摘要 | 第4-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
英文缩写表 | 第13-14页 |
引言 | 第14-16页 |
第1章 文献综述 | 第16-24页 |
1.1 肝癌的转移 | 第16-18页 |
1.1.1 肿瘤的转移 | 第16-17页 |
1.1.2 MiRNA与肝癌转移 | 第17-18页 |
1.2 MiR-27a与肝癌转移 | 第18-20页 |
1.2.1 MiR-27a简介 | 第18-19页 |
1.2.2 MiR-27a与肝癌转移 | 第19页 |
1.2.3 MiR-27a的靶基因SFRP1 | 第19-20页 |
1.2.4 SFRP1的甲基化 | 第20页 |
1.3 Wnt/β-catenin信号通路与肝癌转移 | 第20-22页 |
1.4 纳米复合粒子的构建 | 第22-23页 |
1.5 总结与展望 | 第23-24页 |
第2章 实验材料与方法 | 第24-39页 |
2.1 实验材料 | 第24-30页 |
2.1.1 药品与试剂 | 第24-25页 |
2.1.2 主要仪器 | 第25-26页 |
2.1.3 主要溶液配制 | 第26-30页 |
2.2 实验方法 | 第30-39页 |
2.2.1 HA-PEI/anti-miR-27a的合成 | 第30-31页 |
2.2.2 细胞培养 | 第31-32页 |
2.2.3 MTT法测定HA-PEI/anti-miR-27a纳米复合粒子的细胞迁移浓度 | 第32页 |
2.2.4 荧光显微镜观察HA-PEI/anti-miR-27a纳米复合粒子 的细胞导入 | 第32页 |
2.2.5 Trizol法提取细胞内总RNA | 第32-33页 |
2.2.6 RNA逆转录为c DNA | 第33-34页 |
2.2.7 Real-Time PCR反应及结果分析 | 第34页 |
2.2.8 细胞蛋白的提取及浓度测定 | 第34-35页 |
2.2.9 Western blot | 第35-36页 |
2.2.10 细胞迁移实验 | 第36-37页 |
2.2.11 细胞划痕实验 | 第37页 |
2.2.12 细胞粘附实验 | 第37-38页 |
2.2.13 统计学分析 | 第38-39页 |
第3章 实验结果 | 第39-52页 |
3.1 HA-PEI/anti-miR-27a纳米复合粒子的体外释放 | 第39页 |
3.2 细胞增殖活性实验 | 第39-40页 |
3.3 HA-PEI/anti-miR-27a纳米复合粒子进入Hep G2细胞的荧光检测 | 第40-42页 |
3.3.1 HA-PEI/anti-miR-27a纳米复合粒子转染效率检测 | 第40-41页 |
3.3.2 HA-PEI/anti-miR-27a纳米复合粒子靶向性检测 | 第41-42页 |
3.4 HA-PEI/anti-miR-27a纳米粒子对Hep G2细胞迁移的影响 | 第42-46页 |
3.4.1 划痕实验 | 第42-44页 |
3.4.2 细胞迁移实验 | 第44-46页 |
3.5 粘附实验 | 第46-49页 |
3.5.1 细胞-基质粘附实验 | 第46-48页 |
3.5.2 细胞间粘附实验 | 第48-49页 |
3.6 HA-PEI/anti-miR-27a纳米复合粒子对Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白表达的影响 | 第49-52页 |
第4章 讨论 | 第52-56页 |
第5章 结论 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-63页 |
致谢 | 第63页 |