| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 1 引言 | 第11-20页 |
| ·绿脓杆菌外毒素A | 第11-19页 |
| ·绿脓杆菌外毒素A 的分子结构 | 第11-14页 |
| ·PEA 的细胞毒作用方式 | 第14-15页 |
| ·PEA 的应用 | 第15-19页 |
| ·研究的目的与意义 | 第19-20页 |
| 2 实验一 PEA 基因密码子的优化及其在大肠杆菌中的表达 | 第20-44页 |
| ·实验材料 | 第20-24页 |
| ·菌株、载体和细胞 | 第20-21页 |
| ·主要试剂 | 第21页 |
| ·培养基及溶液的配制 | 第21-24页 |
| ·主要仪器 | 第24页 |
| ·实验方法 | 第24-37页 |
| ·野生型PEA 基因的扩增 | 第24-26页 |
| ·原核表达载体pET-20b(+)的制备 | 第26-28页 |
| ·野生型PEA 基因原核表达载体的构建 | 第28-30页 |
| ·PEA基因密码子优化和人工合成 | 第30-31页 |
| ·密码子优化型PEA 基因原核表达载体的构建 | 第31-33页 |
| ·重组PEA 蛋白的表达与鉴定 | 第33-36页 |
| ·重组PEA 蛋白的生物活性鉴定与分析 | 第36-37页 |
| ·结果与分析 | 第37-42页 |
| ·野生型PEA 基因的扩增和原核表达载体的构建 | 第37页 |
| ·PEA基因的密码子优化及其原核表达载体的构建 | 第37-39页 |
| ·PEA 基因的原核分泌表达 | 第39-41页 |
| ·密码子优化对PEA 基因表达水平的影响 | 第41页 |
| ·重组PEA 蛋白生物活性的鉴定与分析 | 第41-42页 |
| ·讨论 | 第42-44页 |
| 3 实验二 PEA 基因突变体的构建及脱毒突变体的筛选 | 第44-53页 |
| ·材料 | 第44页 |
| ·菌株、载体和细胞 | 第44页 |
| ·主要试剂 | 第44页 |
| ·主要仪器 | 第44页 |
| ·实验方法 | 第44-49页 |
| ·PEA 基因不同突变体及其原核表达载体的构建 | 第44-48页 |
| ·低毒突变体的筛选 | 第48-49页 |
| ·实验结果与分析 | 第49-51页 |
| ·PEA 基因不同突变体的构建及原核表达 | 第49-50页 |
| ·低毒突变株的选定与分析 | 第50-51页 |
| ·讨论 | 第51-53页 |
| 4 结论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-58页 |
| 附录 | 第58-70页 |
| 在读期间发表的学术论文 | 第70-71页 |
| 作者简历 | 第71-72页 |
| 致谢 | 第72-73页 |