摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
第1章 绪论 | 第13-29页 |
1.1 引言 | 第13页 |
1.2 过渡金属配合物的概述 | 第13-15页 |
1.2.1 铂族元素 | 第13页 |
1.2.2 铂类配合物 | 第13-14页 |
1.2.3 钌配合物 | 第14-15页 |
1.3 金属配合物与DNA作用的基本形式 | 第15-17页 |
1.3.1 共价结合 | 第15-16页 |
1.3.2 非共价结合 | 第16-17页 |
1.4 细胞成像 | 第17-18页 |
1.5 肿瘤的治疗与细胞凋亡 | 第18-20页 |
1.5.1 肿瘤的治疗 | 第18页 |
1.5.2 细胞凋亡的概念 | 第18页 |
1.5.3 细胞凋亡的形态学特征 | 第18-19页 |
1.5.4 细胞凋亡途径 | 第19-20页 |
1.6 以DNA为作用靶点的研究方法 | 第20-21页 |
1.6.1 紫外吸收光谱法 | 第20页 |
1.6.2 荧光发射光谱 | 第20-21页 |
1.6.3 琼脂糖凝胶电泳 | 第21页 |
1.7 以肿瘤细胞为研究对象的研究方法 | 第21-23页 |
1.7.1 MTT比色法 | 第21-22页 |
1.7.2 苏木素&伊红染色法(H&E)观察细胞形态 | 第22页 |
1.7.3 细胞划痕迁移实验 | 第22页 |
1.7.4 流式细胞仪检测细胞凋亡 | 第22页 |
1.7.5 Hoechst 33258 核酸染料检测细胞凋亡形态学 | 第22-23页 |
1.7.6 蛋白免疫印迹法(Western Blotting) | 第23页 |
1.8 钌配合物的荧光成像及抗肿瘤活性的国内外研究进展 | 第23-27页 |
1.8.1 以DNA作为抗肿瘤药物的研究靶点的国内外研究进展 | 第23-25页 |
1.8.2 以肿瘤细胞作为抗肿瘤药物的研究对象的国内外研究进展 | 第25-27页 |
1.9 研究内容和创新点 | 第27-29页 |
第2章 新型钌配合物的合成及实验方法 | 第29-47页 |
2.1 引言 | 第29页 |
2.2 钌配合物的合成与表征 | 第29-34页 |
2.2.1 实验试剂与仪器 | 第30-31页 |
2.2.2 配体及配合物的合成 | 第31-34页 |
2.3 钌配合物与DNA相互作用研究的实验方法 | 第34-39页 |
2.3.1 实验试剂与仪器 | 第34-36页 |
2.3.2 紫外吸收光谱滴定 | 第36页 |
2.3.3 稳态荧光光谱滴定 | 第36页 |
2.3.4 琼脂糖凝胶电泳实验 | 第36-39页 |
2.4 钌配合物以肿瘤细胞为作用研究靶点的实验方法 | 第39-46页 |
2.4.1 实验试剂与仪器 | 第39-43页 |
2.4.2 细胞的培养、传代、冻存和复苏 | 第43-44页 |
2.4.3 细胞毒性MTT法 | 第44页 |
2.4.4 H&E染色法观察细胞形态 | 第44页 |
2.4.5 细胞划痕迁移实验 | 第44-45页 |
2.4.6 Annexin V-FITC/PI法检测细胞凋亡 | 第45页 |
2.4.7 Hoechst 33258 染色检测细胞凋亡 | 第45页 |
2.4.8 Western blot法检测凋亡相关基因蛋白表达 | 第45-46页 |
2.5 小结 | 第46-47页 |
第3章 含双-Br取代基的钌配合物的抗肿瘤活性研究 | 第47-56页 |
3.1 引言 | 第47-48页 |
3.2 [Ru(phen)_2ODBIP]~(2+)与两种序列G4-DNA相互作用的光谱性质研究 | 第48-49页 |
3.2.1 [Ru(phen)_2ODBIP]~(2+)与两种序列G4-DNA相互作用的紫外光谱研究 | 第48-49页 |
3.2.2 [Ru(phen)_2ODBIP]~(2+)与两种序列G4-DNA相互作用的荧光光谱研究 | 第49页 |
3.3 探索配合物[Ru(phen)_2ODBIP]~(2+)与Cu~(2+)形成双核配合物的光谱性质研究 | 第49-51页 |
3.3.1 过渡金属离子Cu~(2+)对[Ru(phen)_2ODBIP]~(2+)的紫外光谱研究 | 第50-51页 |
3.3.2 过渡金属离子Cu~(2+)对[Ru(phen)_2ODBIP]~(2+)的荧光光谱研究 | 第51页 |
3.4 体外细胞毒性 | 第51-52页 |
3.5 细胞形态观察 | 第52页 |
3.6 细胞划痕迁移实验 | 第52-53页 |
3.7 Hoechst 33258 检测凋亡 | 第53-54页 |
3.8 蛋白免疫印迹分析 | 第54-55页 |
3.9 小结 | 第55-56页 |
第4章 含bpy辅助配体钌配合物的荧光成像及抗肿瘤活性研究 | 第56-69页 |
4.1 引言 | 第56页 |
4.2 [Ru(bpy)_2MNAIP]~(2+)对多种双链序列DNA的相互作用的光谱性质研究 | 第56-58页 |
4.2.1 [Ru(bpy)_2MNAIP]~(2+)对多种序列DNA的相互作用的紫外光谱研究 | 第56-57页 |
4.2.2 [Ru(bpy)_2MNAIP]~(2+)对多种序列DNA的相互作用的荧光光谱研究 | 第57-58页 |
4.3 [Ru(bpy)_2MNAIP]~(2+)与两种序列G4-DNA相互作用的光谱性质研究 | 第58-60页 |
4.3.1 [Ru(bpy)_2MNAIP]~(2+)与两种序列G4-DNA相互作用的紫外光谱研究 | 第58-59页 |
4.3.2 [Ru(bpy)_2MNAIP]~(2+)与两种序列G4-DNA相互作用的荧光光谱研究 | 第59-60页 |
4.4 [Ru(bpy)_2MNAIP]~(2+)对p BR322-DNA的光切割活性研究 | 第60-64页 |
4.4.1 不同波长光照条件凝胶电泳实验 | 第60-61页 |
4.4.2 时间梯度凝胶电泳实验 | 第61-62页 |
4.4.3 浓度梯度凝胶电泳实验 | 第62-63页 |
4.4.4 机理探索凝胶电泳实验 | 第63-64页 |
4.5 体外细胞毒性 | 第64-65页 |
4.6 细胞形态观察 | 第65页 |
4.7 细胞划痕迁移实验 | 第65-66页 |
4.8 Hoechst 33258 检测凋亡 | 第66-67页 |
4.9 蛋白免疫印迹分析 | 第67-68页 |
4.10 小结 | 第68-69页 |
第5章 含phen辅助配体钌配合物的荧光成像及抗肿瘤活性研究 | 第69-84页 |
5.1 引言 | 第69页 |
5.2 [Ru(phen)_2MNAIP]~(2+)对多种双链序列DNA的相互作用的光谱性质研究 | 第69-71页 |
5.2.1 [Ru(phen)_2MNAIP]~(2+)对多种序列DNA的相互作用的紫外光谱研究 | 第69-70页 |
5.2.2 [Ru(phen)_2MNAIP]~(2+)对多种序列DNA的相互作用的荧光光谱研究 | 第70-71页 |
5.3 [Ru(phen)_2MNAIP]~(2+)与两种序列G4-DNA相互作用的光谱性质研究 | 第71-73页 |
5.3.1 [Ru(phen)_2MNAIP]~(2+)与两种序列G4-DNA相互作用的紫外光谱研究 | 第71-72页 |
5.3.2 [Ru(phen)_2MNAIP]~(2+)与两种序列G4-DNA相互作用的荧光光谱研究 | 第72-73页 |
5.4 [Ru(phen)_2MNAIP]~(2+)对p BR322-DNA的光切割活性研究 | 第73-77页 |
5.4.1 不同波长光照条件凝胶电泳实验 | 第73-74页 |
5.4.2 时间梯度凝胶电泳实验 | 第74-75页 |
5.4.3 浓度梯度凝胶电泳实验 | 第75-76页 |
5.4.4 机理探索凝胶电泳实验 | 第76-77页 |
5.5 体外细胞毒性 | 第77页 |
5.6 细胞形态观察 | 第77-78页 |
5.7 细胞划痕迁移实验 | 第78-79页 |
5.8 流式细胞仪检测[Ru(phen)_2MNAIP]~(2+)诱导细胞凋亡 | 第79-80页 |
5.9 Hoechst 33258 检测凋亡 | 第80-82页 |
5.9.1 两种不同辅助配体的Hoechst 33258 检测对比 | 第81-82页 |
5.10 蛋白免疫印迹分析 | 第82-83页 |
5.11 小结 | 第83-84页 |
第6章 总结与展望 | 第84-88页 |
参考文献 | 第88-93页 |
致谢 | 第93-95页 |
攻读硕士学位期间的研究成果 | 第95页 |
主持的科研项目 | 第95页 |