摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-23页 |
·蚊子的危害及其治理 | 第11-13页 |
·昆虫对化学杀虫剂的抗性机制 | 第13-15页 |
·表皮穿透性的降低 | 第13页 |
·解毒酶活力的增强 | 第13-14页 |
·神经系统敏感性的下降 | 第14-15页 |
·功能基因研究方法 | 第15-17页 |
·抑制性差减杂交技术 | 第15页 |
·cDNA芯片技术 | 第15页 |
·表达序列标签 | 第15-16页 |
·快速扩增cDNA末端技术 | 第16页 |
·原核表达技术 | 第16-17页 |
·RNA干扰技术 | 第17页 |
·蚊虫杀虫剂抗性基因研究进展 | 第17-21页 |
·细胞色素 P450 家族的研究 | 第17-18页 |
·乙酰胆碱酯酶基因的研究 | 第18-19页 |
·全基因族筛选 | 第19页 |
·胰蛋白酶和糜蛋白酶基因(丝氨酸蛋白酶家族)的研究 | 第19-20页 |
·视蛋白基因的研究 | 第20页 |
·肌球蛋白轻链 2 基因的研究 | 第20-21页 |
·糖原分支酶基因的研究 | 第21页 |
·库蚊核糖体蛋白基因克隆及初步功能的研究 | 第21页 |
·淡色库蚊β肌动蛋白基因克隆与序列分析 | 第21页 |
·本研究的意义 | 第21-23页 |
·淡色库蚊抗氯菊酯的差异基因的 cDNA 全长克隆 | 第22页 |
·抗性基因的原核表达 | 第22页 |
·生物信息学分析 | 第22-23页 |
第二章 淡色库蚊肌动蛋白基因全长 cDNA 的克隆、序列分析及原核表达 | 第23-42页 |
·材料 | 第24-25页 |
·试验蚊 | 第24页 |
·主要试剂 | 第24页 |
·主要仪器设备 | 第24页 |
·引物 | 第24-25页 |
·方法 | 第25-29页 |
·总 RNA的提取 | 第25页 |
·cDNA第一链的合成 | 第25页 |
·PCR反应 | 第25-26页 |
·PCR产物的纯化 | 第26页 |
·PCR产物的 T/A 克隆 | 第26-27页 |
·阳性菌落的鉴定及扩大培养 | 第27页 |
·阳性质粒的鉴定及测序 | 第27页 |
·RACE 3’末端扩增 | 第27-28页 |
·RACE 5’末端扩增 | 第28页 |
·RACE 产物的克隆、鉴定和测序 | 第28页 |
·生物信息学分析 | 第28页 |
·重组载体的构建 | 第28-29页 |
·菌落 PCR、质粒PCR及双酶切鉴定 | 第29页 |
·多试管诱导表达及SDS-PAGE蛋白电泳检测 | 第29页 |
·结果与分析 | 第29-40页 |
·淡色库蚊总RNA的提取及电泳检测 | 第29-30页 |
·淡色库蚊actin基因全长的克隆 | 第30-31页 |
·测序结果与已知致倦库蚊 EST 序列的比对 | 第31页 |
·Actin基因的全长核苷酸序列及编码氨基酸序列 | 第31-33页 |
·淡色库蚊actin基因的生物信息学分析 | 第33-39页 |
·淡色库蚊 actin 基因原核表达 | 第39-40页 |
·讨论 | 第40-42页 |
第三章 淡色库蚊细胞色素P450基因全长cDNA的克隆及生物信息学分析 | 第42-57页 |
·材料 | 第42-43页 |
·试验蚊 | 第42-43页 |
·主要试剂 | 第43页 |
·主要仪器设备 | 第43页 |
·引物 | 第43页 |
·方法 | 第43-44页 |
·总 RNA的提取 | 第43页 |
·cDNA第一链的合成 | 第43页 |
·RACE 3’末端扩增 | 第43-44页 |
·RACE 5’末端扩增 | 第44页 |
·PCR产物的纯化 | 第44页 |
·RACE产物的克隆、鉴定和测序 | 第44页 |
·生物信息学分析 | 第44页 |
·结果与分析 | 第44-55页 |
·淡色库蚊总RNA的提取及电泳检测 | 第44-45页 |
·淡色库蚊CYP450基因全长的克隆 | 第45-46页 |
·测序结果与已知致倦库蚊 EST 序列的比对 | 第46页 |
·CYP450基因的全长核苷酸序列及编码氨基酸序列 | 第46-48页 |
·淡色库蚊 CYP450基因的生物信息学分析 | 第48-55页 |
·讨论 | 第55-57页 |
第四章 结论 | 第57-59页 |
·肌动蛋白基因全长cDNA的获得 | 第57页 |
·细胞色素P450基因全长cDNA的获得 | 第57-59页 |
第五章 展望 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-66页 |
致谢 | 第66-67页 |
作者简介 | 第67页 |