| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 缩略词表 | 第12-13页 |
| 第一章 前言 | 第13-27页 |
| 1.1 鱼类非特异性免疫 | 第13-15页 |
| 1.1.1 非特异性免疫细胞 | 第13-14页 |
| 1.1.2 非特异性免疫因子 | 第14-15页 |
| 1.2 溶菌酶的研究进展 | 第15-19页 |
| 1.2.1 溶菌酶的发现 | 第15页 |
| 1.2.2 溶菌酶的分类 | 第15-17页 |
| 1.2.3 溶菌酶的结构 | 第17页 |
| 1.2.4 溶菌酶的生物学特性 | 第17-18页 |
| 1.2.5 溶菌酶测定方法 | 第18-19页 |
| 1.3 鱼类溶菌酶研究 | 第19-22页 |
| 1.3.1 鱼类溶菌酶种类分布 | 第19-20页 |
| 1.3.2 鱼类溶菌酶结构特征 | 第20页 |
| 1.3.3 鱼类溶菌酶在组织中的表达及活性 | 第20-21页 |
| 1.3.4 应激条件下鱼类溶菌酶表达变化 | 第21页 |
| 1.3.5 鱼类溶菌酶重组蛋白表达及抗菌谱研究 | 第21-22页 |
| 1.4 溶菌酶的应用 | 第22-25页 |
| 1.4.1 溶菌酶在渔业生产上的应用 | 第22-23页 |
| 1.4.2 溶菌酶在疾病诊疗中的应用 | 第23-24页 |
| 1.4.3 溶菌酶在转基因工程中的应用 | 第24-25页 |
| 1.5 论文的研究背景、目的意义及技术路线 | 第25-27页 |
| 第二章 淇河鲫c型和g型溶菌酶基因克隆 | 第27-50页 |
| 2.1 实验材料 | 第27-28页 |
| 2.1.1 实验用鱼 | 第27页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第27-28页 |
| 2.1.3 主要仪器设备 | 第28页 |
| 2.2 实验方法 | 第28-36页 |
| 2.2.1 引物设计及合成 | 第28-30页 |
| 2.2.2 淇河鲫总RNA的提取 | 第30页 |
| 2.2.3 淇河鲫cDNA第一条链合成及中间片段扩增 | 第30-32页 |
| 2.2.4 淇河鲫c型和g型溶菌酶 3’RACE | 第32-33页 |
| 2.2.5 淇河鲫c型和g型溶菌酶 5’RACE | 第33页 |
| 2.2.6 PCR扩增产物的琼脂糖凝胶回收 | 第33-34页 |
| 2.2.7 胶回收产物与T载体连接 | 第34页 |
| 2.2.8 大肠杆菌DH5α 感受态细胞的转化 | 第34-35页 |
| 2.2.9 阳性克隆的检测 | 第35页 |
| 2.2.10 序列拼接及分析 | 第35-36页 |
| 2.3 实验结果 | 第36-47页 |
| 2.3.1 肝脏总RNA的提取 | 第36页 |
| 2.3.2 淇河鲫c型和g型溶菌酶中间片段克隆 | 第36页 |
| 2.3.3 淇河鲫c型和g型溶菌酶 3’端扩增 | 第36-37页 |
| 2.3.4 淇河鲫c型和g型溶菌酶 5’端扩增 | 第37页 |
| 2.3.5 序列拼接及分析 | 第37-42页 |
| 2.3.6 淇河鲫c型和g型溶菌酶高级结构分析 | 第42-44页 |
| 2.3.7 淇河鲫c型和g型溶菌酶同源性分析及进化树构建 | 第44-47页 |
| 2.4 讨论 | 第47-50页 |
| 第三章 嗜水气单胞菌和脂多糖处理后淇河鲫各组织溶菌酶基因表达量及酶活性变化 | 第50-66页 |
| 3.1 实验材料 | 第50-51页 |
| 3.1.1 实验试剂 | 第50页 |
| 3.1.2 淇河鲫驯养 | 第50页 |
| 3.1.3 嗜水气单胞菌的培养及侵染 | 第50-51页 |
| 3.2 实验方法 | 第51-53页 |
| 3.2.1 淇河鲫不同组织溶菌酶mRNA表达量 | 第51-52页 |
| 3.2.2 淇河鲫不同器官组织溶菌酶活性测定 | 第52-53页 |
| 3.2.3 嗜水气单胞菌和LPS处理后溶菌酶基因表达的测定 | 第53页 |
| 3.2.4 嗜水气单胞菌和LPS处理后溶菌酶活性的测定 | 第53页 |
| 3.3 实验结果 | 第53-62页 |
| 3.3.1 淇河鲫c型和g型溶菌酶在不同器官组织中的表达 | 第53-55页 |
| 3.3.2 淇河鲫不同器官组织溶菌酶活性 | 第55页 |
| 3.3.3 嗜水气单胞菌和LPS处理后c型和g型溶菌酶的表达变化 | 第55-59页 |
| 3.3.4 嗜水气单胞菌和LPS处理后溶菌酶活性变化 | 第59-62页 |
| 3.4 讨论 | 第62-66页 |
| 第四章 结论 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-75页 |
| 附录 | 第75-78页 |
| 致谢 | 第78-79页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第79-80页 |
