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志贺菌中插入序列IS600的插入特点及其对cse2基因和Cas蛋白影响的生物信息学分析

摘要第4-7页
Abstract第7-9页
英文缩略词第14-15页
1 引言第15-18页
2 材料与方法第18-27页
    2.1 实验材料第18-21页
        2.1.1 菌株第18页
        2.1.2 实验器材第18-19页
        2.1.3 主要试剂及生产厂家第19页
        2.1.4 主要试剂配方第19-20页
        2.1.5 生物信息学软件第20页
        2.1.6 网络服务器第20-21页
        2.1.7 NCBI中所用志贺菌菌株信息及基因序列第21页
    2.2 实验方法第21-26页
        2.2.1 实验室保存志贺菌的复苏与鉴定第21-22页
        2.2.2 细菌的培养第22页
        2.2.3 细菌浊度的测定第22-23页
        2.2.4 分光光度法测细菌浓度第23页
        2.2.5 志贺菌基因组DNA的提取第23-24页
        2.2.6 测定核酸浓度第24页
        2.2.7 聚合酶链式反应(PCR)和凝胶电泳第24-26页
    2.3 研究技术路线第26-27页
3 结果第27-46页
    3.1 CRISPR相关蛋白基因cse2的PCR扩增第27页
    3.2 插入序列IS600的插入规律第27-30页
        3.2.1 插入序列IS600插入cse2基因的位置第27-28页
        3.2.2 插入序列IS600插入cse2基因的热点第28-30页
    3.3 cse2基因的生物信息学分析第30-46页
        3.3.1 序列翻译与开放阅读框(ORF)预测第30-32页
        3.3.2 蛋白理化性质第32-34页
        3.3.3 亲水性、疏水性分析第34-35页
        3.3.4 跨膜结构的预测第35页
        3.3.5 功能结构域的预测第35-36页
        3.3.6 二级结构预测第36-40页
        3.3.7 三级结构预测第40-42页
        3.3.8 蛋白质模型评估第42-46页
4 讨论第46-52页
    4.1 志贺菌中cse2基因中插入序列的特点第46-47页
    4.2 志贺菌中插入序列对Cse2蛋白的影响第47-48页
    4.3 志贺菌中插入序列对Cascade复合物的影响第48-50页
    4.4 志贺菌中插入序列对CRISPR/Cas系统的影响第50页
    4.5 插入序列与细菌耐药的关系第50-51页
    4.6 创新性与局限性第51-52页
5 结论第52-53页
参考文献第53-56页
附录第56-60页
综述 CRISPR/Cas系统的研究概况及生物信息学方法的应用第60-76页
    1 CRISPR/Cas系统第60-61页
    2 CRISPR/Cas系统的结构和分类第61-62页
        2.1 CRISPR/Cas系统的结构特点第61-62页
        2.2 CRISPR/Cas系统的分类第62页
    3 CRISPR/Cas系统的作用机制第62-64页
        3.1 适应阶段第63-64页
        3.2 表达阶段第64页
        3.3 干扰阶段第64页
    4 Cas蛋白的分类和功能第64-65页
    5 Cascade复合物的结构第65-66页
    6 蛋白质生物信息学分析常用软件第66-68页
        6.1 寻找开放阅读框(ORF)第66-67页
        6.2 计算蛋白理化性质第67页
        6.3 结构功能域分析第67页
        6.4 蛋白质二级结构预测第67页
        6.5 蛋白质三级结构预测第67-68页
    7 CRISPR/Cas系统的应用第68-69页
    结束语第69-70页
    参考文献第70-76页
个人简历第76-77页
致谢第77页

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