| 摘要 | 第2-3页 |
| Abstract | 第3-4页 |
| 引言 | 第7-9页 |
| 第一部分 慢性乙肝患者血清中Akt2的表达与HBV DNA的关系研究 | 第9-15页 |
| 1.1 实验材料 | 第9-10页 |
| 1.1.1 主要仪器和设备 | 第9页 |
| 1.1.2 主要试剂和器材 | 第9-10页 |
| 1.2 实验方法 | 第10-13页 |
| 1.2.1 研究对象 | 第10页 |
| 1.2.2 血清中HBV DNA载量的测定 | 第10页 |
| 1.2.3 实验分组 | 第10页 |
| 1.2.4 血清Akt2表达水平的测定 | 第10-12页 |
| 1.2.5 统计学分析 | 第12-13页 |
| 1.3 结果 | 第13-14页 |
| 1.3.1 慢性乙型病毒肝炎患者HBV DNA病毒载量和细胞中Akt2蛋白表达水平的比较 | 第13-14页 |
| 1.4 讨论 | 第14-15页 |
| 第二部分 Akt2基因在人HepG2和HepG2.2.15中的表达特点 | 第15-24页 |
| 2.1 HepG2和HepG2.2.15细胞的培养和观察 | 第15-20页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第15-16页 |
| 2.1.1.0 细胞株 | 第15页 |
| 2.1.1.1 主要仪器设备 | 第15页 |
| 2.1.1.2 主要试剂和器材 | 第15-16页 |
| 2.1.1.3 主要试剂的配制及保存 | 第16页 |
| 2.1.2 实验方法 | 第16-19页 |
| 2.1.2.1 HepG2和HepG2.2.15细胞的复苏 | 第16-17页 |
| 2.1.2.2 HepG2和HepG2.2.15细胞的换液 | 第17页 |
| 2.1.2.3 HepG2和HepG2.2.15细胞的传代 | 第17-18页 |
| 2.1.2.4 HepG2和HepG2.2.15细胞的冻存 | 第18-19页 |
| 2.1.3 结果 | 第19-20页 |
| 2.2 HBV对HepG2和HepG2.2.15中Akt2表达的影响 | 第20-24页 |
| 2.2.1 实验方法 | 第20-23页 |
| 2.2.1.1 人肝癌细胞系HepG2和HepG2.2.15细胞中Akt2mRNA的提取 | 第20-21页 |
| 2.2.1.2 HepG2和HepG2.2.15细胞总RNA的测定 | 第21-22页 |
| 2.2.1.3 逆转录制备cDNA | 第22页 |
| 2.2.1.4 Real-time PCR检测HepG2和HepG2.2.15细胞中Akt2的表达 | 第22-23页 |
| 2.2.2 Akt2m RNA 表达量的计算方法 | 第23-24页 |
| 第三部分 慢病毒介导的shRNA干扰人HepG2.2.15细胞Akt2基因表达及两组细胞中细胞上清液中HBV的含量 | 第24-37页 |
| 3.1 慢病毒介导的shRNA干扰人HepG2.2.15细胞Akt2基因表达 | 第24-28页 |
| 3.1.1 实验方法 | 第24-28页 |
| 3.1.1.1 慢病毒载体构建 | 第24-26页 |
| 3.1.1.2 慢病毒包装及滴度鉴定 | 第26页 |
| 3.1.1.3 shRNA慢病毒转染HepG2.2.15细胞 | 第26页 |
| 3.1.1.4 验证目的基因的表达 | 第26-28页 |
| 3.2 检测实验组与对照组HepG2.2.15细胞上清液中HBV的含量 | 第28页 |
| 3.2.1 实验方法 | 第28页 |
| 3.3 统计学分析 | 第28-29页 |
| 3.4 结果 | 第29-35页 |
| 3.4.1 HepG2和HepG2.2.15中Akt2 mRNA的相对表达量 | 第29页 |
| 3.4.2 载体质粒构建成功 | 第29-32页 |
| 3.4.3 在 HepG2.2.15细胞中评价重组慢病毒载体的干扰活性 | 第32-35页 |
| 3.5 讨论 | 第35-37页 |
| 第四部分 结论 | 第37-38页 |
| 参考文献 | 第38-41页 |
| 综述 | 第41-50页 |
| 综述参考文献 | 第46-50页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第50-51页 |
| 缩略词 | 第51-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
