 第11页 |
| ·II 类 AMA | 第11-12页 |
| ·未分类 AMA | 第12页 |
| ·AMA 的相关疾病及治疗 | 第12-14页 |
| ·先天性红细胞生成异常性贫血Ⅱ型 | 第12页 |
| ·溶酶体贮积症 | 第12-14页 |
| ·疯草中毒 | 第14页 |
| ·AMA 活性的影响因素 | 第14-16页 |
| ·反应条件对 AMA 活性的影响 | 第14页 |
| ·Zn2+对 AMA 活性的影响 | 第14-15页 |
| ·Cl-对 AMA 活性的影响 | 第15页 |
| ·EDTA 对 AMA 活性的影响 | 第15页 |
| ·其他离子对 AMA 活性的影响 | 第15-16页 |
| ·其他因素对 AMA 活性的影响 | 第16页 |
| ·AMA 克隆、表达概况 | 第16-17页 |
| ·AMA 基因的介绍 | 第16页 |
| ·不同组织中 AMA 的表达水平 | 第16-17页 |
| ·AMA 基因克隆与表达的应用 | 第17页 |
| ·AMA 的结构 | 第17-20页 |
| 试验研究 | 第20-41页 |
| 第二章 山羊溶酶体α-甘露糖苷酶基因的克隆及组织表达谱分析 | 第20-26页 |
| ·材料 | 第20-21页 |
| ·主要仪器 | 第20-21页 |
| ·主要试剂 | 第21页 |
| ·试验动物 | 第21页 |
| ·试验菌株 | 第21页 |
| ·方法 | 第21-22页 |
| ·总 RNA 的提取及逆转录反应（Reverse Transcriptase, RT） | 第21页 |
| ·chLAM 基因的克隆 | 第21-22页 |
| ·荧光定量 RT-PCR（qRT-PCR）检测不同组织 mRNA 表达水平 | 第22页 |
| ·结果 | 第22-24页 |
| ·chLAM 基因序列 | 第22-24页 |
| ·chLAM 基因的组织表达谱分析 | 第24页 |
| ·讨论 | 第24-25页 |
| ·小结 | 第25-26页 |
| 第三章 山羊溶酶体α-甘露糖苷酶的生物信息学分析 | 第26-34页 |
| ·chLAM 基因序列 | 第26页 |
| ·主要软件 | 第26页 |
| ·方法 | 第26页 |
| ·结果 | 第26-32页 |
| ·不同物种 LAM 基因的同源性比较 | 第26-27页 |
| ·chLAM 氨基酸序列的生物信息学分析 | 第27-29页 |
| ·对接分析 | 第29-32页 |
| ·讨论 | 第32-33页 |
| ·AMA 的生物信息学分析 | 第32页 |
| ·对接分析 | 第32-33页 |
| ·小结 | 第33-34页 |
| 第四章 山羊溶酶体 -甘露糖苷酶的酵母表达 | 第34-41页 |
| ·材料 | 第34-35页 |
| ·主要仪器 | 第34页 |
| ·主要试剂 | 第34页 |
| ·试验菌株和载体 | 第34页 |
| ·培养基 | 第34-35页 |
| ·方法 | 第35-38页 |
| ·目的基因的扩增 | 第35页 |
| ·重组克隆质粒的构建及鉴定 | 第35页 |
| ·重组酵母表达质粒的制备及鉴定 | 第35-36页 |
| ·毕赤酵母表达菌的转化 | 第36页 |
| ·重组表达菌株的筛选和鉴定 | 第36-37页 |
| ·重组酵母菌的诱导表达 | 第37页 |
| ·酵母表达产物的鉴定 | 第37页 |
| ·重组 chLAM 蛋白的特性分析 | 第37-38页 |
| ·结果 | 第38-39页 |
| ·重组表达质粒的鉴定 | 第38页 |
| ·重组酵母菌株基因组的 PCR | 第38-39页 |
| ·表达产物的活性检测 | 第39页 |
| ·重组 chLAM 蛋白的特性分析 | 第39页 |
| ·讨论 | 第39-40页 |
| ·小结 | 第40-41页 |
| 结论 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-49页 |
| 致谢 | 第49-50页 |
| 作者简介 | 第50页 |
