| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-11页 |
| 文献综述 | 第11-24页 |
| 第一章 犬细小病毒研究进展 | 第11-16页 |
| ·犬细小病毒分子生物学特点 | 第11页 |
| ·犬细小病毒的起源与进化 | 第11-12页 |
| ·犬细小病毒的侵入途径 | 第12-13页 |
| ·临床症状和病理变化 | 第13-14页 |
| ·预防 | 第14-15页 |
| ·检测诊断 | 第15-16页 |
| 第二章 IgY 抗体研究进展 | 第16-24页 |
| ·IgY 分子结构与抗体多样性机制 | 第16页 |
| ·IgY 的生物学优势 | 第16-17页 |
| ·IgY 的提取 | 第17-18页 |
| ·IgY 的稳定性保护 | 第18页 |
| ·检测诊断中的应用 | 第18-19页 |
| ·胃肠道疾病防治 | 第19-21页 |
| ·口腔疾病防治 | 第21-22页 |
| ·水产中的应用 | 第22页 |
| ·中毒解救 | 第22-23页 |
| ·生物反恐 | 第23页 |
| ·在蛋白质组学中的应用 | 第23-24页 |
| 试验研究 | 第24-51页 |
| 第三章 犬细小病毒 VP2 蛋白原核表达和纯化 | 第24-45页 |
| ·材料与方法 | 第24-29页 |
| ·病料 | 第24页 |
| ·菌株与载体 | 第24-25页 |
| ·主要仪器 | 第25页 |
| ·试剂配制 | 第25-29页 |
| ·方法 | 第29-35页 |
| ·引物设计与合成 | 第29页 |
| ·VP2 基因的 PCR 扩增 | 第29-30页 |
| ·PCR 产物的回收与纯化 | 第30页 |
| ·回收产物与 pMD18-T-VP2 载体连接与转化 | 第30-31页 |
| ·重组质粒的提取 | 第31页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第31-32页 |
| ·序列分析 | 第32页 |
| ·表达质粒 pET-32a 扩增 | 第32页 |
| ·重组表达质粒 pET-32a-VP2 的构建及鉴定 | 第32页 |
| ·VP2 基因诱导表达时间的确定 | 第32-33页 |
| ·VP2 基因 IPTG 诱导浓度的确定 | 第33页 |
| ·表达蛋白的可溶性分析 | 第33页 |
| ·融合蛋白的 Western blot 分析 | 第33-34页 |
| ·表达蛋白的纯化 | 第34-35页 |
| ·包涵体蛋白复性 | 第35页 |
| ·结果与分析 | 第35-43页 |
| ·VP2 基因的扩增 | 第35页 |
| ·pMD18-T-VP2 酶切鉴定 | 第35-36页 |
| ·序列分析 | 第36-39页 |
| ·重组表达质粒 pET-32a-VP2 的构建及鉴定 | 第39-40页 |
| ·VP2 融合蛋白最佳诱导时间的确定 | 第40-41页 |
| ·VP2 融合蛋白 IPTG 诱导浓度的确定 | 第41页 |
| ·VP2 融合蛋白的可溶性分析及鉴定 | 第41页 |
| ·Western blot 分析 | 第41-43页 |
| ·VP2 融合蛋白的纯化 | 第43页 |
| ·讨论 | 第43-44页 |
| ·小结 | 第44-45页 |
| 第四章 抗 CPV-VP2 蛋白特异性 IgY 抗体的制备 | 第45-51页 |
| ·试剂配制 | 第45-46页 |
| ·实验 | 第46-47页 |
| ·Braford 法测定重组蛋白含量 | 第46页 |
| ·免疫原制备及免疫 | 第46页 |
| ·IgY 抗体提取与鉴定 | 第46-47页 |
| ·IgY 抗体滴度测定 | 第47页 |
| ·IgY 抗体 Western blot 鉴定 | 第47页 |
| ·结果 | 第47-49页 |
| ·重组蛋白含量 | 第47-48页 |
| ·IgY 抗体的提取及鉴定 | 第48页 |
| ·ELISA 滴度测定 | 第48-49页 |
| ·Western blot 鉴定 | 第49页 |
| ·讨论 | 第49-50页 |
| ·小结 | 第50-51页 |
| 结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
| 作者简介 | 第62页 |
