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硫化氢在膝关节骨性关节炎发病机制中的作用研究

摘要第2-7页
Abstract第7-13页
第一章 膝关节骨性关节炎患者滑液中硫化氢的动态变化及临床意义第17-34页
    引言第17-19页
    资料与方法第19-24页
        1 研究资料第19-20页
            1.1 研究资料来源第19页
            1.2 样本量的评估第19页
            1.3 病例收纳与排除标准第19-20页
            1.4 膝关节骨性关节炎的影像学分期标准第20页
        2 主要试剂与仪器设备第20-21页
            2.1 主要试剂第20-21页
            2.2 主要仪器设备第21页
        3 实验方法及步骤第21-24页
            3.1 样本的采集及处理第21-22页
            3.2 实验方法第22-23页
            3.3 统计学方法第23-24页
    结果第24-27页
        1.1 样本一般资料第24页
        1.2. 正常对照组与骨性关节炎患者各期关节滑液内H_2S表达水平的比较第24-25页
        1.3.关节内CBS、CSE定位分布表达情况第25-27页
    讨论第27-29页
    结论第29-30页
    参考文献第30-34页
第二章 H_2S对兔膝关节骨性关节炎模型中关节软骨影响的实验研究第34-54页
    引言第34页
    材料与方法第34-42页
        1 实验动物、试剂与仪器第34-37页
            1.1 实验动物第34-35页
            1.2 主要试剂第35-36页
            1.3 主要实验仪器第36页
            1.4 NaHS的配制、储存及使用第36-37页
        2 实验方法第37-42页
            2.1 实验分组第37页
            2.2 造模方法第37-38页
            2.3 给药方法第38页
            2.4 兔膝关节液样本的收集第38页
            2.5 动物实验样本采集第38页
            2.6 关节液中NO和PGE_2含量的检测第38-39页
            2.7 组织学观察第39页
            2.8 免疫组织化学染色法观察Ⅱ型胶原蛋白的表达情况第39-40页
            2.9 Real-Time PCR检测关节软骨中MMP-13、COX-2、iNOS的基因表达情况:第40-42页
        3 统计方法第42页
    结果第42-47页
        2.1 倒置显微镜下关节软骨病变情况第42-43页
        2.2 改良Mankin’s评分结果第43-44页
        2.3 兔膝关节液中NO、PGE_2含量的检测第44页
        2.4 关节软骨中Ⅱ型胶原蛋白表达情况第44-45页
        2.5 关节软骨中MMP-13、COX-2、iNOS的mRNA表达情况第45-47页
    讨论第47-50页
    结论第50-51页
    参考文献第51-54页
第三章 硫化氢通过NF-κB途径抑制IL-1β诱导的软骨细胞损伤第54-77页
    引言第54-55页
    材料与方法第55-63页
        1 实验试剂第55-57页
        2. 实验仪器设备第57页
        3 实验方法第57-62页
            3.1 软骨细胞的分离与培养第57-58页
            3.2 软骨细胞鉴定第58页
            3.3 软骨细胞增殖活力分析第58页
            3.4 检测软骨细胞上清液中NO、PGE_2、MMP-13蛋白的含量第58-59页
            3.5 Real-Time RNA检测软骨细胞中MMP-13、iNOS、COX-2 的mRNA表达情况第59-60页
            3.6 Western blot第60-62页
            3.7 NF-κB(P65)的DNA结合活性分析第62页
            3.8 PD98059对ERK1/2 磷酸化与NF-κB(P65)的影响第62页
        4. 统计方法第62-63页
    结果第63-70页
        3.1. 软骨细胞鉴定第63页
        3.2.硫化氢对软骨细胞增殖活性的影响第63-64页
        3.3.硫化氢抑制IL-1β诱导的软骨细胞分泌NO、PGE_2、MMP-13第64-65页
        3.4. 硫化氢抑制IL-1β诱导的软骨细胞iNOS、COX-2、MMP-13的mRNA表达第65-67页
        3.5. IL-1β 对ERK1/2 及NF-κB信号通路的影响第67-68页
        3.6. 硫化氢对ERK1/2 及NF-κB信号通路的影响第68-69页
        3.7. PD98059(ERK1/2 上游抑制剂)对硫化氢保护IL-1β损伤软骨细胞作用的影响第69-70页
    讨论第70-72页
    结论第72-73页
    参考文献第73-77页
综述第77-96页
    参考文献第87-96页
攻读学位期间的研究成果第96-97页
致谢第97-98页

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