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类手枪脱氧核酶酶学及其对铜离子检测应用研究

中文摘要第4-7页
Abstract第7-9页
第1章 绪论第14-30页
    1.1 脱氧核酶发展概述第14页
    1.2 脱氧核酶分类第14-24页
        1.2.1 断裂型脱氧核酶第15-19页
        1.2.2 连接型脱氧核酶第19-22页
        1.2.3 其他类型脱氧核酶第22-24页
    1.3 脱氧核酶的应用第24-29页
        1.3.1 基因沉默第24-25页
        1.3.2 DNA分子机器第25页
        1.3.3 生物传感器第25-27页
        1.3.4 其他应用第27-29页
    1.4 脱氧核酶研究意义第29-30页
第2章 实验用品与方法第30-36页
    2.1 实验仪器第30-31页
    2.2 实验试剂及配置方法第31-32页
    2.3 实验材料第32-33页
    2.4 实验方法第33-34页
        2.4.1 变性聚丙烯酰胺凝胶电泳实验第33页
        2.4.2 荧光实验第33页
        2.4.3 可见光光谱试验第33-34页
        2.4.4 水样品取样方法第34页
    2.5 拟合方程第34-36页
第3章 类手枪脱氧核酶与辅因子关系第36-65页
    3.1 前言第36页
    3.2 类手枪脱氧核酶与常规辅因子关系第36-40页
        3.2.1 类手枪脱氧核酶与抗坏血酸、过氧化氢和铜离子关系第36-39页
        3.2.2 抗坏血酸/二价金属离子对类手枪脱氧核酶作用第39-40页
    3.3 类手枪脱氧核酶与还原型谷胱甘肽关系第40-44页
        3.3.1 还原型谷胱甘肽在类手枪脱氧核酶催化中的三种作用第40-41页
        3.3.2 还原型谷胱甘肽/二价金属离子对类手枪脱氧核酶作用第41-43页
        3.3.3 离子螯合剂抑制作用第43页
        3.3.4 类手枪脱氧核酶断裂程度与时间关系第43-44页
    3.4 类手枪脱氧核酶辅因子扩展第44-47页
        3.4.1 维生素类化合物第45-46页
        3.4.2 巯基类化合物第46页
        3.4.3 酚类化合物第46-47页
        3.4.4 胺类化合物第47页
    3.5 类手枪脱氧核酶与多巴胺关系第47-55页
        3.5.1 多巴胺及其代谢产物活性鉴定第48-49页
        3.5.2 多巴胺反应条件优化第49-52页
        3.5.3 离子选择性、干扰性、抑制试验第52-54页
        3.5.4 多巴胺及其代谢产物最优条件下的活性比较第54-55页
    3.6 羟自由基在类手枪脱氧核酶催化过程中作用第55-60页
        3.6.1 二价金属离子与过氧化氢作用生成羟自由基能力第55-57页
        3.6.2 过氧化氢/二价金属离子对类手枪脱氧核酶作用第57-60页
    3.7 超氧阴离子和过氧化氢在类手枪脱氧核酶催化过程中作用第60-63页
        3.7.1 类手枪脱氧核酶与邻苯三酚及核黄素关系第60-61页
        3.7.2 超氧化物歧化酶和过氧化氢酶对类手枪脱氧核酶作用第61-62页
        3.7.3 次黄嘌呤/黄嘌呤氧化酶对类手枪脱氧核酶作用第62-63页
    3.8 本章结论第63-65页
第4章 类手枪脱氧核酶构效关系第65-79页
    4.1 前言第65-66页
    4.2 类手枪脱氧核酶催化核心构效关系第66-71页
        4.2.1 4组辅因子条件下各突变体活性变化第67-70页
        4.2.2 各突变体催化核苷酸保守程度波动第70-71页
        4.2.3 单碱基突变与二级结构关系第71页
    4.3 突变体T3G酶学性质表征第71-77页
        4.3.1 类手枪脱氧核酶与T3G突变体的活性比较第72-73页
        4.3.2 反应条件优化第73-77页
        4.3.3 离子选择性第77页
    4.4 结论第77-79页
第5章 基于类手枪脱氧核酶构建铜离子传感器第79-108页
    5.1 前言第79-80页
    5.2 铜离子传感器PL-Cu1.0研究第80-96页
        5.2.1 反式类手枪脱氧核酶与还原型谷胱甘肽关系第80-82页
        5.2.2 铜离子传感器PL-Cu1.0设计与检测原理第82页
        5.2.3 铜离子传感器PL-Cu1.0初步鉴定及条件优化第82-86页
        5.2.4 铜离子传感器PL-Cu1.0灵敏度、专一性和抗干扰鉴定第86-88页
        5.2.5 瓶装水和自来水中铜离子含量检测第88-90页
        5.2.6 铜离子传感器PL-Cu1.0与其他铜离子传感器比较第90-96页
    5.3 铜离子传感器PL-Cu2.0研究第96-106页
        5.3.1 辅因子及荧光基团的选择第96-98页
        5.3.2 二硫苏糖醇/铜离子体系无荧光信号原因第98-101页
        5.3.3 铜离子传感器PL-Cu2.0条件优化第101-104页
        5.3.4 铜离子传感器PL-Cu2.0灵敏度、专一性和抗干扰鉴定第104-105页
        5.3.5 铜锅中铜离子含量检测第105-106页
    5.4 结论第106-108页
参考文献第108-123页
研究生期间科研成果第123-124页
致谢第124页

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